饑餓脅迫下萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)的消化生理及體成分特征研究【開(kāi)題報(bào)告+文獻(xiàn)綜述+畢業(yè)設(shè)計(jì)】

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文系列</b></p><p><b>　　開(kāi)題報(bào)告</b></p><p><b>　　水產(chǎn)養(yǎng)殖</b></p><p>　　饑餓脅迫下萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)的消化生理及體成份特征研究</p><p>　　一、選題的背景與意義</p>

2、;<p>　　萍鄉(xiāng)肉紅鯽(Carassius auratus var. pingxiangnensis)是江西省萍鄉(xiāng)地區(qū)分布的野生三倍體鯽魚(yú)突變體，為一個(gè)既可進(jìn)行兩性生殖又可進(jìn)行雌核發(fā)育的獨(dú)特變種。該魚(yú)鰓蓋透明，鮮紅鰓絲清晰可見(jiàn)；全身鱗片(半)透明，可見(jiàn)肌肉，通體顯肉紅色；體壁(半)透明，對(duì)光可辨脊柱、內(nèi)臟、腸管的輪廓；鰭條桔紅色透明；具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。此外，萍鄉(xiāng)肉紅鯽營(yíng)底棲生活，對(duì)各種生態(tài)環(huán)境都有很強(qiáng)的適應(yīng)能力，對(duì)溶氧

3、，水質(zhì)要求不高，味道鮮美、抗病力強(qiáng)、生長(zhǎng)適溫廣，具有較高的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖潛力。有關(guān)饑餓對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物影響的研究最多，包括饑餓對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物代謝水平及身體儲(chǔ)能物質(zhì)、形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)、集群行為和補(bǔ)償生長(zhǎng)等影響。但對(duì)長(zhǎng)期饑餓狀態(tài)下水產(chǎn)動(dòng)物消化酶的活性變化規(guī)律的系統(tǒng)研究報(bào)道很少。本文就饑餓對(duì)魚(yú)類(lèi)消化酶活性及其體成分的影響進(jìn)行研究，探討?hù)~(yú)類(lèi)在饑餓狀態(tài)下消化酶活性的變化規(guī)律，為萍鄉(xiāng)肉紅鯽的合理養(yǎng)殖提供參考資料。</p><p>　　研究的基

4、本內(nèi)容與擬解決的主要問(wèn)題：</p><p>　　（一）研究的基本內(nèi)容</p><p><b>　　1.消化酶研究</b></p><p>　?。?）比較正常及饑餓0d，3d,6d,9d,15d,21d,35d后，萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)肝臟、腸道的消化酶活性</p><p>　　（2）比較肝臟、腸道中消化酶活性分布及變化規(guī)律<

5、;/p><p>　　2. 體成份的變化研究</p><p>　　（1）比較正常及饑餓0d，3d,6d,9d,15d,21d,35d后，萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)肌肉組織中一般營(yíng)養(yǎng)組成</p><p>　　（2）比較正常及饑餓0d，3d,6d,9d,15d,21d,35d后，魚(yú)體的肥滿度及比肝值</p><p>　?。ǘM解決的主要問(wèn)題</p>

6、<p>　　1.能否發(fā)現(xiàn)正常魚(yú)和饑餓魚(yú)在消化酶活性和體成分上的差異。</p><p>　　2.使用最佳的消化酶測(cè)定方法，成熟標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。</p><p>　　3．能否找到萍鄉(xiāng)肉紅鯽饑餓的不可逆點(diǎn)即饑餓極限。</p><p>　　4．三種酶對(duì)餌料配制提供技術(shù)指標(biāo)。</p><p>　　研究的方法與技術(shù)路線：</p>&l

7、t;p><b>　　1.試驗(yàn)場(chǎng)所</b></p><p>　　寧波大學(xué)包玉書(shū)科學(xué)樓12號(hào)樓218實(shí)驗(yàn)室。</p><p><b>　　2.試驗(yàn)容器</b></p><p>　　17L塑料桶3只，實(shí)際蓄水15.5L。</p><p><b>　　3.試驗(yàn)用魚(yú)</b><

8、/p><p>　　取自寧波大學(xué)人工繁育的萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)，魚(yú)體規(guī)格4～6cm。選擇體色正常、健壯無(wú)傷、攝食正常、大小均勻的幼魚(yú)42尾用于試驗(yàn)。</p><p><b>　　4.試驗(yàn)環(huán)境</b></p><p>　　使各試驗(yàn)桶受光一致，光強(qiáng)度300LX。水溫保持在26～27℃。采用24h不間斷循環(huán)水，日循環(huán)量為7500％。流入水由出水總管通過(guò)分水器至各

9、試驗(yàn)桶，流出的水通過(guò)各出水管匯集于總出水管流至水過(guò)濾裝置，處理后的水由水泵打入出水總管。</p><p><b>　　5.試驗(yàn)設(shè)計(jì)</b></p><p>　　本實(shí)驗(yàn)分個(gè)2個(gè)試驗(yàn)組，一個(gè)為饑餓組，分別連續(xù)饑餓3d,6d,9d,15d,21d,35d. 在特定時(shí)間（下午1點(diǎn)）隨即抽取6條魚(yú)進(jìn)行解剖。一個(gè)為對(duì)照組，進(jìn)行正常投喂，分別在第一天和最后一天取樣解剖。測(cè)定每條魚(yú)的

10、體重、肝重、體長(zhǎng)，并取肝和腸（沖洗干凈并吸干），及時(shí)在-20℃溫度下冰凍。測(cè)定消化酶活性和體成分.</p><p><b>　　6.試驗(yàn)方法</b></p><p><b>　　6.1消化酶的測(cè)定</b></p><p>　　6.1.1 消化酶分析樣品的制備：迅速取出樣品，稱(chēng)取特定質(zhì)量的樣品，組織勻漿后，在4 ℃、4000

11、 r/min 下離心30 min，取上清液，分別測(cè)定肝胰臟、前腸和后腸中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性。</p><p>　　6.1.2 消化酶活性的測(cè)定：蛋白酶活性測(cè)定采用福林－酚試劑法，淀粉酶活性測(cè)定采用淀粉－碘顯色法測(cè)定，脂肪酶活性測(cè)定采用聚乙烯醇橄欖油乳化液水解法。每樣品重復(fù)測(cè)定3 次，取出其平均值。</p><p>　　(實(shí)驗(yàn)中使用試劑盒測(cè)定消化酶)</p><

12、p>　　6.2 體成分的測(cè)定</p><p>　　6.2.1 水分測(cè)定:烘箱干燥法。準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量的魚(yú)肌肉組織，用表面皿放入烘箱中，80-90℃，隔2小時(shí)測(cè)定一次，直到恒重。3個(gè)平行。</p><p>　　6.2.2 粗脂肪測(cè)定：采用索氏抽提法。加乙醚到提取瓶?jī)?nèi)約容積1/2～2/3,加樣,70℃～80℃恒溫水浴加熱,抽提16h至抽提管內(nèi)無(wú)乙醚,回餾一次,再蒸餾,倒出乙醚,直到提取瓶

13、中乙醚完全蒸干.稱(chēng)重,計(jì)算.3個(gè)平行.</p><p>　　6.2.3 粗蛋白測(cè)定：凱氏定氮法(改進(jìn)型凱氏定氮儀)。進(jìn)過(guò)樣品處理→消化→蒸餾→滴定→計(jì)算等過(guò)程。3個(gè)平行。</p><p><b>　　7、技術(shù)路線</b></p><p>　　研究的總體安排與進(jìn)度：</p><p>　　2010.1-2010.2 畢業(yè)論文

