山羊分娩期子宮頸PGE2合成來(lái)源及其受體分布和相關(guān)mRNA表達(dá)的研究.pdf

1、子宮頸是雌性動(dòng)物維持妊娠和啟動(dòng)分娩的重要器官，宮頸成熟不僅是一個(gè)主動(dòng)的生化過(guò)程而且是一個(gè)炎癥反應(yīng)，有許多介質(zhì)都參與了宮頸成熟，如前列腺素、孕酮、松弛素等。前列腺素E（PGE2）在哺乳動(dòng)物生殖過(guò)程中具有廣泛多樣的生理作用，PGE2的受體分為EP1、EP2、EP3和EP4四種亞型。本課題利用Western blot、免疫組化和熒光定量RT-PCR的方法進(jìn)行試驗(yàn)，探討了山羊分娩時(shí)子宮頸PGE2的合成來(lái)源、受體分布及其PTGS2、PTGER2和

2、PTGER4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
　　 盡管前列腺素E2（PGE2）被認(rèn)為是子宮頸成熟過(guò)程的重要介質(zhì)，但PGE2引起子宮頸成熟的機(jī)制及在該部位的合成來(lái)源仍不清楚，部分原因是缺乏關(guān)于子宮頸PGE2合成及其EP受體的精確細(xì)胞定位。為了重新了解子宮頸成熟機(jī)制，我們利用免疫組化和間接免疫熒光技術(shù)對(duì)發(fā)情周期、妊娠期和分娩期的山羊子宮頸EP2和EP4受體蛋白的表達(dá)以及PGE2的合成進(jìn)行定位，并通過(guò)油紅O檢測(cè)證明不同時(shí)期的子宮頸是否存在脂

3、肪細(xì)胞；同時(shí)采用SYBR Green I實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)了前列腺素E2合成酶（PTGS2）、前列腺素E2受體EP2亞型（PTGER2）、前列腺素E2受體EP4亞型（PTGER4）mRNA在山羊三個(gè)不同生理時(shí)期（分娩時(shí)、妊娠中期、空懷期）的相對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn)分娩期山羊子宮頸EP2和EP4受體廣泛分布于子宮頸管粘膜上皮、血管、環(huán)形和縱形平滑肌以及基質(zhì)上；發(fā)情期子宮頸中粘膜上皮纖毛和腺管上皮強(qiáng)烈表達(dá)EP2受體蛋白，基質(zhì)中也散在

4、表達(dá)EP2和EP4受體。分娩期子宮頸粘膜上皮細(xì)胞、肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、基質(zhì)中各種細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞均可以合成PGE2，而發(fā)情前期、后期和間情期以及妊娠期子宮頸兩種受體的表達(dá)以及PGE2合成均為陰性。山羊分娩時(shí)子宮頸組織中PTGS2、PTGER2和PTGER4 mRNA相對(duì)表達(dá)水平均明顯高于妊娠中期、空懷期，且差異極顯著（P<0.01），其中妊娠中期相對(duì)表達(dá)水平最低。分娩期山羊子宮頸中出現(xiàn)脂肪細(xì)胞，并能分泌PGE2，且熒光定量結(jié)果顯示PT