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文檔簡介
1、尼莫克?。∟emadectin)是由藍(lán)灰鏈霉菌(Streptomycescyaneogriseussp.Noncyanogenus)產(chǎn)生的十六元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,和阿維菌素與米爾貝霉素一樣,表現(xiàn)出很好的抗寄生蟲活性。作為抗寄生蟲抗生素,尼莫克汀具有殺蟲譜廣,易降解,低殘留,無抗藥性,對人畜無害,環(huán)境污染少等優(yōu)點,并且還可由尼莫克汀合成活性更強的莫西克汀(Moxidectin)。本研究不但豐富了尼莫克汀及米爾貝霉素類化合物的結(jié)構(gòu)多樣性,而
2、且還為今后研究其構(gòu)效關(guān)系、優(yōu)化其分子結(jié)構(gòu),開發(fā)更加高效低毒、低殘留的大環(huán)內(nèi)酯類農(nóng)用抗生素提供了必要基礎(chǔ)。
我們實驗室在篩選新的抗寄生蟲抗生素的過程中,獲得了一株新的尼莫克汀產(chǎn)生菌(Streptomycesmicroflavusneau3),進(jìn)一步通過HPLC分析它的次級代謝產(chǎn)物并與其它尼莫克汀產(chǎn)生菌的次級代謝產(chǎn)物相比,發(fā)現(xiàn)該菌株的液相譜圖中呈現(xiàn)出更多的尼莫克汀類化合物的特征吸收峰。因此,為了發(fā)現(xiàn)更多與更好的抗寄生蟲抗生素,
3、我們在本文中對該菌的次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行了詳細(xì)的研究。
1)對該尼莫克汀產(chǎn)生菌株進(jìn)行發(fā)酵,發(fā)酵培養(yǎng)基配方為(g/L):葡萄糖10,乳糖25,棉籽餅粉25,CaCO30.3,pn7.0,用蒸餾水配制,于121℃下滅菌20min。采用液體搖瓶發(fā)酵,按8%(V/V)接種量接入到1L發(fā)酵搖瓶中,發(fā)酵搖瓶為裝液量100ml/1L三角燒瓶。置于250rpm旋轉(zhuǎn)式搖床,28℃發(fā)酵培養(yǎng)7-8d。
2)將所得發(fā)酵培養(yǎng)液進(jìn)行合并,經(jīng)
4、濾布過濾得菌絲體濾餅,濾餅經(jīng)水洗后再用甲醇浸泡過夜。浸提液在45℃減壓條件下濃縮至適當(dāng)體積,再用等體積乙酸乙酯萃取三次,萃取液在減壓條件下濃縮得到浸膏??偨嘟?jīng)硅膠柱色譜層析、SephadexLH.20凝膠柱色譜層析及半制備反向高效液相色譜層析等分離、純化得到12個次級代謝產(chǎn)物。
3)將所得化合物經(jīng)過1H-NMR,13C-NMR,紅外,紫外,質(zhì)譜,1H-1HCOSY,HMQC,HMBC等波譜分析方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,結(jié)果有2個
5、化合物是新化合物,分別為:
8-demethyi-25-(1,3-dimethyl-1-butenyl)-23-hydroxyMilbemycinβ3(1)和Seco-nemadectin(2)
其余10個為已知化合物,分別為:Nemadectin(3),Doramectin(4),AvermectinB1a(5),AvermectinB1b(6),LL-F28249v(7),23-DesoxyFactorA
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