我國(guó)大豆主產(chǎn)區(qū)黑龍江省大豆及北京市大豆制品的轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)研究.pdf

1、鑒于轉(zhuǎn)基因大豆這種潛在風(fēng)險(xiǎn)，本研究對(duì)我國(guó)大豆主產(chǎn)區(qū)黑龍江省的田間大豆籽粒和北京市場(chǎng)的大豆制品豆腐進(jìn)行了轉(zhuǎn)基因成分的PCR定性檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了分析?！　?duì)黑龍江省哈爾濱、黑河、佳木斯、雙鴨山、雞西地區(qū)的大豆田進(jìn)行五點(diǎn)取樣，共采集210份檢測(cè)樣品。首先對(duì)DNA提取做了不同探討，對(duì)GMO試劑盒提取法和改良CTAB法提取DNA以及不同部位提取DNA質(zhì)量進(jìn)行了分析比較?！　?yīng)用建立的定性PCR檢測(cè)技術(shù)體系對(duì)210份大豆樣品進(jìn)行了CaM

2、V35s啟動(dòng)子、Nos終止子、CP4-EPSPS目的基因的轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)，同時(shí)對(duì)檢測(cè)中所出現(xiàn)的不同陽(yáng)性結(jié)果做了巢式PCR、酶切鑒定和擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序的確證試驗(yàn)。研究表明：所有樣品中均沒有檢測(cè)到CaMV35S啟動(dòng)子成分；在Nos引物擴(kuò)增中，0x1樣品出現(xiàn)特異性擴(kuò)增條帶，進(jìn)一步酶切鑒定證明為陽(yáng)性結(jié)果；有13個(gè)樣品在CP4-EPSPS基因檢測(cè)中雖擴(kuò)增出類似陽(yáng)性對(duì)照的條帶，但對(duì)PCR產(chǎn)物的進(jìn)一步酶切鑒定表明，所有擴(kuò)增結(jié)果為假陽(yáng)性。利用巢式PCR對(duì)樣

3、品0x1的進(jìn)一步分析表明，0x1樣品中不含有轉(zhuǎn)基因大豆RR成分。對(duì)0x1樣品用CP4-EPSPS引物擴(kuò)增得到的片段進(jìn)行測(cè)序，序列分析表明，該片段與CP4-EPSPS基因的同源性僅為81％?！　〕闄z了北京市場(chǎng)上的雞蛋豆腐、內(nèi)酯豆腐、蔬菜豆腐、火鍋豆腐等不同類型和不同批次的50份樣品，運(yùn)用所建立的PCR定性檢測(cè)體系進(jìn)行了大豆內(nèi)參照基因Lectin、CaMV35s啟動(dòng)子和CP4-EPSPS目的基因的檢測(cè)。結(jié)果表明，所抽檢的50份各類豆腐樣品