14、選題</p><p>　　2010.2-2010.3 進(jìn)行文獻(xiàn)查閱和資料收集，制定具體研究計(jì)劃和試驗(yàn)方案。</p><p>　　2010.1-2010.4 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，整理、分析數(shù)據(jù)。</p><p>　　2010.4-2010.5 開(kāi)題答辯與綜述。</p><p>　　2010.9-2010.10 完成2篇外文翻譯，論文撰寫(xiě)、提交并答辯。&l

15、t;/p><p><b>　　主要參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1] 錢(qián)云霞.饑餓對(duì)養(yǎng)殖鱸蛋白酶活力的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2002,21(3)：6-7.</p><p>　　[2] Rueda F M, et al. Effect of fasting and refeeding on growth and body compos

16、ition of red porgy Pagruspagrus[J]. Aquacult Res,1998,29(6):447-452.</p><p>　　[3] Larsson A,Lewander K. Metabolic effects of strvation in the eel, Anguilla anguilla [J]. Comp Biochem Physiol,1973, 44A: 367-

17、374.</p><p>　　[4] Ince B W, Thorpe A. The effects of starvation and force - feeding on the metabolism of the northernp ikd. Esox lucius [J]. J.Fish Biol, 1976, 8: 79-88.</p><p>　　[5] 謝小軍,鄧?yán)?張波

18、．饑餓對(duì)魚(yú)類(lèi)生理生態(tài)學(xué)影響的研究進(jìn)展[J]．水生生物學(xué)報(bào),1998,22(2)：181-188.</p><p>　　[6] 樊啟學(xué),程鵬,劉文奎.饑餓和再投喂對(duì)翹嘴鲌幼魚(yú)消化酶活性的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2008,15(3):439-445</p><p>　　[7] 宋兵,陳立僑,高露姣,陳亞瞿,徐彥明.饑餓對(duì)雜交鱘仔魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和體成分的影響[J]. 水生生物學(xué)報(bào),2004,

19、28(3):333-336</p><p>　　[8] 洪一江,胡成鈺,張忠萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽肌肉營(yíng)養(yǎng)成分分析[J].水利漁業(yè),2001,21(3):20-21.</p><p>　　[9] 王啟林,余智杰,張忠萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽成魚(yú)養(yǎng)殖試驗(yàn)[J].江西水產(chǎn)科技,2005, 3:20-22.</p><p>　　[10] 肖增雪,王啟林,張忠萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽

20、養(yǎng)殖推廣及經(jīng)濟(jì)效益分析[J].江西水產(chǎn)科技,2005,</p><p><b>　　3:16-19.</b></p><p>　　[11] 余智杰,王啟林,張忠萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽人工繁殖及苗種培育技術(shù)研究[J].江西水產(chǎn)科技,2005,2:14-17.</p><p>　　[12] 余智杰,王啟林,鄧勇輝,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽含肉率及肌肉營(yíng)養(yǎng)成分

21、分析[J].江西水產(chǎn)科技,</p><p>　　2005,4:16-19.</p><p>　　[13] 陳建明,葉金云,潘茜,等．翹嘴紅鲌肌肉營(yíng)養(yǎng)組成分析[J]．浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2003,22(4)：314-317.</p><p>　　[14] 高露姣,陳立僑,趙曉勤,等．施氏鱘幼魚(yú)的饑餓和補(bǔ)償生長(zhǎng)研究—對(duì)消化器官結(jié)構(gòu)和酶活性的影響[J]．中國(guó)

22、水產(chǎn)科學(xué),2004,11(5)：413-419.</p><p>　　[15] 高露姣,陳立僑,宋兵.饑餓和補(bǔ)償生長(zhǎng)對(duì)史氏鱘幼魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和體成分的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2004,6(3):279-284.</p><p>　　[16] 鄭曙明,王燕妮,聶迎霞,等．虎鯊饑餓后的補(bǔ)償生長(zhǎng)及淀粉酶活性研究[J]．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,22(5)：483-487.</p>

23、<p>　　[17] 龍良啟,熊邦喜,白東清,等．池塘鰻鱺胃腸組織消化酶的初步研究[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1996,15(3)：275-278.</p><p>　　[18] 李瑾,何瑞國(guó),王學(xué)東．中華鱘消化酶活性分布的研究[J]．水產(chǎn)科技情報(bào),2001,28(3)：99-102.</p><p>　　[19] 戴賢君,舒妙安．黃鱔不同生長(zhǎng)階段消化器官及其消化酶的變

24、化[J]．上海交通大學(xué)學(xué)報(bào),2002,20(2)：113-116.</p><p>　　[20] 楊代勤．黃鱔營(yíng)養(yǎng)需要與消化酶的研究[D]．武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2002.</p><p>　　[21] 吳婷婷,朱曉鳴．鱖魚(yú)、青魚(yú)、草魚(yú)、鯉、鯽、鰱消化酶活性的研究[J]．中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),1994,1(2)：10-17.</p><p>　　[22] 倪壽文,桂遠(yuǎn)

25、明,劉煥亮．草魚(yú)、鯉、鰱、鳙和尼羅羅非魚(yú)淀粉酶的比較研究[J]．大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1992,7(1)：24-31.</p><p>　　[23] 王燕妮,張志蓉,鄭曙明．鯉魚(yú)的補(bǔ)償生長(zhǎng)及饑餓對(duì)淀粉酶的影響[J]．水利漁業(yè),2001,21(5)：6-7.</p><p>　　[24] 劉宗柱,朱鳳華,徐永久,等. 凱氏定氮法測(cè)定牙鲆肌肉粗蛋白含量方法的改進(jìn)[J]. 海洋科學(xué),1999,6

26、：1-3. </p><p>　　[25] 馬燕梅,梅景良,林樹(shù)根．鱖胃腸道和肝胰臟主要消化酶活性的研究[J]．江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,26(4)：584-588.</p><p>　　[26] 呂林蘭,董學(xué)興,王愛(ài)民,胡彭年,許峰.饑餓對(duì)異育銀鯽體成分及蛋白酶和淀粉酶的影響[J].水利漁業(yè),2007,27(5):26-28.</p><p>　　[27]

27、 沈文英,林浩然,張為民. 饑餓和再投喂對(duì)草魚(yú)魚(yú)種生物化學(xué)組成的影響[J]. 動(dòng)物學(xué)報(bào),1999,45 (4):404-412.</p><p><b>　　畢業(yè)論文文獻(xiàn)綜述</b></p><p><b>　　水產(chǎn)養(yǎng)殖</b></p><p>　　饑餓對(duì)魚(yú)類(lèi)消化酶活性及體成分的影響規(guī)律探討</p><

28、;p>　　摘要：　自然界中,由于環(huán)境變遷、季節(jié)更替以及食物分布在時(shí)空上的不均勻性,動(dòng)物經(jīng)常面臨食物資源短缺的饑餓脅迫。即使在養(yǎng)殖條件下,餌料空間分布的不均勻性及諸如水流等因素的影響,許多養(yǎng)殖動(dòng)物也會(huì)遭遇餌料缺乏,尤其是處于仔稚期的動(dòng)物,更容易受到饑餓的脅迫。本文尋求魚(yú)類(lèi)在饑餓過(guò)程中體內(nèi)消化酶活性和體成分變化規(guī)律。查閱文獻(xiàn)后發(fā)現(xiàn)多數(shù)魚(yú)類(lèi)在饑餓初期，消化酶活性下降幅度較大，當(dāng)消化酶的活性下降到一定程度，繼續(xù)饑餓，其活性下降不明顯。脂肪

