固始雞胚期視網(wǎng)膜發(fā)育及Notch1在視網(wǎng)膜發(fā)育中的表達(dá)變化規(guī)律研究.pdf

1、雞是研究鳥(niǎo)類動(dòng)物發(fā)育常用的模式動(dòng)物。視網(wǎng)膜由胚胎時(shí)期間腦外壁向外突起形成,屬于腦外中樞系統(tǒng),常作為研究中樞神經(jīng)發(fā)育和再生的模式器官。脊椎動(dòng)物視網(wǎng)膜基本組織模式相同:兩個(gè)突觸層(外網(wǎng)層和內(nèi)網(wǎng)層)插在三細(xì)胞核層之間(外核層、內(nèi)核層和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層)。視網(wǎng)膜的形態(tài)發(fā)育過(guò)程包括神經(jīng)祖代細(xì)胞分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)程,以及神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞按照一定的空間結(jié)構(gòu)構(gòu)建視網(wǎng)膜過(guò)程。Notch-Delta信號(hào)途徑是一條在胚胎發(fā)育中起調(diào)控作用的保守的途徑

2、。Notch-Delta信號(hào)系統(tǒng)的最主要功能就是參與胚胎的分化發(fā)育,Notch1在神經(jīng)視網(wǎng)膜細(xì)胞發(fā)育和分化過(guò)程中表達(dá)。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用常規(guī)組織學(xué)HE染色技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)和分子半定量技術(shù)對(duì)固始雞胚期視網(wǎng)膜的發(fā)育進(jìn)行研究,研究結(jié)果顯示:同始雞視網(wǎng)膜是典型的脊椎動(dòng)物視網(wǎng)膜,可分為色素視網(wǎng)膜和神經(jīng)視網(wǎng)膜,神經(jīng)視網(wǎng)膜又分為7層:神經(jīng)纖維層、節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層、內(nèi)核層、外網(wǎng)層、外核層和視錐視桿層；神經(jīng)視網(wǎng)膜在胚期發(fā)育過(guò)程中的變化趨勢(shì)是

3、:神經(jīng)視網(wǎng)膜厚度從E4至E20呈現(xiàn)波浪形變化趨勢(shì),E4至E8逐漸增厚,E8最厚,從E8開(kāi)始厚度逐漸變薄,E10與E11厚度相差較大,E14厚度最薄,到E19出現(xiàn)第二個(gè)高峰,E11到E20神經(jīng)視網(wǎng)膜厚度相差不大。節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層、內(nèi)核層、外網(wǎng)層、外核層于E8時(shí)形成,三核層總的變化趨勢(shì)是從E8開(kāi)始厚度逐漸下降,E10和E11相差較大,從E12到出殼當(dāng)天,厚度總體變化相對(duì)穩(wěn)定；三核層的密度總的趨勢(shì)變化相同,密度相比內(nèi)核層最高,其次是外核層,節(jié)

4、細(xì)胞層密度最低。免疫組化S-P法染色結(jié)果顯示:NSE最早在E12的節(jié)細(xì)胞層出現(xiàn),內(nèi)網(wǎng)層和外網(wǎng)層有亞層形成,Vimentin從E3開(kāi)始整個(gè)胚期都存在,且從E10開(kāi)始,外網(wǎng)層出現(xiàn)一條陽(yáng)性條帶形成因?yàn)橛写M(jìn)一步研究。半定量研究表明在眼部E3和E18表達(dá)量相對(duì)較低,推斷E18可能作為理想的時(shí)間點(diǎn)研究同始雞視網(wǎng)膜再生。研究還發(fā)現(xiàn)腦部在出殼前兩天Notch1表達(dá)量較低與E3相對(duì)接近,說(shuō)明腦部細(xì)胞處于祖細(xì)胞狀態(tài)或干細(xì)胞較多,增殖旺盛,Notch1在腦