油菜黑斑病病原學(xué)及防治技術(shù)研究.pdf

1、油菜是我國(guó)重要的油料作物，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。近幾年，在湖北省油菜產(chǎn)區(qū)荊門(mén)市、孝感市、黃岡市、武穴市和仙桃市發(fā)生了較為嚴(yán)重的油菜黑斑病，直接影響了當(dāng)?shù)剞r(nóng)民的經(jīng)濟(jì)效益。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法將湖北省油菜黑斑病病原菌鑒定為Alternariabrassicicola。在此基礎(chǔ)上，研究了不同地理來(lái)源的菌株致病力差異以及不同致病力菌株的生物學(xué)特性，篩選抗病品種并探討了該病的藥劑防治技術(shù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 從湖北省荊門(mén)市

2、、孝感市、黃岡市、武穴市和仙桃市油菜種植地采集油菜黑斑病典型的病樣標(biāo)本，通過(guò)常規(guī)組織分離法得到A和B兩種鏈格孢屬真菌(Alternariasp.)，它們的分離頻率分別為7.35％和92.65％。用兩種類(lèi)型菌株的菌絲塊和分生孢子液接種新鮮健康的油菜葉片和莢果。結(jié)果表明，A種類(lèi)型菌株的菌絲塊和分生孢子液接種2d后，即出現(xiàn)黑色壞死斑點(diǎn)；B種類(lèi)型的菌株不致病。發(fā)病組織上再次分離得到的病原菌與接種的病原菌形態(tài)一致，表明A種類(lèi)型菌株是湖北省油菜黑斑

3、病病原菌。形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明，病原菌在PDA培養(yǎng)基上菌落初為白色，3d后菌落變成黑色煤煙狀，質(zhì)地緊密。用濾紙+PCA培養(yǎng)基誘導(dǎo)產(chǎn)孢，培養(yǎng)5天的孢子鏈鏈長(zhǎng)常超過(guò)10個(gè)分生孢子，在單根分生孢子梗上形成小樹(shù)狀分枝的分生孢子鏈。在PCA培養(yǎng)基上25℃黑暗條件下培養(yǎng)7天后，成熟分生孢子褐色，卵形，近橢圓形或倒棒狀，具有1～5個(gè)橫膈膜和0～2個(gè)縱、斜隔膜，分隔處明顯隘縮；孢身長(zhǎng)22.06～62.05×13.79～20.63μm。喙一般不發(fā)達(dá)，多為單

4、細(xì)胞假喙，淡褐色。根據(jù)Simmons和張?zhí)煊蠲枋龅逆湼矜叻N的形態(tài)特征，將該病菌鑒定為Alternariabrassicicola。該病原菌的rDNA-ITS序列與A.brassicicola的同源性達(dá)到100％。根據(jù)形態(tài)學(xué)和rDNA-ITS序列分析結(jié)果，確定該病原菌為A.brassicicola。
　　 從湖北省油菜產(chǎn)區(qū)采集的油菜黑斑病病樣進(jìn)行組織分離共得到23個(gè)致病性菌株。對(duì)來(lái)自不同地理來(lái)源的23個(gè)菌株進(jìn)行致病性測(cè)定，發(fā)現(xiàn)23

5、個(gè)菌株存在致病性差異。仙桃市采集的菌株致病性最強(qiáng)，來(lái)自黃岡市采集的菌株致病性最弱。選擇XT-1、WX-1和HG-5三個(gè)致病性有差異的菌株的生物學(xué)特性研究結(jié)果表明：菌絲在5-35℃的條件下均可生長(zhǎng)，25℃是最適宜的溫度。菌絲在pH4.0-11.0范圍內(nèi)的PDB中均可生長(zhǎng)，最適pH值為pH6.0-7.0。在Czapek液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，病菌可以利用多種碳源和氮源，在無(wú)碳或無(wú)氮條件下均可生長(zhǎng)；葡萄糖和蛋白胨是該病菌最適的碳源和氮源。菌絲體和分

6、生孢子的致死溫度分別為55℃，10min和60℃，10min。
　　 在油菜品種進(jìn)行抗病性評(píng)價(jià)中，離體葉片接種結(jié)果表明：用致病力強(qiáng)的XT-1菌株的分生孢子液接種，8份表現(xiàn)為抗病，32份表現(xiàn)為中抗，28份表現(xiàn)為感??；用致病力中等的WX-1菌株的分生孢子液接種，23份表現(xiàn)為抗病，36份表現(xiàn)為中抗，9份表現(xiàn)為感?。挥弥虏×θ醯腍G-5的分生孢子液接種，53份表現(xiàn)為抗病，15份表現(xiàn)為中抗。大田莢果接種結(jié)果表明：用致病力強(qiáng)的XT-1菌株的

7、分生孢子液接種，7份表現(xiàn)為抗病，35份表現(xiàn)為中抗，26份表現(xiàn)為感??；用致病力中等的WX-1菌株的分生孢子液接種29份表現(xiàn)為抗病，32份表現(xiàn)為中抗，7份表現(xiàn)為感??；用致病力弱的HG-5的分生孢子液接種，57份表現(xiàn)為抗病，11份表現(xiàn)為中抗。68份油菜材料中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)對(duì)油菜黑斑病免疫和高抗的品種。
　　 室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)結(jié)果表明，苯甲丙環(huán)唑等11種供試藥劑在設(shè)置的不同濃度下對(duì)菌株XT-1的菌絲生長(zhǎng)均表現(xiàn)一定的抑制作用，其中30％苯甲丙環(huán)

8、唑和10％的苯醚甲環(huán)唑的抑菌效果最好，EC50分別為0.10813μg/ml,0.64863μg/ml,其次是16％松脂酸銅、30％惡霉靈水劑和5％井岡霉素A可溶性粉劑，最差的是75％百菌清可濕性粉劑，EC50為268.46050μg/ml。2009年盆栽藥劑防病試驗(yàn)結(jié)果表明：30％苯甲丙環(huán)唑和10％的苯醚甲環(huán)唑的防病效果最好，對(duì)葉片黑斑病的防效分別為73.08％和69.23％,5％井岡霉素A可溶性粉劑的防病效果最差，防效為38.46％