油菜脂肪酸延伸酶基因表達抑制降低芥酸含量研究.pdf

1、油菜(Brassica napus L.)是我國最重要的油料作物。采用常規(guī)育種方法我國已育成一大批雙低油菜新品種在生產(chǎn)上推廣應用,基本實現(xiàn)了油菜生產(chǎn)的雙低化,但在雙低油菜生產(chǎn)中,因高芥酸花粉串粉等因為引起的芥酸含量回升影響了商品油菜籽的品質(zhì)。在解決這一實際問題的過程中,轉基因技術能夠發(fā)揮獨特的作用。因此,基因工程培育低芥酸油菜新品種依然具有重要意義和應用前景。
　　 本實驗室育成的甘藍型油菜新品系超油2號含油量高,硫甙含量較低,

2、豐產(chǎn)性較佳,綜合性狀優(yōu)良,但芥酸含量較高(44％左右),使其作為食用油菜新品種開發(fā)利用受到了制約。本研究以該品系作為起始材料,用芥酸生物合成關鍵酶脂肪酸延伸酶基因FAE1的RNA干涉表達載體和反義表達載體轉化其下胚軸,獲得轉化植株,并對轉化植株進行多種方法的分子鑒定、遺傳分析、品質(zhì)測定和農(nóng)藝性狀考察。主要研究結果如下:
　　 1.通過農(nóng)桿菌介導法轉化獲得并移栽成活104株T0轉化植株,其中轉干涉表達載體的76株,轉反義表達載體的

3、28株。
　　 2.采用除草劑Basta噴施、PCR檢測、Southern雜交、RT-PCR分析和插入位點邊界序列分析等方法確認獲得86株獨立轉化植株(干涉65株,反義21株),并證明目標基因已遺傳到T1代而且得到了表達。
　　 3.部分T1代轉化株系的遺傳分析表明,目標基因大多為單位點和雙位點插入,但也有一些株系屬于多位點整合。
　　 4.品質(zhì)分析表明,FAE1基因干涉表達的T0轉化植株和T1代轉化株系的芥酸含

4、量大幅度下降,最低的單株已降到1％左右,不同T0植株和T1株系之間芥酸含量差異很大。該結果說明,FAE1基因的干涉表達有效抑制了芥酸的生物合成。含油量測定結果顯示,一部分T0植株和T1株系的含油量較未轉化對照有不同程度的降低,而另外一部分植株和株系的含油量與對照相仿。業(yè)已篩選出含油量51.7％、芥酸含量1.0％的轉化植株。
　　 5.在部分FAE1,基因干涉表達的T1代轉化株系中,每角粒數(shù)和一次分枝位發(fā)生了顯著或極顯著變化,而株