rolB轉(zhuǎn)基因農(nóng)墾58S形態(tài)、育性表達(dá)和內(nèi)源激素水平變化.pdf

1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文rolB轉(zhuǎn)基因農(nóng)墾58S形態(tài)、育性表達(dá)和內(nèi)源激素水平變化姓名：楊特武申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：植物生理學(xué)指導(dǎo)教師：駱炳山楊業(yè)華20031101實(shí)，但種子瘦小、無活力；另部分植株花粉育性約為R。對照株的2倍，但結(jié)實(shí)率(22％)低于凡對照株(32％)，而且種子變小，庫容受限，種子發(fā)芽率顯著降低，而凡對照株種子能正常發(fā)芽。后代植株在長日不育條件下可育性明顯升高，短日可育條件下花粉育性降低，光敏性減弱。在2002年遭受盛夏

2、低溫影響的長日照條件下自交結(jié)實(shí)率和花粉可育度，組培再生R2代植株分別為8984％，974163％；農(nóng)墾58S原始材料分別為99494％和884128％：而轉(zhuǎn)基因T2代植株則自交結(jié)實(shí)率和花粉可育度分別增至2814120％和224131％。短日條件下自交結(jié)實(shí)率和花粉可育度，組培對照分別為453士510／Ji：tl61970％；原始材料分別為589130％和6044172％，轉(zhuǎn)基因T2代植株分別為4624117％和406181％。(2)自然啟

3、動(dòng)子調(diào)控的rolB轉(zhuǎn)基因農(nóng)墾58STo代可育植株及其后代株系的育性表達(dá)也發(fā)生不同程度變化，長日條件下可育度升高，短日條件下育性與對照基本相近，光敏性減弱，但減弱程度小于CaMVBT轉(zhuǎn)化材料。如長日條件下三個(gè)T2代純臺(tái)株系平均自交結(jié)實(shí)率為173％～27O％，花粉可育度為359％～418％；短日條件下平均自交結(jié)實(shí)率為453％～575％，花粉可育度為503％～65O％。4、導(dǎo)入rolB基因能顯著改變內(nèi)源激素水平。(1)CaMVBT轉(zhuǎn)基因T2代

4、植株在不同光周期條件下葉片和幼穗內(nèi)源IAA水平極顯著升高。與原始材料比較，長日條件下的IAA水平葉片中提高109％，幼穗提高216％；短日條件下葉片升高124％，幼穗升高122％；而組培再生颶代植株則保持與原始對照相似的較低水平。同時(shí)，轉(zhuǎn)基因株葉片和幼穗iPAs和GA水平在長日條件下也有較大程度上升，但短日條件下與對照無明顯差異。不同光周期條件下轉(zhuǎn)基因植株葉片和幼穗中ABA水平與對照差異不顯著。(2)自然啟動(dòng)子調(diào)控的rolB轉(zhuǎn)基因Tl和

5、T2代植株在不同光周期下葉片中和長日條件下幼穗中IAA水平明顯高于對照植株，而短日條件下幼穗IAA水平卻與對照水平相近。長日條件下T2代植株葉片較對照提高36％，幼穗提高57％；短日條件下葉片L執(zhí)水平提高49％。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株葉片和幼穗iPAs和GA水平在長日條件下也有不同程度提高，而在短日條件下則與對照無明顯差異。ABA水平在不同光周期下與對照無明顯差異。5、通過對內(nèi)源激素水平與育性表達(dá)關(guān)系的相關(guān)性和多元回歸分析證明，農(nóng)墾58S的

6、長日不育性不取決于某單一激素的水平變化。(1)通過對因受環(huán)境低溫影響而在長日條件下不育性部分逆轉(zhuǎn)的原始材料和組培再生后代材料的自交結(jié)實(shí)率與內(nèi)源激素水平及比值相關(guān)性分析表明，農(nóng)墾58S育性轉(zhuǎn)換并非取決于某種單一激素水平的改變，而可能與多種激素的共同作用和平衡關(guān)系有關(guān)，從而說明“眾說紛紜”的單一激素作用的假說難以成立。(2)對轉(zhuǎn)基因群體長日條件下單株自交結(jié)實(shí)率與內(nèi)源激素水平及比值的相關(guān)性和多元回歸分析表明，不同遺傳背景條件下可能因胞內(nèi)不同激