藥用植物葡萄和石蒜中某些生物活性成分的測定.pdf

1、近年來，藥用植物資源日益受到人們的廣泛關注。藥用植物中生物活性成分的含量測定對從植物選育到中草(成)藥產(chǎn)品質量及其臨床療效的評價等多個方面，既有經(jīng)濟意義同時更是關系到人們用藥安全和健康的大事。但由于藥用植物樣品基質十分復雜，其中生物活性成分的含量測定較為困難。本文對葡萄和石蒜中某些生物活性成分的提取和含量測定進行了研究，為這些植物資源的綜合利用和相關產(chǎn)品的質量控制提供一定的技術手段和實驗依據(jù)。 一、葡萄籽中白藜蘆醇含量的測定

2、 以乙酸乙酯為溶劑對葡萄籽中的白藜蘆醇進行提取，直接進行膠束電動色譜(MEKC)分離并測定白藜蘆醇含量。對葡萄籽中的白藜蘆醇，采用乙酸乙酯為溶劑經(jīng)索氏提取4 hr可一次性提取完全。優(yōu)化后的膠束電動色譜緩沖液組成為25mM硼砂溶液(pH 9.0)，其中含有25 mM十二烷基硫酸鈉(SDS)和2.5 mM β-環(huán)糊精硫酸鈉(SCD)。該方法對白藜蘆醇的檢出限為23.1 ng，加標回收率在92％-95％范圍內。此方法有效地使樣品制備技術液

3、相萃取和高效分離技術膠束電動色譜聯(lián)系起來。由于萃取后的有機相可以直接用于膠束電動色譜進樣分離測定，既減少了樣品基質的干擾，濃縮了分析物，又簡化了分析手續(xù)。方法具有相對簡便、快速、靈敏度高的特點。此方法間或可用于其他植物種子及提取物中的白藜蘆醇含量測定。 二、葡萄中谷胱甘肽含量的測定 以鄰苯二甲醛(OPA)為衍生化試劑衍生谷胱甘肽(GSH)，衍生產(chǎn)物提高了對GSH的熒光檢測靈敏度。優(yōu)化并建立了測定葡萄中谷胱甘肽的毛細管電泳

4、-熒光檢測方法。優(yōu)化的電泳分離條件為：分離電壓：25 kV，背景電解質：300 mM硼砂緩沖液(pH 8.0)。熒光檢測激發(fā)波長為340 nm和發(fā)射波長為420 nm。上述方法工作曲線的線性回歸方程為y=5.9673x+0.7822，相關系數(shù)為0.9998。且加標回收率較好。此方法可以用于葡萄中谷胱甘肽的含量測定以及葡萄飲料中谷胱甘肽質量控制。 三、石蒜中加蘭他敏和力可拉敏的提取、定量分析方法比較 探索了從石蒜中索氏提取

5、加蘭他敏和力可拉敏的實驗條件，確定了以甲醇為提取溶劑，于85℃下索氏提取3小時的樣品制備方法。優(yōu)化并建立了測定石蒜中加蘭他敏和力可拉敏的含量的高效液相色譜法(HPLC)和毛細管區(qū)帶電泳法(CZE)。高效液相色譜的流動相為磷酸鹽緩沖液-甲醇-乙腈(92.5:5:2.5，v/v/v)，流動相流速為1.0 mL/min。毛細管區(qū)帶電泳的分離電壓為20 kV，背景電解質為50 mM磷酸緩沖液(pH 5.0)中加入10％乙腈溶液。檢測波長均為21