濟(jì)寧青山羊子宮內(nèi)雌激素受體(ERα、β)和孕激素受體(PR)的定位及其mRNA表達(dá)的增齡性變化.pdf

1、濟(jì)寧青山羊是中國(guó)優(yōu)質(zhì)的地方山羊品種，也是世界上優(yōu)良的種質(zhì)資源。因青山羊性成熟較早，高繁殖力，四季均可發(fā)情，遺傳性穩(wěn)定，適應(yīng)性強(qiáng)，肉質(zhì)細(xì)膩、鮮美等優(yōu)良特性而深受廣大人民的青睞。母羊初情期一般始于60日齡，90～120日齡即性成熟。為探討濟(jì)寧青山羊出生當(dāng)天至180日齡雌激素(E)和孕激素(P)含量的變化規(guī)律，雌激素受體α(ERα)、雌激素受體β(ERβ)和孕激素受體(PR)在子宮中的分布和表達(dá)規(guī)律，本試驗(yàn)用放射免疫分析法檢測(cè)濟(jì)寧青山羊出生當(dāng)

2、天至180日齡血清中雌激素和孕激素的含量;用SABC免疫組化法檢測(cè)ERα、ERβ和PR免疫陽(yáng)性細(xì)胞在不同試驗(yàn)組濟(jì)寧青山羊子宮中的分布;以GAPDH為內(nèi)參基因，qRT-PCR法對(duì)生后發(fā)育不同時(shí)期濟(jì)寧青山羊子宮中ERα、ERβ和PRmRNA表達(dá)規(guī)律進(jìn)行研究。放射免疫分析法結(jié)果顯示:濟(jì)寧青山羊出生當(dāng)天至180日齡均能檢測(cè)到E和P，血清中E含量出生時(shí)最多，30日齡顯著下降(P＜0.05)，雖在90日齡和180日齡分別出現(xiàn)兩個(gè)峰值，但60～180

3、日齡期間變化不大(P＞0.05);血清中P濃度在出生時(shí)較高，此后迅速下降，30～90日齡期間無(wú)顯著變化(P＞0.05)，120日齡驟然上升，與150無(wú)顯著變化(P＞0.05)，180日齡顯著上升(P＜0.01)。ERα、ERβ免疫組化和qRT-PCR結(jié)果顯示:ERα、ERβ陽(yáng)性染色主要見(jiàn)于子宮的腔上皮細(xì)胞、腺上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞和肌層平滑肌細(xì)胞的細(xì)胞核中，偶見(jiàn)胞質(zhì)陽(yáng)性著色;ERα、ERβ陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度在出生當(dāng)天至30日齡

4、處于低水平(P＞0.05)，60日齡(初情期)開始上升，90日齡達(dá)到高峰(P＜0.05)，150～180日齡維持在一個(gè)高水平狀態(tài)，ERαmRNA的表達(dá)量在出生當(dāng)天至30日齡處于低水平，60日齡開始上升，120日齡(性成熟)達(dá)到高峰，而后其表達(dá)量處于高水平狀態(tài)。ERβ mRNA的表達(dá)量在出生當(dāng)天至30日齡也處于低水平，60日齡開始上升，90日齡達(dá)到高峰，此后維持在一個(gè)高水平狀態(tài)。ERα和ERβ陽(yáng)性細(xì)胞光密度與其mRNA表達(dá)趨勢(shì)基本一致，但

5、ERβ低于ERα。PR免疫組化和qRT-PCR結(jié)果顯示:PR陽(yáng)性染色主要見(jiàn)于子宮的腔上皮細(xì)胞、腺上皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞和肌層細(xì)胞的細(xì)胞核中，偶見(jiàn)胞質(zhì)陽(yáng)性著色，180日齡在腺上皮細(xì)胞可見(jiàn)PR陽(yáng)性細(xì)胞大量分布;PR平均光密度出生當(dāng)天較高，而后急劇下降，在30日齡處于最低水平(P＜0.05)，60日齡(初情期)明顯升高，120日齡(性成熟)出現(xiàn)第一個(gè)高峰，150日齡略微降低(P＞0.05)，180日齡(性成熟之后)出現(xiàn)第二個(gè)高峰;PR mRNA從