29、和糖原是主要的貯能物質(zhì),饑餓狀態(tài)下主要消耗這兩種物質(zhì),對(duì)蛋白質(zhì)的利用較少,而且一般是在脂肪被大量消耗之后。隨著主要貯能物質(zhì)的大量消耗,水分和灰分的相對(duì)含量則逐漸上升。</p><p>　　關(guān)鍵詞：饑餓；消化酶；體成分；變化規(guī)律</p><p>　　饑餓是魚(yú)類(lèi)生活史中經(jīng)常面臨的環(huán)境脅迫因子之一,不同種類(lèi)或不同生活周期的魚(yú)對(duì)饑餓的適應(yīng)方式及耐受力有所不同。已有學(xué)者探討了某些魚(yú)類(lèi)在饑餓狀態(tài)下的消

30、化酶變化模式,以及身體化學(xué)組成的變化,以此來(lái)考察魚(yú)類(lèi)對(duì)饑餓脅迫的適應(yīng)性特征。</p><p>　　本文尋求魚(yú)類(lèi)在饑餓過(guò)程中體內(nèi)消化酶活性和體成分變化規(guī)律。有關(guān)饑餓對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物影響的研究最多，包括饑餓對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物代謝水平及身體儲(chǔ)能物質(zhì)、形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)、集群行為和補(bǔ)償生長(zhǎng)等影響。但對(duì)長(zhǎng)期饑餓狀態(tài)下水產(chǎn)動(dòng)物消化酶的活性變化規(guī)律的系統(tǒng)研究報(bào)道很少。本文就饑餓對(duì)魚(yú)類(lèi)消化酶活性及其體成分的影響進(jìn)行研究，探討?hù)~(yú)類(lèi)在饑餓狀態(tài)下消化酶

31、活性的變化規(guī)律，為魚(yú)類(lèi)的養(yǎng)殖和人工飼料配制提供參考資料。</p><p>　　1饑餓條件下魚(yú)類(lèi)消化酶活性的變化規(guī)律</p><p>　　1.1 消化酶在消化器官部位的活性分布</p><p>　　1.1.1 蛋白酶活性分布</p><p>　　因?yàn)檫M(jìn)化的結(jié)果，不同種魚(yú)類(lèi)體內(nèi)的消化酶活性分布是不相同的</p><p>　

32、　實(shí)驗(yàn)證明魚(yú)類(lèi)肝胰臟主要分泌蛋白酶原，因此肝胰臟的蛋白酶活性微弱或沒(méi)有活性，而腸道分泌腸致活酶，它能激活蛋白酶原，共同促進(jìn)腸道對(duì)食物蛋白質(zhì)的消化吸收。大部分魚(yú)類(lèi)的蛋白酶活性前腸最高，后腸次之，肝胰臟最低。如：翹嘴鲌，養(yǎng)鰻鱺，中華鱘，鱖，黃鱔，鱖與鰱等也發(fā)現(xiàn)了與此相似的規(guī)律。但不是所有魚(yú)都這樣，比如青魚(yú)不同消化器官中蛋白酶活性卻是后腸最高、前腸次之、肝臟最低。</p><p>　　1.1.2 淀粉酶活性分布<

33、/p><p>　　實(shí)驗(yàn)證明肝胰臟是淀粉酶的合成中心，大部分魚(yú)類(lèi)淀粉酶活性順序是肝胰臟最高、前腸次之、后腸最低。如：草魚(yú)、鯉、鰱、鳙、尼羅羅非魚(yú)、鱖等魚(yú)類(lèi)體內(nèi)的淀粉酶分布都與此規(guī)律相似。但有人發(fā)現(xiàn)黃鱔腸道中的淀粉酶活性高于肝胰臟。</p><p>　　1.1.3 脂肪酶活性分布</p><p>　　魚(yú)類(lèi)消化道內(nèi)脂肪酶的活性分布是因魚(yú)的種類(lèi)不同而異的。鱖、青魚(yú)后腸的脂肪酶活

34、性明顯高于前腸。鱖脂肪酶活性是腸高于肝臟。黃鱔脂肪酶的活性順序是肝臟高于腸。草魚(yú)和鯉的肝胰臟脂肪酶活性明顯高于腸，而鰱鳙的肝胰臟脂肪酶的活性則比腸低。</p><p>　　1.2 饑餓過(guò)程中消化酶活性的變化規(guī)律</p><p>　　饑餓對(duì)蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性影響很大。在饑餓初期，消化酶活性下降幅度較大，當(dāng)消化酶的活性下降到一定程度，繼續(xù)饑餓，其活性下降不明顯。這是所有魚(yú)類(lèi)體內(nèi)消化酶

35、活性變化的主要規(guī)律。</p><p>　　Munilla-Moran[28]發(fā)現(xiàn)饑餓對(duì)大菱鲆的消化功能產(chǎn)生影響，未攝食的大菱鲆的消化酶活性比攝食的要低，而且后腸的蛋白酶降低的最快，中腸的彈性蛋白酶下降的最快。錢(qián)云霞[1]對(duì)養(yǎng)殖鱸的研究發(fā)現(xiàn)，饑餓使各部位蛋白酶活性均有所下降。其原因可能是饑餓期間消化道沒(méi)有食物蠕動(dòng)的機(jī)械刺激，因而消化酶的分泌量下降。另外，食物通過(guò)嗅覺(jué)、視覺(jué)等感覺(jué)器官影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)消化腺分泌的控制

36、，在饑餓的情況下，魚(yú)類(lèi)感覺(jué)器官的刺激作用不復(fù)存在，從而降低了消化酶的分泌。</p><p>　　但也有研究結(jié)果與本規(guī)律不盡相同。王燕妮[17]等發(fā)現(xiàn)，饑餓后鯉的淀粉酶活性會(huì)大幅上升。鄭曙明等研究發(fā)現(xiàn)，在饑餓時(shí)間較短時(shí)虎鯊淀粉酶活性下降，然而當(dāng)饑餓時(shí)間持續(xù)增加后，其活性則迅速上升。高露姣等研究發(fā)現(xiàn)，饑餓7 d 時(shí)，施氏鱘十二指腸、胃、肝胰臟的消化酶活性均有較大幅度的下降，繼續(xù)饑餓后，有部分酶活性出現(xiàn)不同程度的反彈。

37、他們認(rèn)為這可能是由以下機(jī)制引起的：魚(yú)類(lèi)在饑餓時(shí)，代謝發(fā)生適應(yīng)性變化，通過(guò)提高身體各種酶的活性，以達(dá)到積極利用體內(nèi)的儲(chǔ)存物質(zhì)以維持生命的目的，是對(duì)饑餓的應(yīng)激適應(yīng)。</p><p>　　2饑餓對(duì)體成分的影響</p><p>　　在饑餓期間,魚(yú)類(lèi)動(dòng)用身體貯存的能量來(lái)維持生命活動(dòng),作為主要貯能物質(zhì)的糖原、脂肪和蛋白質(zhì),在饑餓過(guò)程中會(huì)被不同程度地消耗。在多數(shù)魚(yú)類(lèi)中,脂肪和糖原是主要的貯能物質(zhì),饑餓狀

38、態(tài)下主要消耗這兩種物質(zhì),對(duì)蛋白質(zhì)的利用較少,而且一般是在脂肪被大量消耗之后。隨著主要貯能物質(zhì)的大量消耗,水分和灰分的相對(duì)含量則逐漸上升。</p><p>　　高露姣[14]試驗(yàn)結(jié)果,史氏鱘幼魚(yú)饑餓至第21 天時(shí),蛋白質(zhì)含量大幅度減少,它比饑餓前和饑餓14d 時(shí)分別減少了19. 33 %和11. 52 %; 脂肪含量減少最快的,是在饑餓第14 天時(shí),其含量比饑餓前和饑餓第7 天時(shí)分別減少了43. 39 %和35.

