創(chuàng)作創(chuàng)面外用阿杰姆_納米銀敷料后納米銀在體內(nèi)的分布及毒理安全性研究.pdf

1、研究背景：
　　 自古以來,人們就已了解銀是一種安全的廣譜性殺菌材料。如今,在臨床上人們已廣泛使用磺胺嘧啶銀等來治療燒傷燙傷以防止綠膿菌等細菌的繁衍,將硝酸銀水溶液用于眼科消炎,用銀汞合金作為牙科材料。然而,人長期暴露于銀時會產(chǎn)生銀中毒或銀質(zhì)沉著病,抗生素的出現(xiàn)使銀漸漸淡出抗菌劑行列。
　　 現(xiàn)代納米技術(shù)使古老的銀重放異彩,納米尺度的銀顯示出非同尋常的物理、化學和生物學性能.與普通銀相比,納米銀在電學、光學和催化等眾多方

2、面具有更優(yōu)異的性能,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于陶瓷材料、環(huán)保材料和涂料等許多領(lǐng)域。由于納米銀粒具有優(yōu)異的抗菌活性,所以在醫(yī)學上也得到了廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)在含納米銀的醫(yī)療產(chǎn)品包括納米銀織物、納米銀燒燙傷貼、納米銀抗菌敷料、納米銀導尿管、納米銀眼藥、納米銀生物材料、納米銀骨水泥、含納米銀的心臟瓣膜、納米銀隱形避孕套等。納米銀在醫(yī)學領(lǐng)域的應(yīng)用已經(jīng)成為研究的熱點。
　　 隨著產(chǎn)品的不斷開發(fā)和應(yīng)用,人們在日常生活和工作中接觸到納米銀的機會越來越多,納米銀粒

3、子也因此獲得了以多種途徑進入人體并與體內(nèi)不同組織、細胞或生物分子相互作用的可能。特別是在醫(yī)學領(lǐng)域,納米銀產(chǎn)品可直接應(yīng)用于人體,與血液、體液或淋巴系統(tǒng)接觸.與其他納米材料相比,除了分散在空氣中的納米銀可經(jīng)呼吸道或皮膚進入人體外,醫(yī)用產(chǎn)品中的納米銀更易直接進入血液循環(huán)系統(tǒng),并可能分布于全身其他臟器而產(chǎn)生毒副作用.然而,與納米銀產(chǎn)品的快速市場化形成鮮明對照的是,人們對以不同途徑進入體內(nèi)的納米銀可能產(chǎn)生的負面生物效應(yīng)或毒副作用還知之甚少,對納米

4、銀在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄等體內(nèi)行為也缺乏系統(tǒng)研究,這將對納米銀的進一步開發(fā)應(yīng)用帶來潛在影響。
　　 本研究試圖通過阿杰姆(R)納米銀敷料處理兔耳腹部創(chuàng)面后,納米銀在兔體內(nèi)如血、肝、腎、脾中的吸收和分布及納米銀對血液生理生化指標的影響進行研究,以評價納米銀敷料的生物安全性,期望為納米銀敷料的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 2.對納米銀進行毒理學安全性評價,為研制安全有效的納米銀藥物或含納米銀材料提供實驗依據(jù)。

5、　　 第一章創(chuàng)傷創(chuàng)面外用阿杰姆(R)納米銀敷料后納米銀在體內(nèi)的分布研究
　　 目的：
　　 通過對阿杰姆(R)納米銀抗菌醫(yī)用敷料處理兔耳腹部創(chuàng)面后,納米銀在兔體內(nèi)如血、肝、腎、脾中的吸收和分布情況,以評價納米銀敷料的生物安全性,期望為納米銀敷料的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.選擇體重2.0-2.5千克健康成年新西蘭白兔54只,隨機分為3組,每組各分為6小組,每小組3只,分別為:①空白對

