NAD與氫氧化鋁-鋅復(fù)合佐劑對HBsAg免疫效果的影響.pdf

1、碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼：學(xué)號：10023S2009477NAB與氫氧化鋁／鋅復(fù)合佐劑對HBsAg免疫效杲的影響Ef億ctofNicotinamideAdenineDinucleotideCombinedwithAluminumHydroxideorZinkHydroxideinImmuneResponse所院：姓名：指導(dǎo)教師：導(dǎo)師小組：學(xué)科專業(yè)：研究方向：InducedbyHBsAg中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所王琳胡云章研究員胡凝珠主任

2、技師生物化學(xué)與分子生物學(xué)新型疫苗與疫苗佐劑完成日期：2012年4月中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文摘要乙型肝炎病毒(HeptitisBvirus，HBV)屬于嗜肝DNA病毒科，具有嚴(yán)格宿主特異性。HBV感染引起的乙型肝炎是嚴(yán)重危害人類健康的傳染病，可引起急性或慢性肝炎，并且與原發(fā)性肝細(xì)胞癌的發(fā)生密切相關(guān)。隨著新型疫苗和藥物的深入研究，乙型肝炎病毒疫苗和藥物在臨床上已有廣泛應(yīng)用，但是乙型肝炎病毒感染仍然是全球范圍內(nèi)影響人類健康的重

3、要因素。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)告目前在全球范圍內(nèi)約有4億的人群是乙型肝炎病毒的攜帶者，并且每年仍然有5千萬的人群感染HBV，因此開發(fā)新的HBV預(yù)防和治療性疫苗的開發(fā)具有重要的意義。乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)能產(chǎn)生高親和力的中和抗體并與病毒相互作用產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，達(dá)到預(yù)防HBV感染目的，因此在臨床上被廣泛應(yīng)用于預(yù)防HBV感染。雖然HBsAg被認(rèn)為是目前有效的HBV預(yù)防疫苗，但是在疫苗接種人群中仍有10％左右的接種者不能產(chǎn)生高滴度的保

4、護(hù)性抗體，從而導(dǎo)致疫苗接種失敗。DNA疫苗能誘生較強(qiáng)的特異性CD8T細(xì)胞應(yīng)答成為人們研究預(yù)防和治療性疫苗的熱點(diǎn)，但在大型哺乳動物和人類中所誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答強(qiáng)度相對較低。鑒于目前的乙肝疫苗還存在免疫原性弱的問題，尋找一種有效的免疫佐劑來增強(qiáng)HBsAg蛋白類疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答效果或改變免疫應(yīng)答類型是開發(fā)HBV疫苗的策略之一。本文主要在此背景下研究煙酰胺腺嘌呤二核苷酸一氫氧化鋅／氫氧化鋁復(fù)合佐劑對乙肝疫苗誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的影響。PonyMatzin

5、ger于1994年提出危險(xiǎn)信號模式理論，在該模式中免疫系統(tǒng)的功能是參與識別危險(xiǎn)信號分子與非危險(xiǎn)信號分子。細(xì)胞損傷釋放的危險(xiǎn)信號分子可以激活抗原呈遞細(xì)胞進(jìn)而有效的激活T／B細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答。這也就表明受損細(xì)胞釋放的危險(xiǎn)信號分子具有潛在的免疫佐劑效應(yīng)。內(nèi)源性危險(xiǎn)信號具有交叉遞呈抗原，誘導(dǎo)細(xì)胞免疫的特性，提示內(nèi)源性危險(xiǎn)信號可作為疫苗佐劑，能夠促進(jìn)疫苗誘導(dǎo)特異的細(xì)胞免疫應(yīng)答。本研究首次選用內(nèi)源性危險(xiǎn)信號一細(xì)胞外基質(zhì)降解產(chǎn)物煙酰胺腺腺嘌呤二

6、核苷酸作為復(fù)合佐劑成分之一，分別與氫氧化鋁及氫氧化鋅聯(lián)合后同HBsAg混合免疫ICR小鼠，實(shí)驗(yàn)分別設(shè)HBsAg單獨(dú)抗原對照組、氫氧化鋁佐劑對照組及氫氧化鋅佐劑組對照組。經(jīng)ELISA法和LDH法分別檢測抗HBsAgIgG抗體滴度、IFN吖分泌水平、IL一2分泌水平和CTL細(xì)胞免疫效應(yīng)，得到不同時(shí)間的抗HBsAgIgG的抗體滴度、IFN吖分泌水平、IL一2分泌水平和CTL細(xì)胞殺傷活性。本研究初步獲得內(nèi)源性危險(xiǎn)信號分子煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氫氧