39、41 %; 而肝糖原下降最快的是在饑餓至第7 天時(shí),它的含量只有饑餓前的3. 36 % , 這一方面表明肝臟是史氏鱘幼魚(yú)的重要能源物質(zhì)儲(chǔ)存器官,同時(shí)也提示史氏鱘幼魚(yú)能較好地利用體內(nèi)的糖類(lèi)作為能源物質(zhì)。從動(dòng)用的程度來(lái)說(shuō),幼魚(yú)最早大量動(dòng)用的是糖原, 然后是脂肪,其次是蛋白質(zhì), 這與紅大麻哈魚(yú)等多數(shù)魚(yú)類(lèi)的情況相似 。從蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物代謝提供的能量來(lái)看,表明該種魚(yú)在饑餓初期階段(7d 內(nèi)) ,主要靠肝糖原代謝供能,隨著饑餓時(shí)間延長(zhǎng),

40、先增加對(duì)脂肪的利用, 然后再較大程度的利用蛋白質(zhì)和脂肪作為主要能源物質(zhì),以提供維持生命所需的能量,體現(xiàn)了史氏鱘幼魚(yú)對(duì)饑餓的耐受力和適應(yīng)特征。從肝糖原和肌糖原含量的變化可以看出, 史氏鱘在饑餓過(guò)程中, 先大量利用肝糖原,然后再大量利用肌糖原。在蛋白質(zhì)、脂肪和糖原被用作能源而含量下降的同時(shí),水分和灰分的相</p><p>　　呂林蘭實(shí)驗(yàn)證明異育銀鯽首先動(dòng)用糖原物質(zhì),然后再同時(shí)利用脂肪和蛋白質(zhì);而粗脂肪含量降低的幅度比

41、粗蛋白要大得多,這說(shuō)明是異育銀鯽在消耗蛋白質(zhì)和脂肪的同時(shí),以消耗脂肪為主。</p><p>　　也有學(xué)者研究得到：鮭鱒魚(yú)類(lèi)在饑餓初期主要利用蛋白質(zhì)作為能源物質(zhì)。在饑餓過(guò)程中,雜交鱘仔魚(yú)同時(shí)動(dòng)用蛋白質(zhì)、脂肪以滿足能量消耗所需。不過(guò)抵達(dá)PNR點(diǎn)時(shí)魚(yú)體粗蛋白含量下降的幅度明顯低于粗脂肪含量。Hung 等的研究表明,高首鱘幼魚(yú)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期饑餓,魚(yú)體粗蛋白含量只下降了9 %,而粗脂肪含量卻下降了84 % 。由此可以假設(shè),鱘類(lèi)仔

42、幼魚(yú)在饑餓過(guò)程中主要依靠脂肪來(lái)滿足能量消耗所需。</p><p>　　奇特的還有一些魚(yú)類(lèi)在不同的環(huán)境條件下利用身體的不同儲(chǔ)能物質(zhì), Mehner等報(bào)道河鱸幼魚(yú)饑餓后在15 ℃時(shí)主要利用蛋白質(zhì)作為能源, 而在20 ℃時(shí)主要是利用糖原作為能源。</p><p>　　3魚(yú)類(lèi)消化酶活性和體成分對(duì)饑餓脅迫的響應(yīng)規(guī)律在實(shí)踐中的意義</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)為補(bǔ)償生長(zhǎng)研究的輔導(dǎo)

43、研究，在消化生理上提供了技術(shù)參數(shù)。對(duì)建立更科學(xué)的投餌機(jī)制有很大幫助，使餌料的成分更加合理。</p><p>　　體成分研究意義：在不同溫度下建立了魚(yú)類(lèi)耐饑極限，對(duì)于一些肥胖魚(yú)種來(lái)說(shuō)，適當(dāng)饑餓，消耗過(guò)度積累的脂肪（如大黃魚(yú)），使得魚(yú)體的體型更美觀，魚(yú)肉更健康，營(yíng)養(yǎng)更合理。</p><p>　　為秋末適食停餌及春天恢復(fù)投餌提供了理論依據(jù)。</p><p>　　從規(guī)律中可

44、以發(fā)現(xiàn)魚(yú)類(lèi)的饑餓耐受能力和對(duì)環(huán)境適應(yīng)性，對(duì)魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)機(jī)理有了更深的了解，掌握魚(yú)類(lèi)生活習(xí)性，對(duì)養(yǎng)殖有益。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　[1] 錢(qián)云霞.饑餓對(duì)養(yǎng)殖鱸蛋白酶活力的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2002,21(3)：6-7.</p><p>　　[2] Rueda F M, et al. Effect

45、of fasting and refeeding on growth and body composition of red porgy Pagruspagrus[J]. Aquacult Res,1998,29(6):447-452.</p><p>　　[3] Munilla-Moran R,Stark J R. Protein digestion in early turbot larvae,Scopht

46、halmus maximus[J]. Aquaculture,1989,81(3-4)：315-327</p><p>　　[4] 謝小軍,鄧?yán)?張波．饑餓對(duì)魚(yú)類(lèi)生理生態(tài)學(xué)影響的研究進(jìn)展[J]．水生生物學(xué)報(bào),1998,22(2)：181-188.</p><p>　　[5] 樊啟學(xué),程鵬,劉文奎.饑餓和再投喂對(duì)翹嘴鲌幼魚(yú)消化酶活性的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2008,15(3):439

47、-445</p><p>　　[6] 宋兵,陳立僑,高露姣,陳亞瞿,徐彥明.饑餓對(duì)雜交鱘仔魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和體成分的影響[J]. 水生生物學(xué)報(bào),2004,28(3):333-336</p><p>　　[7] 洪一江,胡成鈺,張忠萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽肌肉營(yíng)養(yǎng)成分分析[J].水利漁業(yè),2001,21(3):20-21.</p><p>　　[8] 王啟林,余智杰,張忠

48、萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽成魚(yú)養(yǎng)殖試驗(yàn)[J].江西水產(chǎn)科技,2005, 3:20-22.</p><p>　　[9] 肖增雪,王啟林,張忠萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽養(yǎng)殖推廣及經(jīng)濟(jì)效益分析[J].江西水產(chǎn)科技,2005,</p><p><b>　　3:16-19.</b></p><p>　　[10] 余智杰,王啟林,張忠萍,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽人工繁殖及苗種培

49、育技術(shù)研究[J].江西水產(chǎn)科技,2005,2:14-17.</p><p>　　[11] 余智杰,王啟林,鄧勇輝,等.萍鄉(xiāng)肉紅鯽含肉率及肌肉營(yíng)養(yǎng)成分分析[J].江西水產(chǎn)科技,</p><p>　　2005,4:16-19.</p><p>　　[12] 陳建明,葉金云,潘茜,等．翹嘴紅鲌肌肉營(yíng)養(yǎng)組成分析[J]．浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2003,22(4)：

50、314-317.</p><p>　　[13] 高露姣,陳立僑,趙曉勤,等．施氏鱘幼魚(yú)的饑餓和補(bǔ)償生長(zhǎng)研究—對(duì)消化器官結(jié)構(gòu)和酶活性的影響[J]．中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2004,11(5)：413-419.</p><p>　　[14] 高露姣,陳立僑,宋兵.饑餓和補(bǔ)償生長(zhǎng)對(duì)史氏鱘幼魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和體成分的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2004,6(3):279-284.</p><p

51、>　　[15] 鄭曙明,王燕妮,聶迎霞,等．虎鯊饑餓后的補(bǔ)償生長(zhǎng)及淀粉酶活性研究[J]．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,22(5)：483-487.</p><p>　　[16] 龍良啟,熊邦喜,白東清,等．池塘鰻鱺胃腸組織消化酶的初步研究[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1996,15(3)：275-278.</p><p>　　[17]　 王燕妮,張志蓉,鄭曙明．鯉魚(yú)的補(bǔ)償生長(zhǎng)及饑餓對(duì)

