28299.一種新型的tetoff慢病毒調(diào)控系統(tǒng)的構(gòu)建及其調(diào)控作用的研究_第1頁
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1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文一種新型的Tetoff慢病毒調(diào)控系統(tǒng)的構(gòu)建及其調(diào)控作用的研究姓名：楊春燕申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：錢其軍20100301浙江理工大學(xué)碩十學(xué)位論文ANovelTetracycline—SuppressedExpressionSystemBasedonSingleLentiviralVectorABSTRACTTetracyclineregulatedeukaryoticexpressio

2、nsystemisausefultoolinareaofbiologicalresearchesTheTetracyclinesystemsarebasedonfusionsbetweentherepressor(TetR)oftheTnlOtetracyclineresistanceoperonofEscherichiacolianddomainsthatinteractwiththeeukaryotictranscriptionma

3、chineryinapositive(activators)ornegative(silencers)wayUtilizingtranscriptionalactivatortTAandrtTAcanbecalledTet。offand“l(fā)et。onrespectivelyThetetracyclineregulationsystemcontainstetracycline—responsiveelement(TRE)，andtetra

4、cyclinetranscriptionalactivator(tTA)TREandtTAcanbecombinedintovirusandplasmidvectorThetetracyclineregulationsystemhasalsobeenwidelyappliedinvariousviralandnonviralvectorsystemsincludingadenovirus，adeno—associatedvirus，re

5、trovirus，lentivirus，herpesvirusandbaculovirusTheywereshowntofunctioninculturedcellsfrommammals，plants，amphibians，andinsectsaswellasinwholeorganismsincludingyeast，Drosophila，plants，mice，andratsIn2000，Kafrietalhadbeendevel

6、opedlentiviraltet—offsystemThislentiviralregulationsystemcouldeffectivelycontroltheexpressionofthetargetgene，andfurthermoreincreasepotentialoflentiviralinclinicalapplicationItwouldbeapromisingviralvectorforgenetictherapy

7、Howeverthecurrentsystemsarecharacterizedofseparationofessentialelementsintotwoindividualvectors，resultingininconvenienceintheprocessofapplicationHere，wesuccessfullygeneratedsingle—vectortetracyclineregulatedexpressionsys

8、tempLV300(Tet。off)whichisbasedonrecombinantlentivirusAccordingtoourresultsthisnewlydevelopedsinglevector“Tetoff’lentiviralsystemcouldeffectivelytransferandmaintaingeneexpressioninvitroItwasdemonstratedthatthisnovelregula

9、tionssystemwasaninducibleeukaryoticgeneexpressionsystemwithhighefficiencylowtoxicityandtightregulationWehopethatourworkwouldadvancetheapplicationoftetracyclineregulatedsysteminfutureAlsoweestablishedahigh—efficiencyCalci

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