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文檔簡介
1、固著類纖毛蟲可寄生在動物的鰓及體表,對魚類、甲殼類、貝類及龜鱉等動物均有一定危害。大量寄生于鰓絲上會嚴重影響呼吸作用;大量寄生于體表上會妨礙其游泳、攝食及甲殼動物的蛻殼等活動,常造成大量死亡,對幼體危害甚大,而成體后大量寄生蟲會嚴重影響商品價值。硫酸鋅對固著類纖毛蟲有殺滅作用。多年來常用主要成份為硫酸鋅的商品漁藥如纖蟲凈、纖蟲殺等來防治固著類纖毛蟲病。由于硫酸鋅在防治固著類纖毛蟲中大量頻繁使用,使用濃度從0.3mg/L逐漸上升到2.8m
2、g/L。本實驗研究的四種固著類纖毛蟲對硫酸鋅毒性的敏感性蓮蓬蟲>累枝蟲≥聚縮蟲>鐘蟲,藥浴4h內(nèi)開始死亡的濃度分別是1.94、4.04、4.04和7.75mg/L。24h內(nèi)大部分死亡的濃度分別是3.88、8.07、8.07和7.75mg/L,說明在長期的用藥過程中許多固著類纖毛蟲對硫酸鋅產(chǎn)生了耐藥性。目前生產(chǎn)中尚未開發(fā)出能替代硫酸鋅的高效、低毒、價廉的藥物,硫酸鋅仍在生產(chǎn)中大量使用。
我國許多河流、海灣等的沉積物和水中鋅的
3、濃度有逐漸上升的趨勢,正呈污染的態(tài)勢發(fā)展。工業(yè)污染是鋅污染的主要來源,全世界每年通過河流向海洋輸送鋅高達390萬噸。全世界鋅礦的開采量正逐漸增大,鋅的使用量也不斷增大,工業(yè)中鋅的污染形勢更加嚴峻。工業(yè)污染和農(nóng)業(yè)污染的雙重污染最終都匯聚到水環(huán)境中來,極易造成局部高濃度的鋅污染和廣大水域形成亞致死濃度的污染。機體對鋅的需求是有一定限度的,過量則可能影響生命活動正常進行,硫酸鋅的使用對水環(huán)境中生物的生存繁殖造成了潛在威脅。
通過
4、采用急性毒性實驗方法測得了硫酸鋅對中華絨螯蟹仔蟹(Eriocheir sinensis)、不同發(fā)育階段的克氏原鰲蝦(Procambarus clarkii)、異育銀鯽幼魚(Carassius aura tusgibel io♀×Cyprinus carpiovar. Singuonensis♂)及田螺(Cipangopaludina chinensisGray)4種常見的生活于不同水層的淡水經(jīng)濟養(yǎng)殖動物的半致死濃度(LC50)為:中華絨
5、螯蟹仔蟹24h、48h、72h、96hLC50(Zn2+)分別為18.39mg/L,11.10mg/L,7.63mg/L,5.84mg/L;克氏原鰲蝦幼蝦分別為84.48mg/L,16.50mg/L,4.78mg/L,2.60mg/L;克氏原鰲蝦小蝦分別為947.37mg/L,455.54mg/L,296.68mg/L,226.41mg/L;克氏原螯蝦成蝦分別為2769.30mg/L,1118.21mg/L,441.94mg/L,250
6、.50mg/L;異育銀鯽幼魚分別為46.51mg/L,33.43mg/L,23.86mg/L,19.58mg/L;田螺分別為89.34mg/L,56.33mg/L,38.90mg/L,34.23mg/L。鋅中毒后4種動物均表現(xiàn)煩躁不安,活力逐漸減弱,反應遲鈍,最終死亡。隨水體中鋅濃度增加,4種動物表現(xiàn)不同程度的中毒癥狀,死亡率增高;同一濃度,暴露時間越長中毒癥狀越明顯,死亡率越高。另外,相對異育銀鯽幼魚和田螺,中華絨螯蟹仔蟹、克氏原螯蝦
7、幼蝦對硫酸鋅毒性較敏感,而克氏原螯蝦小蝦和成蝦耐硫酸鋅毒性能力較高。
克氏原螯蝦是目前國內(nèi)外市場極為熱銷的淡水蝦類之一,其養(yǎng)殖規(guī)模正逐年擴大,逐漸成為研究和開發(fā)的熱點。硫酸鋅對克氏原螯蝦的慢性毒性損傷如何,是否會影響其免疫抗病能力及組織結構等問題備受養(yǎng)殖生產(chǎn)者及學者的關注。由于蝦蟹等甲殼動物不具有特異性免疫功能,依靠非特異性免疫來抵抗外來病原的侵襲,采用測定其非特異性免疫相關酶活性的方法來評價亞致死濃度的硫酸鋅藥浴對機體免
8、疫力的影響。將克氏原螯蝦于Zn2+濃度為0.40mg/L、4.04mg/L及40.37mg/L的硫酸鋅溶液中藥浴21d,分別測定肝胰腺和鰓中4種以及血清中6種非特異性免疫因子活性,從免疫學角度探討了硫酸鋅對克氏原螯蝦的毒性影響。結果顯示:21d內(nèi)各濃度對血清凝集素均無顯著影響。血清溶血素各濃度組均表現(xiàn)出活性先逐漸升高再下降的趨勢。酚氧化酶(PO)、過氧化氫酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)及溶菌酶(LSZ)在0.40mg/L濃度下各組織
