連翹揮發(fā)油提取工藝及其初步活性的研究.pdf

1、本文研究實(shí)驗(yàn)?zāi)康模翰捎脤?duì)比研究的方法，篩選和優(yōu)化連翹揮發(fā)油的提取工藝；研究青翹揮發(fā)油及其主要成分B-蒎烯的體外抑菌作用。 實(shí)驗(yàn)方法一、連翹提取工藝的篩選。 1、以收油率為指標(biāo)，采用5因素3水平正交試驗(yàn)，SFE-CO2萃取青翹揮發(fā)油；并與SD提取揮發(fā)油的3因素3水平正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了比較研究。 2、考察夾帶劑(95％乙醇)對(duì)SFE-CO2萃取青翹揮發(fā)油的收油率及B-蒎烯含量的影響。 3、HPLC測(cè)定SFE-

2、CO2萃取青翹的剩余藥渣中連翹苷含量。 4、建立測(cè)定青翹揮發(fā)油中β-蒎烯含量的方法。 5、依據(jù)收油率、β-蒎烯含量的綜合評(píng)分，評(píng)價(jià)SFE-CO2萃取與SD提取工藝。 實(shí)驗(yàn)方法二、青翹揮發(fā)油及β-蒎烯體外抑菌實(shí)驗(yàn)。 青翹揮發(fā)油及β-蒎烯的體外抑菌實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)青翹揮發(fā)油及β-蒎烯的抑菌活性。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1、以收油率為指標(biāo)，SFE-CO2萃取青翹揮發(fā)油的最佳工藝條件為萃取壓力30MPa、萃取溫度

3、32℃、分離Ⅰ壓力6.6MPa、分離Ⅰ溫度30℃、粉碎粒度為2.0mm；采用3因素3水平正交試驗(yàn)，SD提取揮發(fā)油收率最佳的工藝條件為加水量10倍、蒸餾時(shí)間8h、粉碎粒度為2.0mm。 2、夾帶劑能增加SFE-CO2萃取青翹揮發(fā)油的收油率和β-蒎烯的含量，但不同量的夾帶劑對(duì)收油率也無(wú)明顯影響。 3、SFE-CO2萃取青翹的剩余藥渣中富集連翹苷，連翹苷含量高達(dá)0.64％，而青翹藥材中僅為0.35％。 4、建立了測(cè)定青

4、翹揮發(fā)油中β-蒎烯含量的方法，即環(huán)己酮為內(nèi)標(biāo)，色譜條件為色譜柱，AgilentDB-5(30m，0.53mm)，膜厚1.0μm;載氣：高純氮，體積流量：30ml/min；燃?xì)猓簹錃猓w積流量30ml/min；空氣，體積流量300ml/mim；檢測(cè)器：氫焰離子化檢測(cè)器(FID)，溫度200℃；進(jìn)樣口溫度：200℃；柱溫：80℃；進(jìn)樣量1μL，理論板數(shù)按連翹苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。 5、以青翹揮發(fā)油的收油率、β-蒎烯含量為綜合評(píng)分

5、指標(biāo)，SFE-CO2萃取揮發(fā)油的最佳工藝條件是，萃取壓力40MPa、萃取溫度32℃、分離Ⅰ壓力6.6MPa、分離溫度30℃、粉碎粒度為2.0mm；SD提取揮發(fā)油收率最佳工藝條件是，加水量12倍、蒸餾時(shí)間6h、粉碎粒度為2.0mm。 6、青翹揮發(fā)油及β-蒎烯的體外抑菌實(shí)驗(yàn)證明，β-蒎烯(100mg/ml)對(duì)臨床株：肺炎球菌，流感嗜血桿菌，淋病奈瑟球菌，空腸彎曲菌，綠膿桿菌，奇異變形桿菌；標(biāo)準(zhǔn)株：綠膿桿菌ATCC27853、大腸桿菌

6、ATCC25922、肺炎克雷伯桿菌ATCC13883、金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希氏菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、乙型鏈球菌(質(zhì)控株)、福氏痢疾桿菌(質(zhì)控株)、甲型副傷寒桿菌(質(zhì)控株)、乙型副傷寒桿菌(質(zhì)控株)、傷寒沙門(mén)氏菌(質(zhì)控株)、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(質(zhì)控株)具有抑制作用；青翹揮發(fā)油對(duì)綠膿桿菌ATCC27853、大腸桿菌ATCC25922、金黃色葡萄ATCC25923、大腸埃希氏菌ATCC259

7、22、乙型鏈球菌(質(zhì)控株)、福氏痢疾桿菌(質(zhì)控株)、流感嗜血桿菌(臨床株)、淋病奈瑟球菌(臨床株)、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(質(zhì)控株)具有抑制菌作用。 研究結(jié)論： 1、首次考察了青翹SFE-CO2萃取后的剩余藥渣中富集具有生物活性的連翹苷，表明該藥渣具有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)與研究的價(jià)值。 2、建立了一種簡(jiǎn)便易行且可靠的測(cè)定青翹揮發(fā)油中β-蒎烯含量的方法。 3、證實(shí)青翹揮發(fā)油具有抑菌活性，發(fā)現(xiàn)β-蒎烯(110mg/ml)對(duì)