牛糞堆肥過程中優(yōu)勢(shì)菌群變化及復(fù)合菌劑制備.pdf

1、隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，因畜禽糞便引起的環(huán)境污染問題日益嚴(yán)重，堆肥法作為處理養(yǎng)殖業(yè)畜禽糞便重要手段之一而備受關(guān)注。本文針對(duì)我國傳統(tǒng)堆肥中有益土著微生物較少，導(dǎo)致發(fā)酵速度慢，腐熟時(shí)間長(zhǎng)的現(xiàn)狀，采用PCR-DGGE等分子生物學(xué)技術(shù)研制微生物復(fù)合菌劑，用于加速堆肥腐熟進(jìn)程和縮短堆肥所需時(shí)間。
　　本論文選擇養(yǎng)殖業(yè)廢棄物中牛糞作為研究對(duì)象，制作微生物復(fù)合菌劑，并考察復(fù)合菌劑對(duì)牛糞堆肥腐熟度的影響，主要內(nèi)容有:
　　1.通過建立普通

2、新鮮牛糞堆肥并檢測(cè)堆肥的理化指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，溫度55℃以上共持續(xù)6d，最高溫度達(dá)到61.3℃;牛糞含水率由63.74％下降至46.65％;堆肥過程中pH值呈現(xiàn)弱堿性(8.0～9.0);堆肥過程中碳氮比(C/N)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。綜合分析溫度、含水率、pH值和C/N四項(xiàng)指標(biāo)說明建立的普通新鮮牛糞堆肥符合堆肥一般變化趨勢(shì)，此牛糞堆肥選取的堆肥樣品可以作為篩選中溫期及高溫期微生物的來源。
　　2.利用普通培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，并通過16SrDNAPC

3、R擴(kuò)增、測(cè)序確定微生物所屬種類，獲得27株微生物:假單胞菌屬（Pseudomonas）2株、芽孢桿菌屬(Bacillus)15株、纖維單胞菌屬（Cellulomonas）2株、鏈霉菌（Streptomyces）2株、高溫放線菌（Thermoactinomyces）4株、諾卡菌(Nocardia)1株、小單孢菌（Micromonospora）1株;通過PCR-DGGE技術(shù)分析堆肥中溫期和高溫期的優(yōu)勢(shì)微生物，最終選取纖維單胞菌屬(C.)2株

4、、芽孢桿菌屬(B.)8株、鏈霉菌(S.)1株、高溫單胞菌（Thermomospora）1株共12株優(yōu)勢(shì)微生物作為制備微生物復(fù)合菌劑的菌種。
　　3.以篩選獲得的12株優(yōu)勢(shì)微生物等體積混合均勻制成微生物復(fù)合菌劑并于0.73％比例加入牛糞堆肥中。結(jié)果表明，接種微生物復(fù)合菌劑的實(shí)驗(yàn)組比空白對(duì)照組能夠促進(jìn)堆肥溫度快速上升，提前1d進(jìn)入高溫期(＞55℃)且最高達(dá)到64.7℃;實(shí)驗(yàn)組在第22d其種子發(fā)芽指數(shù)(GI)達(dá)到86％，高于對(duì)照組的73