當(dāng)歸紅芪超濾物輔助12c6重離子束治療肝癌減毒增效實(shí)驗(yàn)研究

1、分類號(hào)：分類號(hào)：R73密級(jí)：密級(jí)：公開公開研究生學(xué)位論文論文題目（中文）論文題目（中文）當(dāng)歸紅芪超濾物輔助當(dāng)歸紅芪超濾物輔助1212C66重離子束治療肝癌重離子束治療肝癌減毒增效實(shí)驗(yàn)研究減毒增效實(shí)驗(yàn)研究論文題目（外文）論文題目（外文）ExperimentalStudyonToxityReducingEfficacyEnhancingEffectofAngelicanRadixHedysariUltrafiltrationContentA

2、ssisting12C6HIBTreatmentofLiverCancer研究生姓名研究生姓名劉凱學(xué)科、專業(yè)學(xué)科、專業(yè)中西醫(yī)結(jié)合中西醫(yī)結(jié)合中西醫(yī)結(jié)合臨床中西醫(yī)結(jié)合臨床研究方向研究方向中西醫(yī)結(jié)合中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)科臨床（腫瘤內(nèi)科臨床（腫瘤防治防治）學(xué)位級(jí)別學(xué)位級(jí)別博士導(dǎo)師姓名、職稱導(dǎo)師姓名、職稱李應(yīng)東李應(yīng)東教授教授論文工作論文工作起止年月起止年月2011年9月至月至2016年12月論文提交日期論文提交日期2017年4月論文答辯日期論文答辯日期2

3、017年5月學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期校址：甘肅省蘭州市校址：甘肅省蘭州市當(dāng)歸紅芪超濾物輔助當(dāng)歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治療肝癌重離子束治療肝癌減毒增減毒增效實(shí)驗(yàn)研究效實(shí)驗(yàn)研究中文摘要中文摘要目的目的:基于實(shí)驗(yàn)研究證明當(dāng)歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治療肝癌的減毒增效作用并對(duì)其可能機(jī)制進(jìn)行探討，為當(dāng)歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治癌的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法方法：超高效液相色譜法和超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用比較當(dāng)歸紅芪超濾物與水提取物

4、組分差異；基于AnnexinVFITCPI雙染、流式細(xì)胞儀、實(shí)時(shí)定量PCR陣列分析、激光共聚焦、蛋白印跡技術(shù)觀察不同劑量的12C6重離子束輻射誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞的功效并對(duì)機(jī)制進(jìn)行研究；原代體外培養(yǎng)小鼠H22肝癌細(xì)胞，構(gòu)建H22肝癌荷瘤小鼠腹水瘤與實(shí)體瘤動(dòng)物模型；基于血液白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血小板(PLT)數(shù)量及血紅蛋白(HGB)含量檢測(cè)，脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)測(cè)定，流式細(xì)胞儀技術(shù)血液T淋巴細(xì)胞亞群分析，ELISA法血清

5、補(bǔ)體C3、IFNγ、IL4、IFNγIL4檢測(cè)，骨髓涂片骨髓象分析，肺臟、心臟、肝臟、脾臟、腎臟HE染色病理形態(tài)學(xué)觀察觀察當(dāng)歸紅芪超濾物對(duì)12C6重離子束治療H22荷瘤小鼠的減毒效應(yīng)；基于腫瘤直徑測(cè)量，小動(dòng)物成像技術(shù)檢測(cè)腫瘤面積，紅外線成像系統(tǒng)檢測(cè)H22荷瘤小鼠機(jī)體及腫瘤溫度，腫瘤指數(shù)、抑瘤率測(cè)定，HE染色腫瘤組織病理形態(tài)學(xué)觀察，電鏡下腫瘤組織微觀形態(tài)學(xué)，免疫組化法檢測(cè)腫瘤組織TP53、Bax、Bcl2、Survivin、VEGF的表達(dá)

6、觀察當(dāng)歸紅芪超濾物對(duì)12C6重離子束治療H22荷瘤小鼠的增效效應(yīng)；基于細(xì)胞凋亡檢測(cè)、細(xì)胞周期分析、MouseGenome4302.0芯片小鼠腹水細(xì)胞基因表達(dá)譜檢測(cè)技術(shù)初步篩選當(dāng)歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治療H22荷瘤小鼠減毒增效的可能分子機(jī)制。結(jié)果：結(jié)果：（1）超高效液相色譜法和超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用比較當(dāng)歸紅芪超濾物與水提取物組分差異顯示，當(dāng)歸紅芪超濾物中組分少于當(dāng)歸紅芪浸膏粉中組分，部分所具有的相同組分在超濾物中含量有一定提高

7、；（2）12C6重離子束6Gy劑量單次輻射人肝癌HepG2細(xì)胞24小時(shí)后，與0Gy劑量組比較，細(xì)胞晚期凋亡率、G2M期細(xì)胞比例明顯上升（P0.01），電子顯微鏡下顯示了細(xì)胞凋亡及線粒體腫脹的表現(xiàn)，在此過程中p53信號(hào)通路涉及DNA損傷修復(fù)、凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、血管新生等31個(gè)基因表達(dá)出現(xiàn)了明顯變化；與0Gy劑量組比較，6Gy劑量12C6重離子束輻射組細(xì)胞線粒體膜電位呈現(xiàn)崩解表現(xiàn)，細(xì)胞FAS、TP53BP2、TP53AIP1、C