18480.重金屬cr6對水花生愈傷組織和水花生植物體的毒害機(jī)制研究

1、學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實驗、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究所做的貢獻(xiàn)均己在論文中作了聲明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名：圉秀確日期：2DIJ、匹2二學(xué)位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存本學(xué)位論文的電

2、子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部內(nèi)容，可以采用影印、復(fù)印等手段保存、匯編本學(xué)位論文。學(xué)校可以向國家有關(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。(保密論文在解密后遵守此規(guī)定)保密論文注釋：本學(xué)位論文屬于保密論文，保密期限為年。學(xué)位論文作者簽名：日秀雨指導(dǎo)教師簽名：施曰斬日期：知垃、籃、2；7Et期：上p投吐三弓摘要摘要本文選用了廣泛分布的挺水植物一水花生凹lternantheraphiloxeroi

3、des)愈傷組織和水花生植物體作為實驗材料，分別以六價鉻離子作為脅迫因子，將水花生愈傷組織培養(yǎng)在人工模擬的含有這種常見重金屬的污水中，運用透射電鏡、電泳、生理生化測定等實驗手段，系統(tǒng)地研究了水花生愈傷組織和水花生植物體對重金屬鉻污染的抵抗及反應(yīng)機(jī)制。研究結(jié)果表明：(1)在本實驗中水花生愈傷組織最佳培養(yǎng)條件為：將從琵琶湖采集的水花生置于人工培養(yǎng)池中，用營養(yǎng)液預(yù)培養(yǎng)7天后，待其長出新芽，選取水花生新長出的嫩莖段，在無菌條件下，接種于含有6B

4、A和NAA(6一BA／NAA=3mgL一／02mgL叫)的1／2MS固體培養(yǎng)基上，放入可控制溫度和光照的培養(yǎng)室中，培養(yǎng)室溫度為25。C，每天光照16小時，光照強(qiáng)度為12001500lx，培養(yǎng)出水花生愈傷組織，選取生長一致的呈綠色且生長致密的愈傷組織用于重金屬毒害的實驗材料。(2)將水花生愈傷組織置于不同處理濃度Cr6(0、01、03、06、09mM)7天以后，結(jié)果表明，隨著Cr6濃度的增加：①打破了愈傷組織中各礦質(zhì)營養(yǎng)元素的平衡：Fe抖

5、、zn2的含量逐漸減少；Ca2、M92的含量逐漸增加；№2的含量變化不大；②超氧陰離子(02一)和過氧化氫(H202)含量隨著Cr6處理濃度的增大呈現(xiàn)先慢后快的增長趨勢；而MDA含量則逐漸降低；@SOD、POD和CAT的活性以均表現(xiàn)先升后降；④除01mMCr6濃度外，可溶性蛋白含量隨著Cr6濃度的升高呈逐漸下降趨勢，從SDS—PAGE蛋白電泳圖也可以看出，隨著cr6濃度的增大，蛋白質(zhì)條帶的顏色逐漸變淡，減少的蛋白質(zhì)主要集中在392、24

6、4和112KDa區(qū)段；⑤葉綠素和類胡蘿卜素的含量隨著Cr6處理濃度的增加呈現(xiàn)逐漸減少趨勢。電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，Cr6使葉綠體出現(xiàn)囊泡，被膜破損，當(dāng)Cr6濃度達(dá)到09mML時，類囊體的基粒片層損傷更加嚴(yán)重，部分膜消失；隨著Cr6濃度升高，線粒體嵴突數(shù)目減少，空泡化?？梢?，Cr6脅迫破壞了水花生愈傷組織的正常生理生化活動，對其細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)造成了不可逆的損傷。(3)測定了不同Cr6濃度(O1，O3，06，09mM)對水花生愈傷組織中腐胺(putre

7、scine，Put)、亞精胺(spermidine，Spd)、精胺(spermine，Spm)、脯氨酸(Pro)含量及精氨酸脫羧酶(ADC)、鳥氨酸脫羧酶(ODC)、多胺氧化酶(PAO)和二胺氧化酶(DAO)活性的影響。結(jié)果表明，隨著cr6處理濃度的增大：①游離態(tài)腐胺(fPut)、亞精胺(fSpd)和精胺(fSpm)的含量先升后降，且均在06mM時達(dá)到峰值；②結(jié)合態(tài)腐胺(PS—conjugatedPut)含量在01mM時達(dá)到最大值，之后