藥用植物揮發(fā)油的提取及抗抑郁活性研究.pdf

1、抑郁癥是一種常見(jiàn)的精神障礙，目前世界已有超過(guò)3.5億人患有抑郁癥，遍布各個(gè)年齡層，每年約有80萬(wàn)人因?yàn)橐钟舭Y而自殺。抑郁癥會(huì)嚴(yán)重影響人們的身心健康，也會(huì)給社會(huì)帶來(lái)極大的負(fù)擔(dān)。當(dāng)前臨床上常用的抗抑郁藥物主要是西藥，但是西藥治療具有副作用大的缺點(diǎn)，且受到中華傳統(tǒng)文化影響，患者常拒絕服用傳統(tǒng)抗抑郁藥。因此開(kāi)發(fā)出更多副作用較小、患者較易接受的抗抑郁藥物具有重要的意義。目前，天然產(chǎn)物由于副作用小等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)越來(lái)越受到關(guān)注，而且其天然屬性使得人們較易

2、接受。揮發(fā)油是一種具有多方面藥理活性的天然產(chǎn)物，包括抗抑郁活性。揮發(fā)油的提取方法多種多樣，影響著揮發(fā)油的得油率、成分組成以及各成分相對(duì)百分含量，而揮發(fā)油的化學(xué)成分組成與揮發(fā)油的藥理活性密切相關(guān)。選擇合適的提取方法得到所需揮發(fā)油后，對(duì)揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行分析，可以為揮發(fā)油的藥理活性研究提供一定的理論依據(jù)；再對(duì)揮發(fā)油的抗抑郁活性進(jìn)行探究，可以開(kāi)發(fā)出更多具有抗抑郁作用的新產(chǎn)物，具有重要的意義。
　　羅勒、甜橙和薰衣草均是富含揮發(fā)油的藥用

3、植物，且羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油均已被證明具有一定的神經(jīng)生物活性，如抗焦慮活性。焦慮患者會(huì)在一定情況下轉(zhuǎn)為抑郁，而抑郁患者也極有可能最終患上焦慮，焦慮與抑郁之間的關(guān)系密不可分。羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油均具有抗焦慮作用，也極有可能具有抗抑郁作用，因此本文選擇羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油為研究對(duì)象。首先，以羅勒揮發(fā)油為例，研究水蒸氣蒸餾法（Steam Distillation,SD）、索氏提取法（Soxhle

4、t Extraction,SE）、超臨界CO2萃取法（Supercritical CO2 Extraction,SFE）與超聲輔助萃取法（Ultrasonic Assisted Extraction,UAE）對(duì)揮發(fā)油的得油率、化學(xué)成分以及各成分相對(duì)百分含量的影響，為現(xiàn)代藥用植物制劑生產(chǎn)過(guò)程的提取方法提供一定的參考依據(jù)。然后，采用SD法對(duì)羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油進(jìn)行提取后，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法（Gas chromatog

5、raphy-Mass spectrometry,GC-MS）對(duì)三種揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行分析，以期為三種揮發(fā)油的抗抑郁活性研究提供更多的物質(zhì)基礎(chǔ)依據(jù)。最后采用動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)初步探究了羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油與薰衣草揮發(fā)油的抗抑郁活性，采用志愿者實(shí)驗(yàn)初步探究了羅勒揮發(fā)油對(duì)志愿者的抗抑郁活性，為開(kāi)發(fā)更多具有抗抑郁作用的藥物或保健品提供參考依據(jù)，為預(yù)防和治療抑郁癥提供更多的選擇。本論文主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　1.對(duì)羅勒揮發(fā)油的提取工藝進(jìn)行研

6、究。采用SD法、SE法、SFE法以及UAE法對(duì)羅勒揮發(fā)油進(jìn)行提取，通過(guò)GC-MS對(duì)揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分析。結(jié)果表明，不同的提取方法對(duì)羅勒揮發(fā)油的得油率、成分組成以及各成分相對(duì)百分含量有影響。四種方法提取所得揮發(fā)油的得油率高低分別為SFE法（1.10％）>SE法（0.86%）>UAE法（0.72%）>SD法（0.40%），SD法、SE法、SFE法以及UAE法提取得到的揮發(fā)油分別鑒定了48、45、42、49種成分，獨(dú)有成分分別為14、9、1