52、淀粉酶的影響[J]．水利漁業(yè),2001,21(5)：6-7.</p><p>　　[18] 李瑾,何瑞國(guó),王學(xué)東．中華鱘消化酶活性分布的研究[J]．水產(chǎn)科技情報(bào),2001,28(3)：99-102.</p><p>　　[19] 戴賢君,舒妙安．黃鱔不同生長(zhǎng)階段消化器官及其消化酶的變化[J]．上海交通大學(xué)學(xué)報(bào),2002,20(2)：113-116.</p><p&

53、gt;　　[20] 楊代勤．黃鱔營(yíng)養(yǎng)需要與消化酶的研究[D]．武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2002.</p><p>　　[21] 吳婷婷,朱曉鳴．鱖魚(yú)、青魚(yú)、草魚(yú)、鯉、鯽、鰱消化酶活性的研究[J]．中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),1994,1(2)：10-17.</p><p>　　[22] 倪壽文,桂遠(yuǎn)明,劉煥亮．草魚(yú)、鯉、鰱、鳙和尼羅羅非魚(yú)淀粉酶的比較研究[J]．大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1992,7(1)：

54、24-31.</p><p>　　[23] 王燕妮,張志蓉,鄭曙明．鯉魚(yú)的補(bǔ)償生長(zhǎng)及饑餓對(duì)淀粉酶的影響[J]．水利漁業(yè),2001,21(5)：6-7.</p><p>　　[24] 劉宗柱,朱鳳華,徐永久,等. 凱氏定氮法測(cè)定牙鲆肌肉粗蛋白含量方法的改進(jìn)[J]. 海洋科學(xué),1999,6：1-3. </p><p>　　[25] 馬燕梅,梅景良,林樹(shù)根．鱖胃腸道

55、和肝胰臟主要消化酶活性的研究[J]．江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,26(4)：584-588.</p><p>　　[26] 呂林蘭,董學(xué)興,王愛(ài)民,胡彭年,許峰.饑餓對(duì)異育銀鯽體成分及蛋白酶和淀粉酶的影響[J].水利漁業(yè),2007,27(5):26-28.</p><p>　　[27] 沈文英,林浩然,張為民. 饑餓和再投喂對(duì)草魚(yú)魚(yú)種生物化學(xué)組成的影響[J]. 動(dòng)物學(xué)報(bào),1999,4

56、5 (4):404-412.</p><p>　　[28] Ince B W, Thorpe A. The effects of starvation and force - feeding on the metabolism of the northernp ikd. Esox lucius [J]. J.Fish Biol, 1976, 8: 79-88.</p><p><b

57、>　　本科畢業(yè)設(shè)計(jì)</b></p><p><b>　?。?0_ _屆）</b></p><p>　　饑餓脅迫下萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)的消化生理及體成分特征研究</p><p><b>　　目　錄</b></p><p><b>　　1引言14</b></p&

58、gt;<p><b>　　2材料與方法14</b></p><p>　　2.1 試驗(yàn)場(chǎng)所14</p><p>　　2.2 試驗(yàn)用魚(yú)及餌料14</p><p>　　2.3 試驗(yàn)條件14</p><p>　　2.4 試驗(yàn)儀器設(shè)備14</p><p>　　2.5 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)14&

59、lt;/p><p>　　2.6 實(shí)驗(yàn)方法15</p><p>　　2.7 體成分的測(cè)定15</p><p>　　2.8 消化酶的測(cè)定15</p><p>　　2.9 數(shù)據(jù)分析和主要計(jì)算公式15</p><p>　　2.9.1 數(shù)據(jù)分析15</p><p>　　2.9.2 主要計(jì)算公式15

60、</p><p><b>　　3結(jié)果16</b></p><p>　　3.1 饑餓脅迫下肥滿度及比肝重的變化16</p><p>　　3.2 饑餓脅迫下的體成分的變化17</p><p>　　3.2.1 饑餓脅迫下肌肉水分含量的變化17</p><p>　　3.2.2 饑餓脅迫下蛋白質(zhì)含量

61、的變化17</p><p>　　3.2.3 饑餓脅迫下脂肪含量的變化18</p><p>　　3.3 饑餓脅迫下消化酶的變化18</p><p>　　3.3.1 胃蛋白酶活性變化18</p><p>　　3.3.2 饑餓脅迫下淀粉酶活性變化19</p><p>　　3.3.3 饑餓脅迫下脂肪酶活性變化19&

62、lt;/p><p><b>　　4討論20</b></p><p>　　4.1 饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽的體成分的影響20</p><p>　　4.2 饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽的消化酶生理的影響21</p><p>　　4.3 饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽肥滿度和比肝重的影響22</p><p><b>　　5

63、小結(jié)22</b></p><p>　　致謝錯(cuò)誤!未定義書(shū)簽。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)22</b></p><p>　　附錄錯(cuò)誤!未定義書(shū)簽。</p><p>　　摘要:對(duì)照組連續(xù)飽食投喂35d，處理組分別饑餓3、6、9、15、21、27、35d，研究饑餓脅迫對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)的消化生理及體

64、成分的影響。結(jié)果表明，在饑餓的過(guò)程中，處理組的胃蛋白酶，淀粉酶，脂肪酶的活性變化趨勢(shì)相同，饑餓前期(3～9d)，消化酶活性迅速下降，極其顯著(P<0.05)，其中在饑餓3d組胃蛋白酶活性下降了42.2%，脂肪酶活性下降了40%，淀粉酶下降了28%。饑餓后期消化酶活性下降不明顯，淀粉酶具有反彈現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)分析了饑餓后紅鯽幼魚(yú)的體組分變化。饑餓狀態(tài)下，紅鯽幼魚(yú)比肝重和肥滿度下降，各饑餓組比肝重和肥滿度均與對(duì)照組存在極顯著差異(P<

65、;0. 05)，其中饑餓3d組比肝重和肥滿度與初始比肝重和肥滿度存在極顯著差異(P<0. 05)，比肝重下降了31.7%，肥滿度下降了19.3%。饑餓狀態(tài)下，粗蛋白，粗脂肪含量下降，水分含量上升。蛋白質(zhì)在體成分中的含量變化不大(P>0.05)，說(shuō)明萍鄉(xiāng)肉紅鯽對(duì)蛋白質(zhì)利用較少；0d～9d，脂肪含量由原來(lái)的11%迅速降至4%(P<0.01)，說(shuō)明脂肪是紅鯽的主要貯能物質(zhì)，在饑餓的情況下會(huì)被首先消耗，在9d～35d消耗速度變

66、慢，但變化仍十分明顯(P</p><p>　　關(guān)鍵詞：萍鄉(xiāng)肉紅鯽；饑餓；消化酶；體成分</p><p>　　Abstract: In the control group of consecutive satiation feeding 35d, treatments were hungry 3,6,9,15,21,27,35 d, of starvation stress on Caras

67、sius auratus var. Pingxiangnensis juvenile digestive physiology and body composition. The results showed that starvation process, treatment of pepsin, amylase, lipase activity showed the same trend, hunger, early (3 ~ 9d

68、), digestive enzyme activity decreased rapidly, is extremely significant (P <0.05), which in 3d hunger decreased pepsin activity group 42.</p><p>　　Keywords: Carassius auratus var. pingxiangnensis; hunger

69、; digestive enzymes; body composition</p><p><b>　　1引言</b></p><p>　　由于自然界中食物分布的空間不均勻性、季節(jié)更替或環(huán)境劇變等原因，魚(yú)類(lèi)經(jīng)常會(huì)面臨食物的缺乏而受到饑餓脅迫。由于不同種類(lèi)的水產(chǎn)動(dòng)物的生理結(jié)構(gòu)不同，它們對(duì)饑餓的耐受力和適應(yīng)性不同。深入研究魚(yú)類(lèi)對(duì)饑餓的耐受力和適應(yīng)性，對(duì)于保護(hù)水產(chǎn)資源、指導(dǎo)

