土霉素高效降解菌降解特性比較及土壤環(huán)境模擬試驗.pdf

1、本文建立了無機鹽培養(yǎng)基和土壤中土霉素含量檢測的HPLC方法，樣品采用Mcllvaine緩沖液為土霉素提取劑，以乙腈：KH2PO4溶液(0.05mol/L)(18：82，V/V)為流動相、pH值3.0，在波長355nm，柱溫30℃，流速1.0mL/min的條件下進(jìn)行HPLC分析。土霉素在培養(yǎng)基和土壤中的平均回收率分別高于85％和80％，日內(nèi)、日間變異系數(shù)低于10％，LOD和LOQ分別為0.01mg/L和0.1mg/L。
　　 以相

2、對貧乏的培養(yǎng)基作為限制性條件構(gòu)建細(xì)菌篩選模型，經(jīng)初步篩選、分離純化、細(xì)菌馴化等方法最終篩選出兩株土霉素高效降解菌，結(jié)合革蘭氏染色鏡檢和分子生物學(xué)16S rDNA鑒定，確定細(xì)菌為粘質(zhì)沙雷氏菌和陰溝腸道桿菌。
　　 將粘質(zhì)沙雷氏菌、陰溝腸道桿菌和蠟樣芽孢桿菌在同一條件下比較研究(試驗中分別命名為1號菌、2號菌和3號菌)，從pH值、溫度、通氣量、底物濃度、細(xì)菌接種量、外加碳(氮)源、金屬離子等方面比較研究了細(xì)菌對土霉素降解作用及這些因

3、素對細(xì)菌生長量的影響，最終確定各種細(xì)菌最佳降解條件：1號菌在pH值為8、35℃、通氣量100mL、細(xì)菌接種濃度0.1％、底物濃度150mg/L、添加0.2％淀粉、1％酵母、Fe3+和Zn2+的條件下土霉素降解速率最高；2號菌在pH值為9、30℃、通氣量60mL、細(xì)菌接種濃度5％、底物濃度100mg/L、添加0.2％淀粉、1％牛肉膏、Fe3+和Zn2+的條件下土霉素降解速率最高；3號菌在pH值為7、35℃、通氣量80mL、細(xì)菌接種濃度0.

4、1％、底物濃度50mg/L、添加0.2％淀粉、0.5％酵母、Fe3+和Zn2+的條件下土霉素降解速率最高。
　　 將三種細(xì)菌在試驗室進(jìn)行土壤環(huán)境模擬試驗，試驗分滅菌土壤組和非滅菌土壤組，并選擇10mg/kg、25mg/g和50mg/kg三個濃度進(jìn)行試驗，在智能光照培養(yǎng)箱中25℃、光照強度6500勒克斯、光暗比12h：12h連續(xù)培養(yǎng)60d，最終確定了最佳降解時間為20d-40d。
　　 此外，本試驗還初步研究了三種細(xì)菌對四