7、7、8種，共有成分為21種。SD法提取得到的揮發(fā)油的主要成分是草蒿腦（46.83%）和芳樟醇（20.06%），SE法是9,12,15-十八烷三烯-1-醇（28.79%）、α-杜松醇（8.40%）和草蒿腦（8.23%），SFE法是草蒿腦（42.25%）和芳樟醇（10.73%），UAE法是草蒿腦（28.50%）、芳樟醇（9.45%）和亞麻酸（7.84%）。不同的化學(xué)成分具有不同的生理活性與藥用價(jià)值，因此在綜合考慮所需要的組分后，選擇合適的提

8、取方法或多種方法聯(lián)合提取揮發(fā)油可以得到最大的效益。
　　2.對(duì)羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油進(jìn)行提取及成分分析。采用SD法提取羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油，再通過(guò)GC-MS技術(shù)對(duì)三種揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行分析鑒定。羅勒揮發(fā)油鑒定了48種化合物，主要成分是草蒿腦（46.83%）和芳樟醇（20.06%），甜橙揮發(fā)油鑒定了25種，主要成分是檸檬烯（41.77%）、草蒿腦（24.10%）和芳樟醇（17.00%），薰衣草揮發(fā)油為

9、42種，主要成分是芳樟醇（20.12%）和乙酸熏衣草酯（10.69%）。三種揮發(fā)油成分有一定差異，但其主要成分均有芳樟醇。羅勒揮發(fā)油和甜橙揮發(fā)油中共同主要成分有草蒿腦，甜橙揮發(fā)油中檸檬烯的相對(duì)百分含量高達(dá)41.77%。芳樟醇和草蒿腦均已被證明具有抗抑郁活性，檸檬烯也具有一定的神經(jīng)生物活性，因此羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油可能均具有一定的抗抑郁活性。
　　3.利用動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油及薰衣草揮發(fā)油的抗抑郁活

10、性進(jìn)行初步探討。利用開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（Open Field Test,OFT）探究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的跨格次數(shù)和站立次數(shù)等自主活動(dòng)的變化，再通過(guò)懸尾實(shí)驗(yàn)（Tail Suspension Test,TST）以及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)（Forced Swimming Test,FST）探究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的不動(dòng)時(shí)間變化。結(jié)果表明，羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油以及薰衣草揮發(fā)油均不改變動(dòng)物在OFT中的跨格次數(shù)和站立次數(shù)，從而排除了由于動(dòng)物的自主活動(dòng)增加而造成的假陽(yáng)性結(jié)果。羅勒揮發(fā)油、甜

11、橙揮發(fā)油及薰衣草揮發(fā)油均能減少動(dòng)物在TST和FST中的不動(dòng)時(shí)間，說(shuō)明羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油及薰衣草揮發(fā)油具有抗抑郁活性。且羅勒揮發(fā)油的抗抑郁效果最好，甜橙揮發(fā)油次之，最后是薰衣草揮發(fā)油。因此，羅勒揮發(fā)油、甜橙揮發(fā)油和薰衣草揮發(fā)油均有望開(kāi)發(fā)成預(yù)防或治療抑郁的保健品或藥品。
　　4、通過(guò)志愿者實(shí)驗(yàn)對(duì)羅勒揮發(fā)油在人體身上的抗抑郁作用進(jìn)行初步探討。通過(guò)比較志愿者香薰羅勒揮發(fā)油和超純水前后的癥狀自評(píng)量表SCL90（Self-Reportin

12、g Inventory,SCL90）抑郁均分的差異和兩組志愿者香薰前后抑郁均分差值的差異來(lái)初步探討羅勒揮發(fā)油的抗抑郁活性。結(jié)果表明，香薰羅勒揮發(fā)油的志愿者香薰后的抑郁均分下降，香薰前后的抑郁均分的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而香薰超純水的志愿者香薰后的抑郁均分下降不明顯，香薰前后抑郁均分的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而且羅勒揮發(fā)油組志愿者抑郁均分差值與超純水組志愿者抑郁均分差值具有顯著性差異，羅勒揮發(fā)油組志愿者抑郁均分下降更為明顯。結(jié)果說(shuō)明羅勒揮發(fā)油