6、照組A組;②單次敷料B組和③多次敷料組C組。每只實驗組動物均按兔耳創(chuàng)傷動物模型建立方法于雙耳腹側(cè)制作4個直徑為25mm的創(chuàng)面。A組,兔耳創(chuàng)面自然愈合,不使用納米銀生物敷料外敷;B組,兔耳創(chuàng)面只使用一次納米銀生物敷料外敷,7d后去除；C組,兔耳創(chuàng)面多次使用納米銀敷料外敷,其6小組分別于0d,2d,2d和4d,2d和4d,2d和4d,2d和4d更換敷料,7d后去除。
　　 2.各組具體的分組和造模見如下: A組:A組
　　

7、3.A組、B組和C組各自的6小組分別于制作創(chuàng)面后2d、4d、7d、14d、30d、60d6個時間點處死,并取得血(15ml)、肝、腎、脾。
　　 4.采用原子吸收法測定臟器中納米銀的含量,具體步驟如下:①剪碎臟器并混勻后,從中取1-2g,精確稱重記錄后放入消解管,利用超高壓微波消解儀系統(tǒng)消解。②將消解液轉(zhuǎn)入25ml容量瓶,并用去離子水定容。③用原子吸收光譜儀測定消解液中納米銀銀含量(μg/ml)。④將原子吸收所測得的消解液的濃度

8、(μg/ml)換算成臟器中的質(zhì)量濃度(μg/g)。
　　 5.統(tǒng)計學處理:用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析,實驗數(shù)據(jù)以(x)±s表示,多組均數(shù)間的比較采用單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.應(yīng)用納米銀敷料2d后,B組、C組白兔血液、肝、腎、脾中銀濃度均明顯高于A組(P<0.05)。
　　 2.應(yīng)用納米銀敷料第4d,B組、C組白兔各臟器銀濃度仍明顯高于A組(P<0.05)

9、,但C組白兔各臟器銀濃度隨時間呈進行性上升趨勢,而B組白兔各臟器銀濃度呈進行性下降。這種變化在第7d時更為明顯,C組白兔各臟器銀濃度顯著高于B組(P<0.05)。
　　 3.移除納米銀敷料后,B組、C組白兔各臟器銀含量均較前一時間點銀濃度顯著降低,尤以C組更為明顯(P<0.05)。
　　 4.制作創(chuàng)面后第30d和第60d,B組、C組白兔各臟器銀濃度與A組已無差異(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.

10、納米銀敷料用于創(chuàng)傷創(chuàng)面時,納米銀顆粒能迅速入血,通過血液循環(huán)分布于肝、腎、脾等重要臟器。
　　 2.移除納米銀敷料后,血、肝、腎、脾中納米銀含量迅速下降至正常值,不會產(chǎn)生銀累積現(xiàn)象。
　　 第二章阿杰姆(R)納米銀抗菌醫(yī)用敷料的毒性安全性研究
　　 目的：
　　 通過了解納米銀對血液生理生化指標的影響,評價納米銀的毒理學安全性。
　　 方法：
　　 動物分組同上,每只動物處死前一晚開始禁食

11、12h,讓其自由飲水,在清醒狀態(tài)下采血(采血后處死)。用于生理指標測定的血液樣品采集1mL,用于生化指標測定的血液樣品約3mL。采用HEMAVET950動物血細胞分析儀,用原配試劑和標準的常規(guī)方法對樣品中紅細胞、白細胞及血紅蛋白數(shù)等三項血液生理指標進行測定。采用Sysmex Chemix-180全自動血液生化分析儀,用專用試劑和標準的常規(guī)方法對樣品中的尿素氮、肌酐及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等三項生化指標進行測定。
　　 統(tǒng)計學處理：

12、r>　　 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,所有數(shù)據(jù)均以(X)±SD表示。采用完全隨機設(shè)計方差分析,組間多重比較用LSD法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.不同時間點內(nèi)正常對照A組及B、C兩組之間紅細胞數(shù)、白細胞數(shù)及血紅蛋白數(shù)比較,差異不顯著(P均大于0.05)。
　　 2.不同時間點內(nèi)正常對照A組及B、C兩組之間尿素氮、肌酐及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量比較,差異不顯著(P均大于0.