日糧不同營養(yǎng)水平對絨山羊機(jī)體代謝及腸道營養(yǎng)物質(zhì)感應(yīng)的影響.pdf

1、本試驗(yàn)通過Ussing Chamber技術(shù)、熒光定量PCR和Western blot方法分別測定腸道電生理學(xué)參數(shù)變化、腸道感應(yīng)因子mRNA相對表達(dá)量和腸道m(xù)TOR通路的變化，旨在研究適當(dāng)降低日糧蛋白水平，并增加過瘤胃葡萄糖和添加NCG對絨山羊機(jī)體代謝及腸道營養(yǎng)物質(zhì)感應(yīng)的影響。整體試驗(yàn)結(jié)果顯示，適宜降低日糧蛋白水平對機(jī)體代謝無顯著影響，但是增加適量的過瘤胃葡萄糖(20g/d)并添加NCG后對絨山羊機(jī)體代謝及腸道營養(yǎng)物質(zhì)感應(yīng)均有促進(jìn)作用，為

2、日糧中蛋白（氨基酸）和葡萄糖對機(jī)體互作效應(yīng)提供理論基礎(chǔ)，促進(jìn)碳水化合物和功能性氨基酸對日糧的調(diào)控技術(shù)研究層次從單一化向多方位快速轉(zhuǎn)換，同時也為精確配制日糧，節(jié)約日糧成本，減少對環(huán)境污染提供新思路。本試驗(yàn)由以下5個部分組成:
　　試驗(yàn)1不同蛋白水平日糧中過瘤胃淀粉量的測定、十二指腸所灌注葡萄糖量的確定及其對絨山羊機(jī)體代謝的影響
　　選用27只體況良好，體重為50.07±5.97有永久性瘤胃瘺管和十二指腸瘺管的內(nèi)蒙古白絨山羊半同

3、胞羯羊，按體重隨機(jī)分為3組:低氮組(CP:10.5％)、低氮+NCG組和高氮組(CP:13.5％)，結(jié)果表明:淀粉的攝入量隨著日糧中蛋白水平的降低而增加，且低氮組和低氮+NCG組全消化道的淀粉消化率顯著高于中氮組;并根據(jù)王玲，任瑩、韓非等測定的過瘤胃葡萄糖量來進(jìn)行計算該3種日糧的過瘤胃葡萄糖量，并確定十二指腸葡萄糖的灌注量為0、20和40g/d。進(jìn)一步研究結(jié)果:基礎(chǔ)日糧條件下，微生物蛋白合成量隨著日糧蛋白水平的降低而下降，低氮和低氮+N

4、CG組沉積氮含量顯著高于高氮組;在低氮日糧水平下增加過瘤胃葡萄糖的量有助于絨山羊氮的沉積，而灌注的量以不超過20g/d為宜;在此基礎(chǔ)上添加NCG后的日糧對絨山羊氮代謝的促進(jìn)作用更為明顯。
　　試驗(yàn)2日糧不同處理對絨山羊小腸電生理學(xué)指標(biāo)的影響
　　試驗(yàn)分組及飼養(yǎng)管理同試驗(yàn)1。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每個試驗(yàn)組隨機(jī)選取一只羊進(jìn)行屠宰。屠宰后，取近空腸中段約10cm，用溫生理鹽水沖洗干凈后，迅速將空腸分為長度約2cm的腸段，利用Ussin

5、g Chamber技術(shù)來測定各試驗(yàn)組電生理學(xué)參數(shù)的變化。結(jié)果表明:絨山羊空腸組織的短路電流和組織導(dǎo)電性隨著日糧蛋白水平降低而增加（降低日糧蛋白水平促進(jìn)小腸對葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)能力），低氮飼喂條件下，增加過瘤胃葡萄糖并添加NCG后促進(jìn)絨山羊小腸葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)能力。
　　試驗(yàn)3日糧不同處理對絨山羊小腸mTOR信號通路的影響
　　試驗(yàn)羊只在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行屠宰，分別采空腸和十二指腸樣品。通過Westernblot來測定不同日糧蛋白、葡萄糖

6、水平及加NCG對絨山羊小腸mTOR信號靶分子4E-BP1和p70S6K磷酸化的進(jìn)行測定。結(jié)果顯示，基礎(chǔ)日糧條件下，降低日糧中蛋白水平將抑制mTOR下游分子的磷酸化，而適當(dāng)?shù)奶砑覰CG和增加過瘤胃葡萄糖后能夠有所改善。
　　試驗(yàn)4日糧不同處理對絨山羊小腸SGLT1、GLUT2、SLC7A1、SLC7A9、T1R1、T1R2、T1R3 mRNA相對表達(dá)量、血液理化指標(biāo)和相關(guān)激素含量的影響
　　試驗(yàn)羊只在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時采集其血漿和

7、血清樣品，進(jìn)行血漿理化指標(biāo)和血清激素相關(guān)指標(biāo)測定，屠宰后，分別采空腸和十二指腸樣品，用于分析不同日糧蛋白、葡萄糖水平及加NCG對絨山羊小腸中葡萄糖、氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體及營養(yǎng)感應(yīng)因子mRNA相對表達(dá)量的影響。結(jié)果表明:在基礎(chǔ)日糧條件下，隨著蛋白水平的下降，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體SGLT1的mRNA表達(dá)量、血漿尿素氮和瓜氨酸含量、血糖濃度和胰島素水平、葡萄糖依賴型激素減少，而氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體SLC7A9和SLC7A1的mRNA表達(dá)量增加;增加適宜過瘤胃葡

8、萄糖后，低氮組SGLT1和T1R1、T1R2、T1R3mRNA表達(dá)量與高氮組相比呈增加趨勢;且低氮+NCG組20g/dG組最佳;
　　試驗(yàn)5不同NFC/NDF比例日糧對絨山羊小腸電生理學(xué)參數(shù)及mTOR信號通路的影響選用9只體況良好，體重為50.07±5.97有永久性瘤胃瘺管和十二指腸瘺管的內(nèi)蒙古白絨山羊半同胞羯羊，按體重隨機(jī)分為3組:A組(CP:10.59％，NFC/NDF:1.02);B組(CP:10.59％，NFC/NDF:0

9、.81)和C組(CP:10.54％，NFC/NDF:0.83，添加0.2g/d NCG)，每組3只。測定其小腸GT、Isc及mTOR下游分子4E-BP1和p70S6K的磷酸化程度，結(jié)果表明:同一氮水平條件下，增加日糧的NFC/NDF比例，對小腸電生理學(xué)參數(shù)沒有顯著影響;對絨山羊空腸和十二指腸的mTOR下游分子4E-BP1和p70S6K的磷酸化程度增強(qiáng);而NFC/NDF低比例組添加NCG后有效改善mTOR下游分子4E-BP1和p70S6K