水稻工程核不育系創(chuàng)制途徑的探究.pdf

1、水稻是我國單產(chǎn)最高、播種面積最大的糧食作物，雜交水稻被稱為我國“第五大發(fā)明”，水稻雜種優(yōu)勢利用是構(gòu)建我國糧食安全生產(chǎn)體系的核心技術(shù)之一。“三系法”和“兩系法”是當前水稻雜種優(yōu)勢利用的主要途徑。但由于親本利用資源和制種安全性的原因，限制了這兩種途徑全面開發(fā)水稻雜種優(yōu)勢的潛力。普通核不育具有來源廣泛、無恢保關(guān)系限制、敗育徹底且育性不受環(huán)境影響、單隱性基因控制易于轉(zhuǎn)育等特點，是理想的雜種優(yōu)勢利用資源，但由于其繁殖問題而不能應用于生產(chǎn)。水稻工程

2、核不育體系的創(chuàng)制研究，擬通過基因工程手段解決普通核不育的繁殖問題，建設(shè)“第三代雜交水稻”應用體系。
　　本研究為水稻工程核不育體系創(chuàng)制途徑的前期探究工作，為水稻工程核不育體系的建立奠定基礎(chǔ)。本研究從水稻工程不育系的材料創(chuàng)制、元件創(chuàng)造和方法研究三方面展開:構(gòu)建了水稻工程不育系中間父本功能載體——將水稻胚乳特異性啟動子PGt(1)驅(qū)動加強型綠色熒光蛋白的色選表達盒與水稻隱性不育突變體tdr的育性恢復基因表達盒緊密連鎖，構(gòu)建雙元表達載體

3、GET130，并進行遺傳轉(zhuǎn)化，獲得了29株轉(zhuǎn)基因陽性植株，創(chuàng)制了新的水稻種質(zhì)資源;從頭構(gòu)建了來源煙草、擬南芥等5個物種包含11個片段的三順反正原核表達葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化載體，并通過了原核表達驗證，在大腸桿菌中獲得了綠色熒光表達，為驗證細胞核基因在質(zhì)體中表達的育性恢復情況研究以及水稻工程核不育系葉綠體途徑的探索創(chuàng)造了基礎(chǔ)元件;為降低水稻工程不育系創(chuàng)制過程中常出現(xiàn)的多基因片段載體構(gòu)建的難度，建立了新的高效快捷載體構(gòu)建方法——重組融合PCR法，此