貴陽蚋類幼蟲寄生性索蟲的初步研究.pdf

1、目的：利用DNA條形碼研究貴陽市蚋類幼蟲感染索科線蟲的情況。
　　方法：（1）標本來源：選取貴陽市區(qū)內十個標本采集點，在七月、八月和九月三個月時間做三次重復采集。（2）標本處理：常規(guī)固定并形態(tài)學鑒定蚋類成熟蛹的種屬，獲得貴陽蚋類分布的本底資料；體視鏡下篩查并分離蚋類幼蟲寄生性索蟲，描述索蟲形態(tài)特征。（3）貴陽蚋類DNA條形碼參考樹的建立：依據形態(tài)學分類結果，取不同種群不同種屬的蚋類各三個提取DNA，PCR擴增特異性COI基因并測序

2、，用NJ法構建系統(tǒng)發(fā)育樹，組建貴陽蚋類DNA條形碼參考樹。（4）索蟲的分子鑒定：提取索蟲DNA，PCR擴增COI基因和18S rDNA并測序，參照GenBank和BOLD數(shù)據庫上索蟲序列，與實驗中所得序列用NJ法共同構建系統(tǒng)發(fā)育樹，從而鑒定索蟲種屬。（5）宿主蚋類的鑒定：提取宿主DNA，PCR擴增特異性COI基因并測序，用貴陽蚋類DNA條形碼參考樹鑒定宿主蚋種屬。
　　結果：貴陽蚋類分布包括蚋屬5亞屬7種，分別是維蚋亞屬、紡蚋亞屬

3、、短蚋亞屬、蚋亞屬和厭蚋亞屬。十個采集點中有青巖和大凹兩個點的蚋幼蟲檢出有索蟲的寄生，分別檢出索蟲65條和60條,其中包括112條寄生期索蟲和13條寄生后期索蟲。通過系統(tǒng)發(fā)育分析鑒定，共有兩種索蟲，一種屬于中索屬，一種屬于胃索屬，其宿主分別是五指山蚋和興義維蚋。
　　結論：經調查貴陽蚋類幼蟲體內有兩種索蟲寄生，一種是寄生于興義維蚋的胃索屬線蟲Gastromermis sp.；另一種是寄生于五指山蚋的中索屬線蟲 Mesomermis