9、中活性均變化不顯著,而4.04mg/L以上濃度組除肝胰腺中PO活性變化均不顯著外其它酶的活性均發(fā)生了顯著變化,且變化規(guī)律存在一定組織差異。4.04mg/L以上濃度組,PO在鰓和血清中的活性隨藥浴時間加長呈增大的趨勢;CAT在肝胰腺中的活性先上升再下降再上升,鰓中始終低于對照組而血清中呈前期抑制后期升高的趨勢;ACP在肝胰腺和鰓中主要呈抑制狀態(tài),血清中4.04mg/L組先升高再下降而40.37mg/L組均低于對照組;LSZ在肝胰腺中主要呈
10、前期抑制后期升高的趨勢,鰓中先升高后下降而血清中活性均高于對照組。以上結果表明Zn2+濃度高于4.04mg/L的硫酸鋅溶液長時間藥浴對克氏原螯蝦健康構成了脅迫,可能削弱其免疫力而增大被病原感染的幾率。
組織病理學研究表明,克氏原螯蝦成蝦在Zn2+濃度為0.40mg/L、4.04mg/L及40.37mg/L的硫酸鋅溶液中藥浴21d后各組織出現(xiàn)了不同程度的病理變化。肝胰腺、觸角腺細胞及腸道內(nèi)含物中出現(xiàn)染成棕褐色的顆粒物,肝細胞
11、中顆粒的數(shù)量與硫酸鋅濃度成正相關。顆粒隨壞死肝細胞的脫落釋放到肝小管中,腸道內(nèi)含物中出現(xiàn)相同的顆粒物,說明鋅可經(jīng)肝胰腺解毒后以顆粒的形式經(jīng)細胞脫落排入腸道釋放到體外。40.37mg/L組藥浴21d時肝胰腺出現(xiàn)肉眼可見的棕褐色顆粒狀斑點,是肝細胞大量壞死脫落形成,結締組織大量增生使肝胰腺固縮、硬化,影響正常的肝功能。觸角腺端囊、迷路和腎管處細胞出現(xiàn)壞死,使離子平衡、滲透壓調(diào)節(jié)及一些代謝廢物的排泄受到影響。鰓膜與呼吸上皮分離,呼吸上皮細胞壞
12、死,脫落入微血管腔,40.37mg/L組鰓絲萎縮。鰓的損傷嚴重影響氣體交換而造成缺氧,危害機體健康。精巢和卵巢組織中均有血細胞浸潤,精巢中細胞大面積壞死,卵細胞也出現(xiàn)變性、萎縮、壞死。4.04mg/L以上濃度組長期藥浴將嚴重損害生殖系統(tǒng),影響后代繁育。以上結果說明Zn2+濃度為4.04mg/L以上的硫酸鋅溶液長期藥浴對克氏原螯蝦毒性較大,嚴重威脅克氏原螯蝦的生存繁殖,因此水環(huán)境中鋅的安全濃度應低于4.04mg/L。
克氏原
13、螯蝦對鋅有一定的富集作用。將其于Zn2+濃度為0.40mg/L、4.04mg/L及40.37mg/L的硫酸鋅溶液中藥浴21d,各濃度組的鰓、肝胰腺、甲殼和肌肉中Zn2+濃度呈上升趨勢。鰓、肝胰腺和甲殼有較強的鋅富集能力,是克氏原螯蝦主要的鋅富集部位,在各鋅溶液中富集系數(shù)(BCF)分別為407.78,79.46,40.80:656.90,143.58,41.39;2691.54,328.46,52.03。觸角腺、性腺、消化道和血淋巴對鋅的
14、富集效應不明顯。觸角腺和性腺在藥浴前期Zn2+濃度不斷增大,隨后迅速下降,并始終低于對照組。消化道在藥浴過程中各濃度組均出現(xiàn)兩次Zn2+濃度峰。血淋巴中0.40和4.04mg/L組分別在第3和1d時出現(xiàn)Zn2+濃度峰,而40.37mg/L組在第2h、3d和14d出現(xiàn)三次Zn2+濃度峰,硫酸鋅濃度越大血藥濃度波動越大。
將藥浴后的蝦放入不添加鋅的清水中飼養(yǎng)63d,發(fā)現(xiàn)體內(nèi)富集的鋅有一定的釋放效應。在清水中飼養(yǎng)3d內(nèi)鰓中Zn2
15、+濃度迅速下降,并始終維持在較低濃度,說明鰓中的鋅很容易被釋放。肝胰腺、甲殼和消化道中Zn2+濃度逐漸下降,一段時間后又逐漸上升,濃度甚至高于富集實驗時的最大值。肌肉和血淋巴中Zn2+濃度在清水中飼養(yǎng)約3d后隨時間的加長逐漸降低。卵巢中Zn2+濃度變化不大,而精巢中隨飼養(yǎng)時間的加長有逐漸增大的趨勢。蝦體內(nèi)富集的鋅有向肝胰腺、甲殼、消化道和精巢轉移的趨勢。清水中飼養(yǎng)63d時,各組織中鋅濃度逐漸恢復到接近對照組的水平。以上結果說明克氏原螯蝦
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