百合單倍體培養(yǎng)及細(xì)胞學(xué)觀察.pdf

1、本文以野生種和4個(gè)雜種系共7份百合為試材,研究了基因型、培養(yǎng)基、預(yù)處理等關(guān)鍵性因素對(duì)百合雌、雄配子發(fā)育的影響。并在培養(yǎng)前期及整個(gè)過(guò)程中對(duì)細(xì)胞發(fā)育及胚胎形成進(jìn)行了較為細(xì)致的細(xì)胞學(xué)觀察,對(duì)百合雌配子離體培養(yǎng)過(guò)程中的胚胎發(fā)生及不同倍性植株的來(lái)源進(jìn)行了研究與探討。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)影響百合游離小孢子活力及發(fā)育的因素進(jìn)行了探討,結(jié)果表明:百合雄配子體在單核期維持時(shí)間較短且處于單核期的花蕾長(zhǎng)度因基因型而異。處于單核期的花藥顏色

2、均為淺黃色,花粉顏色為淡黃色,可作為采樣適宜期表型指標(biāo)；百合游離小孢子培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基為FHG培養(yǎng)基；小孢子的發(fā)育及活力與基因型及不同基因型花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂的異常率緊密相關(guān),花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂異常率低的岷江百合(Lilium regale Wils.)及亞洲百合系列品種‘Tresor’在培養(yǎng)期間小孢子能保持較高活力且活力下降速度較慢,減數(shù)分裂異常率高的OT系列品種‘Robina’則活力下降較快。
　　 2.本試驗(yàn)研究了基因型、

3、培養(yǎng)基、花蕾長(zhǎng)度、激素濃度、培養(yǎng)方式等因素對(duì)百合未授粉子房培養(yǎng)的影響,結(jié)果表明:CBM,MS和BDS三種培養(yǎng)基均可誘導(dǎo)子房產(chǎn)生胚胎,但以BDS培養(yǎng)基誘導(dǎo)效果最佳；不同基因型材料子房培養(yǎng)的效果不同,胚胎誘導(dǎo)率及成苗率也存在差異。OT系列品種胚胎誘導(dǎo)率及成苗率較高,東方百合品種胚胎誘導(dǎo)率稍低；在百合子房培養(yǎng)中胚胎誘導(dǎo)率與子房發(fā)育程度呈顯著正相關(guān),采取開(kāi)花前1-2d的花蕾進(jìn)行子房培養(yǎng)胚胎誘導(dǎo)率最高,花蕾長(zhǎng)度較小或開(kāi)花后3天對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)胚胎誘導(dǎo)

4、率均顯著低于即將開(kāi)放的花蕾；不同激素組合及濃度對(duì)百合胚胎誘導(dǎo)率影響很大,當(dāng)2,4-D,KT濃度均為2mg／L時(shí),胚胎誘導(dǎo)率最高；不同培養(yǎng)方式對(duì)百合誘導(dǎo)成苗的影響很大,子房切片培養(yǎng)成苗率較高,其他的培養(yǎng)方式(子房培養(yǎng),胚珠培養(yǎng),剝胚胎培養(yǎng))均未能誘導(dǎo)成苗。
　　 3.利用胚珠整體透明技術(shù)對(duì)子房培養(yǎng)過(guò)程中的胚胎發(fā)育狀況進(jìn)行了觀察。結(jié)果表明,大部分胚囊內(nèi)通常只含有一個(gè)胚胎,有的位于珠孔端,有的位于合子端。此外,在個(gè)別胚囊中還發(fā)現(xiàn)了有兩