70、漁業(yè)生產(chǎn)具有積極地意義。</p><p>　　幼魚(yú)階段在魚(yú)類(lèi)生活史中是最脆弱的，對(duì)食物和環(huán)境條件最為敏感的時(shí)期，幼魚(yú)在饑餓狀態(tài)下極易死亡。研究饑餓脅迫對(duì)幼魚(yú)的影響對(duì)保證幼魚(yú)成活率有重要作用。</p><p>　　萍鄉(xiāng)肉紅鯽(Carassius auratus var. pingxiangnensis)是江西省萍鄉(xiāng)地區(qū)分布的野生三倍體鯽魚(yú)突變體，為一個(gè)既可進(jìn)行兩性生殖又可進(jìn)行雌核發(fā)育的獨(dú)特變

71、種。該魚(yú)鰓蓋透明，鮮紅鰓絲清晰可見(jiàn)；全身鱗片(半)透明，可見(jiàn)肌肉，通體顯肉紅色；體壁(半)透明，對(duì)光可辨脊柱、內(nèi)臟、腸管的輪廓；鰭條桔紅色透明；具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[7]。此外，萍鄉(xiāng)肉紅鯽營(yíng)底棲生活，對(duì)各種生態(tài)環(huán)境都有很強(qiáng)的適應(yīng)能力，對(duì)溶氧，水質(zhì)要求不高，味道鮮美、抗病力強(qiáng)、生長(zhǎng)適溫廣，具有較高的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖潛力[8]。</p><p>　　有關(guān)饑餓對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物影響的研究最多，包括饑餓對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物代謝水平及身體儲(chǔ)能物質(zhì)、形

72、態(tài)和組織結(jié)構(gòu)、集群行為和補(bǔ)償生長(zhǎng)等影響[9]。但對(duì)長(zhǎng)期饑餓狀態(tài)下水產(chǎn)動(dòng)物消化酶的活性變化規(guī)律的系統(tǒng)研究報(bào)道很少。本文就饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽消化酶活性及其體成分的影響進(jìn)行研究，探討其在饑餓狀態(tài)下消化酶活性和體成分的變化情況，為萍鄉(xiāng)肉紅鯽的合理養(yǎng)殖提供參考資料。</p><p><b>　　2材料與方法</b></p><p><b>　　2.1 試驗(yàn)場(chǎng)所</

73、b></p><p>　　飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)在寧波大學(xué)包玉書(shū)科學(xué)樓12號(hào)樓218實(shí)驗(yàn)室完成，分析測(cè)定在曹光彪科技樓212實(shí)驗(yàn)室。</p><p>　　2.2 試驗(yàn)用魚(yú)及餌料</p><p>　　取自寧波大學(xué)魚(yú)類(lèi)試驗(yàn)場(chǎng)人工繁育的萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)，魚(yú)體規(guī)格4cm～6cm。選擇體色正常、健壯無(wú)傷、攝食正常、大小均勻的幼魚(yú)54尾用于試驗(yàn)。飼料用北京三友創(chuàng)美飼料科技有限公司生產(chǎn)的“

74、神彩”浮性細(xì)顆粒，蛋白質(zhì)含量大于40％，粒徑65x25.6μm，平均粒重2.1mg。</p><p><b>　　2.3 試驗(yàn)條件</b></p><p>　　實(shí)驗(yàn)用水為去氯自來(lái)水，接取自來(lái)水于容器中，加入硫代硫酸鈉，充分曝氣放置備用。養(yǎng)魚(yú)系統(tǒng)中一次性加入足量處理好的水，根據(jù)水的蒸發(fā)情況及時(shí)補(bǔ)充。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間用空調(diào)保持室內(nèi)恒溫，水溫保持在26～27℃。</p&g

75、t;<p>　　2.4 試驗(yàn)儀器設(shè)備</p><p>　　實(shí)驗(yàn)在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)魚(yú)系統(tǒng)中完成，該系統(tǒng)由培養(yǎng)水槽、可調(diào)式恒流供水系統(tǒng)和循環(huán)水處理系統(tǒng)三部分構(gòu)成。</p><p>　　EL104電子天平一臺(tái)，722型680nm分光光度計(jì)，電子天平，脂肪測(cè)定儀，定氮儀。</p><p><b>　　2.5 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)</b></p>

76、;<p>　　本實(shí)驗(yàn)分2個(gè)試驗(yàn)組，共9個(gè)飼養(yǎng)槽，每缸6尾魚(yú)。一組為對(duì)照組（2個(gè)槽），進(jìn)行正常投喂，分別在第一天和最后一天取樣解剖。另一組為饑餓組（7個(gè)槽），分別在連續(xù)饑餓3d、6d、9d、15d、21d、35d時(shí)取樣。</p><p><b>　　2.6 實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將體色正常、健壯無(wú)傷、攝食正常、大小均勻、健康活潑

77、的實(shí)驗(yàn)幼魚(yú)，每槽6尾隨機(jī)置于培養(yǎng)水槽內(nèi)適應(yīng)一周，正常投喂。為確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，防止魚(yú)受驚嚇，實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)水槽四周遮光，盡量做到每個(gè)實(shí)驗(yàn)缸的條件基本相同。</p><p>　　攝食正常后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，饑餓組始終不投餌，對(duì)照組每天8：00、13：30和18：30分三次投喂，每次投喂量以30min內(nèi)吃完為原則，每天記錄總投喂量。根據(jù)以上分組情況，按設(shè)計(jì)要求投喂。每天吸污2次，分別為早上9點(diǎn)和晚上9點(diǎn)半。</p>

78、<p>　　對(duì)照組在第一天隨機(jī)選取6尾魚(yú)，用電子天平逐一每尾稱(chēng)重（精確至0.01g）。解剖后分別測(cè)定每條魚(yú)的肝重、體長(zhǎng)、空殼重，并取肝和腸（沖洗干凈并吸干），及時(shí)在-20℃溫度下冰凍，以備測(cè)定消化酶活性和體成分。</p><p>　　在饑餓實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行至3d，6d，9d，15d，21d，35d時(shí)，隨機(jī)取6條魚(yú)進(jìn)行解剖測(cè)定，并保存樣品。在饑餓實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，分別測(cè)定對(duì)照組和饑餓組的消化酶活性和體成分。</

79、p><p>　　2.7 體成分的測(cè)定</p><p>　?。?）水分的測(cè)定：烘箱干燥法，3個(gè)平行。準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量的魚(yú)肌肉組織，用表面皿放入烘箱中，80-90℃，隔2小時(shí)測(cè)定一次，直到恒重。</p><p>　?。?）粗脂肪的測(cè)定：采用索氏抽提法。加乙醚到提取瓶?jī)?nèi)約容積1/2～2/3，加樣，70℃～80℃恒溫水浴加熱，抽提16h至抽提管內(nèi)無(wú)乙醚，回餾一次，再蒸餾，倒出乙醚

80、，直到提取瓶中乙醚完全蒸干。稱(chēng)重，計(jì)算。3個(gè)平行。</p><p>　　（3）粗蛋白的測(cè)定：凱氏定氮法(改進(jìn)型凱氏定氮儀)。進(jìn)過(guò)樣品處理→消化→蒸餾→滴定→計(jì)算等過(guò)程。3個(gè)平行</p><p>　　2.8 消化酶的測(cè)定</p><p>　?。?）酶液的制備：迅速取出樣品，稱(chēng)取特定質(zhì)量的樣品，組織勻漿后，在4 ℃、4000 r/min 下離心30 min，取上清液，分

81、別測(cè)定蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性。</p><p>　?。?） 消化酶活性的測(cè)定：蛋白酶活性測(cè)定采用福林－酚試劑法，淀粉酶活性測(cè)定采用淀粉－碘顯色法測(cè)定，脂肪酶活性測(cè)定采用聚乙烯醇橄欖油乳化液水解法。每樣品重復(fù)測(cè)定3 次，取出其平均值。本實(shí)驗(yàn)采用南京建成生物試劑公司制的消化酶測(cè)定試劑盒。</p><p>　　2.9 數(shù)據(jù)分析和主要計(jì)算公式</p><p>　　2.

