異三聚體G蛋白在生長(zhǎng)素介導(dǎo)的擬南芥?zhèn)雀l(fā)育中的作用機(jī)理研究.pdf

1、揚(yáng)州大學(xué)博士學(xué)位論文異三聚體G蛋白在生長(zhǎng)素介導(dǎo)的擬南芥?zhèn)雀l(fā)育中的作用機(jī)理研究姓名：吳曉霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：作物遺傳育種學(xué)指導(dǎo)教師：梁建生20080601II揚(yáng)州大學(xué)博士學(xué)位論文結(jié)果表明，GPAl主要定位在根尖頂端及中柱部位，而AGBl在整個(gè)根部均有分布。G朋J『過(guò)表達(dá)植株的側(cè)根發(fā)生數(shù)目較野生型顯著增加，彳G艿過(guò)表達(dá)植株的側(cè)根發(fā)生數(shù)與野生型相比無(wú)顯著性差異。結(jié)合G蛋白突變體根系發(fā)育特征，根據(jù)G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)模式，推測(cè)AGBl在側(cè)根發(fā)

2、育過(guò)程中具有負(fù)調(diào)節(jié)作用。對(duì)種子萌發(fā)4d內(nèi)過(guò)表達(dá)株系及野生型的側(cè)根發(fā)育時(shí)期分布規(guī)律分析表明，在萌發(fā)第4d時(shí)么GBJ過(guò)表達(dá)幼苗的側(cè)根原基主要分布于第34期，G以J過(guò)表達(dá)幼苗的側(cè)根原基總數(shù)高于Col野生型，其增加的側(cè)根原基主要集中在第35期，說(shuō)明G以J『過(guò)表達(dá)有利于促進(jìn)側(cè)根原基的早期形成及分裂過(guò)程。6不同基因型懸浮培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)2，4D和NAA的響應(yīng)存在顯著的差異。用2pM2，4一D／NAA處理懸浮培養(yǎng)細(xì)胞系，昭6J『。2和G以』過(guò)表達(dá)懸浮細(xì)胞對(duì)

3、2，4D促進(jìn)的細(xì)胞分裂不敏感，對(duì)NAA誘導(dǎo)的細(xì)胞伸長(zhǎng)過(guò)程超敏感。ImPCR結(jié)果表明，在無(wú)外源生長(zhǎng)素處理?xiàng)l件下，昭6J2懸浮細(xì)胞中細(xì)胞分裂周期素基因爿fCKD4jJ的表達(dá)量相對(duì)較高。NAA處理促進(jìn)了口96J2和G剛J過(guò)表達(dá)懸浮細(xì)胞中與細(xì)胞伸長(zhǎng)相關(guān)的么召尸J的表達(dá)。根據(jù)2，4D和NAA進(jìn)出細(xì)胞機(jī)制的不同，可以推測(cè)么GB『突變體及G以J過(guò)表達(dá)細(xì)胞系具有較強(qiáng)的生長(zhǎng)素極性輸出能力。7對(duì)不同基因型的根系向重性反應(yīng)研究表明：突變體昭6J『2和過(guò)表達(dá)G

4、剛J植株對(duì)向重性刺激的反應(yīng)顯著強(qiáng)于Col和即口J3，而過(guò)表達(dá)AGBl植株的向重性反應(yīng)顯著低于Col。8RealtimePCR研究結(jié)果表明，口96J2及G以』過(guò)表達(dá)植株根部生長(zhǎng)素極性輸出載體P刪的表達(dá)量顯著增加。根據(jù)以上研究結(jié)果，認(rèn)為G蛋白突變體的側(cè)根發(fā)生差異是由于影響了根部生長(zhǎng)素的向基運(yùn)輸途徑，彳GB』對(duì)這一過(guò)程具有負(fù)調(diào)節(jié)作用。彳GBJ突變促進(jìn)了根系中生長(zhǎng)素極性輸出載體PINl轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)，從而負(fù)調(diào)節(jié)根系中生長(zhǎng)素的向基極性輸出途徑，促