維生素C對(duì)團(tuán)頭魴幼魚生長(zhǎng)及免疫的影響.pdf

1、以團(tuán)頭魴幼魚為研究對(duì)象，以酪蛋白和明膠為蛋白源，豆油為脂肪源配制團(tuán)頭魴幼魚基礎(chǔ)日糧，制成維生素C水平為0 mg/kg(對(duì)照組)、30 mg/kg、60 mg/kg、120 mg/kg、240 mg/kg和480 mg/kg（試驗(yàn)組）(實(shí)測(cè)值分別為0.2 mg/kg、33.4 mg/kg、65.8 mg/kg、133.7 mg/kg、251.5 mg/kg和501.5 mg/kg)的6種等氮等能的試驗(yàn)日糧。每種日糧飼料隨機(jī)投喂3組試驗(yàn)團(tuán)頭

2、魴幼魚，每天投喂3次，達(dá)飽食水平，試驗(yàn)周期為90 d。
　　 1.維生素C對(duì)團(tuán)頭魴幼魚生長(zhǎng)、血液學(xué)及肌肉理化指標(biāo)的影響隨著日糧中維生素C(Vc)水平的增加，增重率(WG)、特定生長(zhǎng)率(SGR)呈先上升而后趨于平緩的趨勢(shì)，其中251.5 mg/kg和501.5 mg/kg Vc試驗(yàn)組團(tuán)頭魴WG、SGR顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。各組間肝體比(HSI)和肥滿度(CF)無(wú)顯著性差異，僅133.7 mg/kg Vc試驗(yàn)組團(tuán)頭魴臟體比

3、(VSI)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，65.8 mg/kg-501.5 mg/kg Vc試驗(yàn)組顯著降低了血液中白細(xì)胞(WBC)數(shù)量;65.8 mg/kg Vc試驗(yàn)組顯著降低了血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力，133.7 mg/kg和501.5 mg/kg Vc試驗(yàn)組顯著降低了谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的水平;501.5 mg/kg Vc試驗(yàn)組顯著提高了團(tuán)頭魴血清中甘油三酯(TG)的水平;133.7 mg/kg Vc試驗(yàn)組顯著提高

4、了肌肉中SOD活性（P＜0.05）。日糧Vc水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚血液中紅細(xì)胞（RBC）數(shù)量、肌肉蒸煮損失(CL)以及滴水損失(DL)等均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。以魚體WG為評(píng)價(jià)指標(biāo)，經(jīng)折線模型(Broken line model)回歸分析，得到團(tuán)頭魴幼魚日糧中Vc的適宜水平為150mg/kg。
　　 2.維生素C對(duì)團(tuán)頭魴幼魚非特異性免疫以及肝臟三種HSPs mRNA表達(dá)的影響通過(guò)測(cè)定血清相關(guān)免疫指標(biāo)、肝臟抗氧化指標(biāo)、三種HSPs

5、 mRNA表達(dá)以及肝臟超微結(jié)構(gòu)等指標(biāo)，研究維生素(Vc)對(duì)團(tuán)頭魴幼魚免疫力的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，501.5 mg/kg Vc試驗(yàn)組能顯著提高血清補(bǔ)體3(C3)的濃度，133.7 mg/kgVc試驗(yàn)組能顯著提高補(bǔ)體4(C4)的濃度;65.8、133.7和251.5 mg/kg Vc試驗(yàn)組能顯著提高肝臟超氧化物歧化酶(SOD)的活性，各Vc試驗(yàn)組均能顯著提高肝臟抗超氧陰離子(ASAFR)的活性;133.7和251.7 mg/k

6、g Vc試驗(yàn)組能顯著提高肝臟HSP60基因表達(dá)水平，251.5 mg/kg Vc試驗(yàn)組能顯著提高肝臟HSP70和HSP90基因表達(dá)水平(P＜0.05)。日糧中Vc水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚血清堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、皮質(zhì)醇以及肝臟丙二醛(MDA)的水平無(wú)顯著影響（P＞0.05）。綜上所述，在本試驗(yàn)條件下，Vc作為免疫刺激劑，能有效地增強(qiáng)團(tuán)頭魴幼魚的免疫力。
　　 3.維生素C對(duì)團(tuán)頭魴幼魚抗pH應(yīng)激的影響90

7、 d養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，各槽中選取20尾魚進(jìn)行連續(xù)15d的pH應(yīng)激試驗(yàn)(pH≈9.5)，分別于1d、5d、10d和15d采樣，并分析團(tuán)頭魴幼魚血液生化指標(biāo)、肝臟抗氧化指標(biāo)以及肝臟三種HSPs mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果表明，與應(yīng)激前相比，團(tuán)頭魴幼魚在pH應(yīng)激后血清補(bǔ)體3(C3)、補(bǔ)體4(C4)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)以及肝臟超氧化物歧化酶(SOD)和抗超氧陰離子(ASAFR)的水平顯著降低;血清皮質(zhì)醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和肝臟

8、丙二醛(MDA)的水平以及肝臟三種HSPs mRNA的表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）;其中皮質(zhì)醇、SOD、ASAFR、MDA的水平以及肝臟三種HSPs mRNA的表達(dá)水平呈先升高后下降的變化趨勢(shì)。pH應(yīng)激下，與對(duì)照組相比，各維生素C(Vc)試驗(yàn)組不同程度的提高了團(tuán)頭魴幼魚血清C3、C4、ALP、TP、肝臟SOD和ASAFR的水平以及肝臟三種HSPs mRNA的表達(dá)水平;降低了血清皮質(zhì)醇、ALT和肝臟MDA的水平（P＜0.05）。綜上所

9、述，在pH應(yīng)激下，日糧中添加維生素C，可提高團(tuán)頭魴非特異性免疫力、抗氧化能力以及三種HSPs mRNA的表達(dá)水平，有效地增強(qiáng)團(tuán)頭魴幼魚抗pH應(yīng)激的能力。
　　 4.pH應(yīng)激下維生素C對(duì)團(tuán)頭魴幼魚抗嗜水氣單胞菌感染的影響pH應(yīng)激試驗(yàn)結(jié)束后，從每槽中各取6尾魚（每組18尾）進(jìn)行腹腔注射感染嗜水氣單胞菌試驗(yàn)，分別于攻毒后12h、24 h統(tǒng)計(jì)累計(jì)死亡率;并在攻毒后24 h采集樣本并檢測(cè)團(tuán)頭魴血液生化指標(biāo)、肝臟抗氧化指標(biāo)以及肝臟三種HSP

10、s mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果表明，與攻毒前相比，團(tuán)頭魴幼魚在攻毒后后紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白(HGB)、肝臟超氧化物歧化酶(SOD)和抗超氧陰離子(ASAFR)的水平顯著降低;血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、肝臟丙二醛(MDA)的水平以及HSP60、HSP70mRNA的表達(dá)水平顯著升高(P＜0.05)。攻毒后，與維生素C(Vc)最低水平組(33.4mg/kg Vc試驗(yàn)組)相比，65.8和133.7 mg/kg Vc試驗(yàn)