82、9.1 數(shù)據(jù)分析</p><p>　　所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用Excel、SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。圖表利用Excel制作，試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X ±SD) 表示，用SPSS13. 0 軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，采用單因素方差分析，用LSD 法進(jìn)行多重比較， P < 0. 05 為差異顯著， P < 0. 01 為差異極顯著。</p><p>　　2.9.2

83、主要計(jì)算公式</p><p>　　消化酶計(jì)算公式參照南京建成生物試劑公司制的消化酶測(cè)定試劑盒。</p><p>　　比肝重＝100×肝臟重量/空殼體重</p><p>　　肥滿度＝100×W/ L 3 式中 W為體重，L為體長(zhǎng) </p><p>　　水分含量（%）=（樣品重量－烘干物質(zhì)質(zhì)量）/樣品重量×

84、100%</p><p>　　蛋白質(zhì)測(cè)定：c（HCl）=m×1000/(V×M(1/2Na2B4O7﹒10H2O))</p><p>　　m=c(A-B) ×14.008×100/(5×1000)</p><p><b>　　m:樣品含氮的質(zhì)量</b></p><p>　

85、　A:滴定樣品消耗的HCl溶液體積(ml)</p><p>　　B:滴定空白消耗的HCl溶液體積(ml)</p><p>　　14.008:氮原子的摩爾質(zhì)量(g/mol)</p><p>　　5:反應(yīng)中加入測(cè)定樣品的體積(ml)</p><p>　　c:鹽酸摩爾濃度(mol/L)</p><p>　　100:100ml

86、樣品</p><p>　　1000：ml與L單位換算</p><p>　　脂肪測(cè)定：脂肪含量（%）=（W1-W0）/W×100%</p><p>　　W1：烘干后脂肪和抽提鋼筒的質(zhì)量（g）</p><p>　　W0：烘干后空抽提鋼筒的質(zhì)量（g）</p><p><b>　　W：組織干重</b&

87、gt;</p><p><b>　　3結(jié)果</b></p><p>　　3.1 饑餓脅迫下肥滿度及比肝重的變化</p><p>　　饑餓不同時(shí)間下的比肝重、肥滿度指數(shù)變化情況見(jiàn)表1，各階段的變化幅度見(jiàn)圖1。由表1和圖1中可見(jiàn)，比肝重和肥滿度隨饑餓時(shí)間延長(zhǎng)均有所下降，比肝重在0～3d下降顯著，幅度達(dá)31.6%，在3～6d下降趨緩，下降幅度為12.

88、8%，由表1可知，3d～9d，兩項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組0d有顯著差異（P<0.05）。15d～35d各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著差異。由圖1可知，0～9d比肝重的下降幅度大于肥滿度的下降幅度。</p><p>　　表1比肝重和肥滿度的形態(tài)指標(biāo)</p><p>　　Tab.1 Form index of liver weight ratio and fatness</p><p>　

89、　圖1 比肝重和肥滿度的降幅值(100%)</p><p>　　Fig.1 Liver weight and fat than the full scale of the decline in value(100%)</p><p>　　3.2 饑餓脅迫下的體成分的變化</p><p>　　3.2.1 饑餓脅迫下肌肉水分含量的變化</p><p&

90、gt;　　測(cè)定35d連續(xù)饑餓條件下萍鄉(xiāng)肉紅鯽肌肉中水分含量的變化見(jiàn)圖2，圖2結(jié)果表明，隨著饑餓時(shí)間的延長(zhǎng)，萍鄉(xiāng)肉紅鯽體內(nèi)的水分百分含量不斷增加（P>0.05）。0～3d，水分含量減少了0.5%。3～9d水分含量上升幅度最大，上升幅度為1.73%。</p><p>　　圖2 水分含量(100%)</p><p>　　Fig.1 Moisture content （100%）</p

91、><p>　　3.2.2 饑餓脅迫下蛋白質(zhì)含量的變化</p><p>　　測(cè)定35d連續(xù)饑餓條件下萍鄉(xiāng)肉紅鯽肌肉中蛋白質(zhì)含量的變化（圖3），圖3實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，饑餓組數(shù)據(jù)差異不顯著(P>0.05)。</p><p>　　圖3 蛋白質(zhì)含量(100%)</p><p>　　Fig.3 Protein content(100%)<

92、;/p><p>　　3.2.3 饑餓脅迫下脂肪含量的變化</p><p>　　圖4 脂肪含量(100%)</p><p>　　Fig.4 Fat content(100%)</p><p>　　3.3 饑餓脅迫下消化酶的變化</p><p>　　3.3.1 胃蛋白酶活性變化</p><p>　　饑餓

93、期間萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)胃蛋白酶的活性變化見(jiàn)圖5。由圖5可見(jiàn)，對(duì)照組個(gè)體的胃蛋白酶活性為17.75U，饑餓后呈下降的趨勢(shì)。饑餓3 d 后，蛋白酶活性明顯下降，降幅為42.2%與對(duì)照組差異顯著(P <0.05)；饑餓6d 后，蛋白酶活性繼續(xù)下降至5.45U，并與饑餓3 d 組差異顯著(P <0.05)；6d后，蛋白酶活性呈現(xiàn)波動(dòng)變化，平均值為5.23U。</p><p><b>　　圖5胃蛋白酶活力

94、</b></p><p>　　Fig.5 Pepsin activity</p><p>　　3.3.2 饑餓脅迫下淀粉酶活性變化</p><p>　　饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽淀粉酶活性的影響見(jiàn)圖6。在饑餓期間，淀粉酶的活性隨著饑餓時(shí)間增加而下降。饑餓3d ～9d，淀粉酶的活性顯著下降；饑餓9 d后，淀粉酶活性仍下降顯著；饑餓27d后，淀粉酶的活性與饑餓21d

95、仍差異顯著(P <0.05)；隨著饑餓程度的進(jìn)一步增加，各部位淀粉酶活性均有所下降，但差異已不顯著。結(jié)果表明，饑餓開(kāi)始階段( 饑餓3d、6 d) 淀粉酶活性下降明顯，但隨著饑餓程度的進(jìn)一步增加，下降幅度減小。饑餓過(guò)程中有部分時(shí)間（饑餓9d）淀粉酶活性反彈，后又繼續(xù)下降。</p><p><b>　　圖6淀粉酶的活力</b></p><p>　　Fig.6 Amy

96、lase activity</p><p>　　3.3.3 饑餓脅迫下脂肪酶活性變化</p><p>　　饑餓過(guò)程中脂肪酶活性呈下降的趨勢(shì)(圖7)。饑餓3 d 后，脂肪酶活性下降明顯，與對(duì)照組存在顯著差異(P <0.05)；饑餓6 d 后，脂肪酶活性繼續(xù)下降，與饑餓3d 組差異顯著(P <0.05)；饑餓9 d 后，脂肪酶的活性仍然下降，且與饑餓6 d 組差異顯著(P <

97、0.05)；隨著饑餓的進(jìn)一步增加，脂肪酶活性下降幅度減小。可見(jiàn)，饑餓前期( 饑餓3 d、6 d、9d) 脂肪酶活性變化比較大，而饑餓后期變化較小。</p><p><b>　　圖7 脂肪酶活力</b></p><p>　　Fig.7 Lipase activity</p><p><b>　　4討論</b></p&g

