三倍體枇杷實生后代及雜交后代SCoT標記及DNA甲基化分析.pdf

1、三倍體植物營養(yǎng)生長旺盛,具有明顯的雜種優(yōu)勢。由于三倍體細胞體積的增大所引起的巨大性以及由于減數(shù)分裂紊亂而造成的育性降低,從而使三倍體成為獲得無籽果實和獲取材積為目標的果樹與林木育種的主要目標,三倍體雜交或自交是獲得非整倍體材料的有效途徑。本試驗?zāi)繕似鹗济艽a子多態(tài)性分子標記(Startcondon targeted polymorphism,SCoT)和甲基化敏感擴增多態(tài)性(Methylationsensitive amplified p

2、olymorphism,MSAP)技術(shù),對天然三倍體枇杷優(yōu)系‘H324’及其實生后代、大五星(2X)與天然三倍體枇杷優(yōu)系‘G320’的雜交后代的DAN甲基化水平與模式的差異以及遺傳多樣性進行分析。為三倍體枇杷的遺傳育種工作提供理論依據(jù)。試驗主要結(jié)果如下:
　　 利用SCoT標記及形態(tài)學(xué)性狀對天然三倍體枇杷優(yōu)系‘H324’實生后代進行遺傳多樣性分析。形態(tài)學(xué)性狀的平均變異系數(shù)為32.63％(16.20％～44.80％),多樣性指數(shù)平

3、均為1.92(1.47～2.24),根據(jù)形態(tài)學(xué)性狀將12株實生后代分為3類。8條SCoT引物共擴增出71條擴增帶,其中有42條呈多態(tài)性,多態(tài)性帶比率為59.2％。12株實生后代遺傳相似系數(shù)在0.84～0.97之間,在相似性系數(shù)0.902處,13份供試材料(含母本)可分成7類。6對MSAP引物組合對‘H324’及其實生后代共擴增出5227條帶,其中甲基化位點766個,全甲基化位點544個,半甲基化位點222個,總甲基化率為14.7％?？偧?/p>

4、基化率在7.4％-19.9％,全甲基化水平在3.7％-13％,半甲基化率在1.7％-7.9％。
　　 對9份大五星(2X)與天然三倍體枇杷優(yōu)系‘G320’的雜交后代的6個主要形態(tài)性狀進行統(tǒng)計并分析,結(jié)果顯示,三倍體枇杷雜交后代主要性狀有明顯差異,表現(xiàn)出顯著的形態(tài)多樣性各性狀變異系數(shù)平均為31.94％(17.81％～40.48％),多樣性指數(shù)在平均為1.91(1.64～2.18),根據(jù)形態(tài)學(xué)性狀將9株雜交后代分為2類,8條SCoT

5、引物共產(chǎn)生68條擴增帶,平均每條引物產(chǎn)生7～14條擴增帶,其中有49條呈多態(tài)性,平均每條引物擴增出6.13條多態(tài)性帶,多態(tài)性帶比率為72.1％。根據(jù)SCoT標記數(shù)據(jù)11株枇杷(含親本)相似性系數(shù)在0.74～0.95之間,在相似性系數(shù)0.85處可將供試材料分成了4個類群。4對MSAP引物組合對雜交后代及其親本共擴增出2027條帶,其中甲基化位點344個,全甲基化位點265個,半甲基化位點79個,總甲基化率為14.7％。雜交后代的總甲基化水