內(nèi)蒙古絨山羊不同月份皮膚蛋白質(zhì)組分析.pdf

1、絨山羊以其獨(dú)特的絨毛產(chǎn)品成為重要的經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，在動(dòng)物生產(chǎn)中享有重要的地位。當(dāng)絨毛快速生長(zhǎng)時(shí)，毛囊細(xì)胞分裂的速度很快，合成蛋白質(zhì)效率非常高，絨山羊的毛囊一年中要合成大量的絨毛結(jié)構(gòu)蛋白，且毛囊呈現(xiàn)明顯的年周期性變化。
　　本研究從蛋白質(zhì)組的水平，對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊不同時(shí)期皮膚蛋白質(zhì)差異表達(dá)進(jìn)行了探討。為獲得與毛囊周期相關(guān)或影響到毛囊發(fā)育的蛋白質(zhì)或獲得基因的組成、結(jié)構(gòu)與功能提供了研究的思路。
　　研究建立了內(nèi)蒙古絨山羊1～12月份皮膚蛋

2、白質(zhì)單向電泳表達(dá)譜，經(jīng)過(guò)單向電泳對(duì)皮膚蛋白質(zhì)的分離，初步分析了皮膚蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。內(nèi)蒙古絨山羊皮膚蛋白SDS-PAGE電泳得到19條主要蛋白條帶，分子量范圍在189.38～14.91 KD之間。其中占總蛋白百分含量最高的為條帶1、7、8、9、10、11，分子量分別為189.38 KD、55.93 KD、52.21 KD、48.42 KD、45.89 KD、38.38 KD。不同時(shí)期的皮膚蛋白質(zhì)樣品中，相同條帶占總蛋白的百分比幾乎都保持

3、在一個(gè)相近的范圍內(nèi)，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)的某一時(shí)期的蛋白質(zhì)樣品在某一分子量明顯的高表達(dá)或低表達(dá)。
　　研究利用液氮研磨法成功分離提取了內(nèi)蒙古絨山羊皮膚蛋白質(zhì)，系統(tǒng)優(yōu)化了內(nèi)蒙古絨山羊皮膚蛋白質(zhì)組雙向凝膠電泳技術(shù)（2-DE），使之有效地用于內(nèi)蒙古絨山羊皮膚雙向凝膠電泳圖譜的構(gòu)建。利用上述方法和技術(shù)，研究首先建立了內(nèi)蒙古絨山羊皮膚在pI3-10范圍內(nèi)不同時(shí)期的全蛋白質(zhì)表達(dá)圖譜。研究利用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)其中差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行了比較分析。
　　

4、經(jīng)過(guò)對(duì)內(nèi)蒙古絨山羊1～12月份皮膚蛋白質(zhì)2-DE圖譜分析，發(fā)現(xiàn)在4月份和8月份出現(xiàn)了相對(duì)較多的蛋白斑點(diǎn)。不同時(shí)期皮膚蛋白圖譜具有較高的相似性，而相鄰月份間的匹配率更高。特異蛋白點(diǎn)分析發(fā)現(xiàn)有2個(gè)蛋白點(diǎn)只在3月份圖譜中出現(xiàn)，2個(gè)蛋白點(diǎn)只發(fā)現(xiàn)在7月份圖譜中，1個(gè)蛋白點(diǎn)只發(fā)現(xiàn)在8月份圖譜中。內(nèi)蒙古絨山羊不同月份皮膚差異蛋白質(zhì)組研究結(jié)果顯示，在選取的21個(gè)1～12月份共表達(dá)的高豐度蛋白點(diǎn)中，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)它們保持某種一致的變化規(guī)律，而是不同的蛋白點(diǎn)在