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文檔簡(jiǎn)介
1、花生是最易受黃曲霉侵染的農(nóng)作物之一,我國(guó)也是世界上受到黃曲霉毒素污染嚴(yán)重的國(guó)家之一。加強(qiáng)黃曲霉資源的遺傳評(píng)價(jià),發(fā)掘優(yōu)良抗黃曲霉種質(zhì),建立先進(jìn)篩選技術(shù)十分必要。本研究針對(duì)有關(guān)花生遺傳多樣性的研究主要集中于農(nóng)藝性狀方面,而花生基因組DNA水平上的遺傳多樣性尚未深入研究的現(xiàn)狀,選取了40抗感黃曲霉花生種質(zhì)資源,采用SSR分子標(biāo)記技術(shù),從DNA水平上研究花生抗感黃曲霉資源的遺傳多樣性,揭示種質(zhì)資源的遺傳變異和親緣關(guān)系。研究結(jié)果表明:
2、 1.篩選適合SSR分子標(biāo)記技術(shù)的基因組DNA提取方法,利用改良CTAB法提取的基因組DNA在質(zhì)量上能夠完全滿(mǎn)足SSR分子標(biāo)記的需要,同時(shí)通過(guò)異丙醇和70%乙醇溶液的預(yù)冷,可大大提高抽提的效率并且提高DNA質(zhì)量。這種提取方法適合大量快速的提取植物基因組DNA。
2.花生抗感品種中存在著豐富的多態(tài)性,本本次試驗(yàn)共得到多態(tài)性引物35對(duì),共擴(kuò)增229條帶,其中多態(tài)性條帶數(shù)為169,占總條帶數(shù)的73.8%,每個(gè)位點(diǎn)的等位基因?yàn)?
3、-12個(gè),平均5.51個(gè)。其中PM15所得條帶數(shù)最多,為15條;最少的是PM375,只有3條。
3.35對(duì)引物的PIC值在0.305-0.843之間變動(dòng),在35個(gè)位點(diǎn)中只有少數(shù)的幾對(duì)引物(PM188、pPGPseq-4H11、Ah3、RM14E11、gc25、gc53、GNB837、GNB613)小于0.5,說(shuō)明所選標(biāo)記具有很高的多態(tài)性能夠在分子水平上準(zhǔn)確反映各品種或類(lèi)型間的遺傳關(guān)系。
4.35對(duì)引物基本可以
4、將40份材料分開(kāi),采用NTSYSpc2.1的UPGMA法對(duì)SSR結(jié)果進(jìn)行SHAN聚類(lèi)分析,后通過(guò)Tree Plot聚類(lèi)分析樹(shù)狀圖表明,當(dāng)閾值為0.56時(shí)可以將所有材料分為兩大類(lèi),證明在兩大群花生中都有抗黃曲霉材料的存在,在相關(guān)系數(shù)為0.71時(shí),分為五個(gè)小組,從上到下抗病品種AR-1,AR-2,KB153,KB154,XW84,XW85,XW87,KB113,KB157,UF71533-1,XW83,XW101,XW88,AR-3,GFA
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