白靈菇雜交育種快速篩選體系的構建.pdf

1、白靈菇（Pleurotus nebrodensis）又名白靈側耳、阿魏菇，肉質鮮美、風味獨特，是一種營養(yǎng)、藥用價值極高的珍惜食藥用真菌，市場前景廣闊，極具開發(fā)潛力。但由于白靈菇栽培品種退化嚴重、生產周期長、生物學轉化率低，導致了白靈菇栽培效益低，影響了白靈菇產業(yè)的發(fā)展。本試驗利用分子標記技術建立白靈菇單核菌株交配型的快速鑒別體系和優(yōu)良雜交子的快速篩選體系，以縮短白靈菇雜交育種的周期，為白靈菇育種工作提供理論依據，加快育種進程，保證白靈菇

2、產業(yè)健康快速發(fā)展。本研究得到以下結果:
　　1.采用原生質體單核化技術處理白靈菇菌株H55×I-630，通過鏡檢得到39個單核菌株。然后進行拮抗試驗，成功獲得正極性單核菌株為24個，負極性單核菌株為15個。隨機選取正、負極性單核菌株各5個，與親本菌株進行ISSR和SRAP分子標記，并進行SCAR標記的開發(fā)，得到7對特異性引物，其中正極性引物為3條，負極性引物4條。多重PCR驗證結果正確。
　　2.將退化的白靈菇菌株“白10”

3、進行原生質體單核化，得到52個單核菌株，將不同極性的單核菌株進行拮抗試驗，挑取拮抗線部位菌絲，得到一株表型良好的雙核菌株，命名為“自雜體45×49”。分別測定“白10”和“自雜體45×49”的纖維素酶活性和漆酶活性，“自雜體45×49”的酶活性顯著高于退化菌株“白10”，并且利用比色法成功鑒別出退化菌株“白10”，從而對退化的“白10”進行了提純復壯。在菌絲生長階段利用YBLB試劑成功鑒別出退化的菌株“白10”;在菌絲發(fā)酵階段利用LBL