濰坊地區(qū)小鵝瘟流行現(xiàn)狀調(diào)查和防制的研究.pdf

1、經(jīng)過病料采集、病料處理和鵝胚尿囊腔接種試驗(yàn)，從山東濰坊的高密、諸城、臨朐、昌樂等地分離到30株病毒。其中27株經(jīng)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、鵝胚中和試驗(yàn)、小鵝瘟病毒分離株人工感染試驗(yàn)以及血凝試驗(yàn)被確定為小鵝瘟病毒。并對(duì)小鵝瘟病鵝群的所在地域、品種、日齡、數(shù)量、發(fā)病率、死亡率、發(fā)生月份、免疫方式、管理方式等相關(guān)情況進(jìn)行了調(diào)查。調(diào)查統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明：濰坊地區(qū)小鵝瘟主要發(fā)生于4～8月份，其中5～7月份出現(xiàn)的頻率最高。它可使不同品種的鵝發(fā)病，其主要發(fā)病同齡為1～

2、21日齡。而且發(fā)病鵝的發(fā)病日齡越小，死亡率越高。7日齡以內(nèi)的雛鵝發(fā)病，其死亡率可超過90％。在30個(gè)疑似小鵝瘟的病鵝群中，有50％的病鵝群存在細(xì)菌感染，有26.7％的病鵝群存在病原性大腸桿菌的感染。由此可見，小鵝瘟和細(xì)菌病，尤其和大腸桿菌的混合感染已成為養(yǎng)鵝業(yè)中一個(gè)值得重視的問題。 利用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)測(cè)定了小鵝瘟病鵝群血清中的小鵝瘟病毒的抗體效價(jià)，為科學(xué)制定鵝的免疫程序提供依據(jù)。對(duì)人工感染試驗(yàn)中致病性較強(qiáng)的小鵝瘟病毒臨朐分離株I進(jìn)

3、行了EID50測(cè)定，測(cè)得結(jié)果為10-6.5，0.3ml。為進(jìn)一步研究小鵝瘟病毒的毒力變化打下了基礎(chǔ)。用分離到的27株小鵝瘟病毒分別接種8日齡易感小鵝，其發(fā)病率為100％，死亡率為50％～100％。小鵝瘟病毒臨朐分離株I具有良好的免疫原性，用它制備的的小鵝瘟油乳劑滅活苗安全有效。應(yīng)用小鵝瘟病毒臨朐分離株I的高免卵黃抗體，預(yù)防小鵝瘟?xí)r，對(duì)小鵝的保護(hù)率達(dá)100％，治療小鵝瘟?xí)r康復(fù)率可達(dá)91.7％。雛鵝發(fā)生小鵝瘟后，越早使用卵黃抗體，治療效果越

4、好。對(duì)臨朐自然發(fā)病雛鵝的治療試驗(yàn)表明：小鵝瘟病毒臨朐分離株I的卵黃抗體的治愈率比市售的卵黃抗體的治愈率提高了8％。這可能與免疫接種的油苗含有小鵝瘟病毒當(dāng)?shù)刂暧嘘P(guān)。 根據(jù)GenBank中小鵝瘟病毒VP3基因全序列，設(shè)計(jì)了一對(duì)特異性引物，預(yù)期擴(kuò)增片段大小為375bp。提取病毒DNA進(jìn)行PCR反應(yīng)，成功擴(kuò)增出375bp的特異條帶。將PCR產(chǎn)物純化后，與pMD18-T載體連接，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞TG1，經(jīng)AMP篩選和PCR鑒