98、t;<p>　　4.1 饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽的體成分的影響</p><p>　　饑餓期間魚(yú)類(lèi)為了維持自身的生命活動(dòng)，必須動(dòng)用身體內(nèi)的儲(chǔ)存物質(zhì)，而作為主要儲(chǔ)能物質(zhì)的脂肪和蛋白質(zhì)必然會(huì)被不同程度的消耗。不同的魚(yú)類(lèi)由于生活方式和體成分的差異， 對(duì)饑餓的適應(yīng)調(diào)節(jié)有所不同。有研究表明，魚(yú)類(lèi)在饑餓過(guò)程中一般主要消耗脂肪和糖原， 對(duì)蛋白質(zhì)的利用較少，而且大都是在脂肪被大量消耗之后[11]。但也有一些魚(yú)類(lèi)在饑餓期間首先

99、消耗蛋白質(zhì)， Weatherley等[2]研究發(fā)現(xiàn)鮭鱒類(lèi)饑餓時(shí)發(fā)現(xiàn)，鮭鱒類(lèi)先利用蛋白質(zhì)作為能源物質(zhì)， 然后再利用脂肪。還有一些魚(yú)類(lèi)在不同的環(huán)境條件下利用身體的不同儲(chǔ)能物質(zhì)， Mehner等[3]報(bào)道河鱸( Perca f luviatilis)幼魚(yú)饑餓后，在15 ℃時(shí)主要利用蛋白質(zhì)作為能源， 而在20 ℃時(shí)主要是利用糖原作為能源。同時(shí)， 在饑餓過(guò)程中， 由于魚(yú)體通過(guò)分解自身的貯能物質(zhì)提供能量， 機(jī)體內(nèi)有機(jī)物含量減少，水分和灰分含量則相應(yīng)

100、升高。</p><p>　　本研究中，饑餓3～9d，比肝重和肥滿度下降很快，第9 d時(shí)比對(duì)照組分別下降了46.3%和26.3%，說(shuō)明在饑餓狀態(tài)下大量的有機(jī)物質(zhì)被消耗。比肝重下降最快的是在饑餓至第9 d時(shí)比對(duì)照組下降了近一半， 這一方面表明肝臟是萍鄉(xiāng)肉紅鯽的重要能源物質(zhì)儲(chǔ)存器官，而肝臟恰恰儲(chǔ)存糖原的場(chǎng)所，提示了萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)能較好地利用體內(nèi)的糖類(lèi)作為能源物質(zhì)。</p><p>　　在饑餓前期

101、萍鄉(xiāng)肉紅鯽體內(nèi)粗脂肪百分含量迅速降低， 而粗蛋白降低不明顯。饑餓后期粗脂肪百分含量下降幅度減小， 粗蛋白下降幅度依舊不明顯，但仍有下降趨勢(shì)。這表明萍鄉(xiāng)肉紅鯽幼魚(yú)在饑餓期間首先利用脂肪作為能量來(lái)源， 當(dāng)脂肪消耗到一定程度時(shí)再利用蛋白質(zhì)作為能源。饑餓的過(guò)程中，水分的比例不斷增加，由對(duì)照組的76.4%上升至饑餓35d的78.2%，變化較顯著。</p><p>　　從動(dòng)用的程度來(lái)說(shuō)，幼魚(yú)最早大量動(dòng)用的脂肪，然后是蛋白質(zhì)，

102、 這與紅大麻哈魚(yú)( Oncorhychusnerka) 等多數(shù)魚(yú)類(lèi)的情況相似[17]。從蛋白質(zhì)、脂肪代謝提供的能量來(lái)看，表明該種魚(yú)在饑餓初期階段(0～9d) ，主要靠脂肪代謝供能，隨著饑餓時(shí)間延長(zhǎng)（9～35d）， 先增加對(duì)脂肪的利用， 然后再利用蛋白質(zhì)和脂肪作為主要能源物質(zhì)，以提供維持生命所需的能量，體現(xiàn)了萍鄉(xiāng)肉紅鯽對(duì)饑餓的耐受力和適應(yīng)特征。從比肝重的變化可以看出， 萍鄉(xiāng)肉紅鯽在饑餓過(guò)程中，大量利用肝內(nèi)的物質(zhì)。在蛋白質(zhì)、和脂肪被用作能源

103、而含量下降的同時(shí)，水分相對(duì)含量逐漸上升。</p><p>　　4.2 饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽的消化酶生理的影響</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)中，對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽的消化酶活性變化的研究，發(fā)現(xiàn)共同的規(guī)律。饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性均產(chǎn)生影響。隨著饑餓時(shí)間的延長(zhǎng)，3種消化酶的活性均不斷下降，在饑餓初期（0～9d），消化酶活性下降幅度較大，當(dāng)消化酶的活性下降到一定程度，饑餓繼續(xù)加深時(shí)，消化酶

104、活性下降不明顯。在其他一些魚(yú)類(lèi)的研究中也有相似的發(fā)現(xiàn)。</p><p>　　Munilla-Moran [3]發(fā)現(xiàn)饑餓對(duì)大菱鲆的消化功能產(chǎn)生影響，未攝食的大菱鲆的消化酶活性比攝食的要低。錢(qián)云霞[1]對(duì)養(yǎng)殖鱸(Laterolibrax japonicus) 的研究發(fā)現(xiàn)，饑餓使各部位蛋白酶活性均有所下降。其原因可能是饑餓期間消化道沒(méi)有食物蠕動(dòng)的機(jī)械刺激，因而消化酶的分泌量下降。另外，食物通過(guò)嗅覺(jué)、視覺(jué)等感覺(jué)器官影響中

105、樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)消化腺分泌的控制，在饑餓的情況下，魚(yú)類(lèi)感覺(jué)器官的刺激作用不復(fù)存在，從而降低了消化酶的分泌。也有學(xué)者的研究結(jié)果與本研究結(jié)果不盡相同。王燕妮等[17]發(fā)現(xiàn)，饑餓后鯉的淀粉酶活性會(huì)大幅上升。鄭曙明等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在饑餓時(shí)間較短時(shí)虎鯊淀粉酶活性下降，然而當(dāng)饑餓時(shí)間持續(xù)增加后，其活性則迅速上升。這表明魚(yú)類(lèi)由于饑餓，消化道中沒(méi)有食物刺激和誘導(dǎo)，可能使其消化液和消化酶的分泌下降甚至停止，即饑餓導(dǎo)致消化酶的活性下降。</p>

106、<p>　　本實(shí)驗(yàn)中，長(zhǎng)時(shí)間饑餓（超過(guò)15d）對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽的攝食等會(huì)產(chǎn)生影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)存活的魚(yú)進(jìn)行再投喂觀察，發(fā)現(xiàn)饑餓35d后的萍鄉(xiāng)肉紅鯽食欲很低，即使投喂饑餓前十分喜食的餌料，其攝食量也很少，需通過(guò)兩個(gè)星期左右的正常投喂，才能慢慢恢復(fù)正常。這可能是由于饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽的消化道組織結(jié)構(gòu)產(chǎn)生的損傷，需要時(shí)間進(jìn)行修復(fù)。</p><p>　　高露姣等[13]研究發(fā)現(xiàn)，饑餓7d 時(shí)，施氏鱘十二指腸、胃

107、、肝胰臟的消化酶活性均有較大幅度的下降，繼續(xù)饑餓后，有部分酶活性出現(xiàn)不同程度的反彈。他們認(rèn)為這可能是由以下機(jī)制引起的：魚(yú)類(lèi)在饑餓時(shí)，代謝發(fā)生適應(yīng)性變化，通過(guò)提高身體各種酶的活性，以達(dá)到積極利用體內(nèi)的儲(chǔ)存物質(zhì)以維持生命的目的，是對(duì)饑餓的應(yīng)激適應(yīng)。</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)中，淀粉酶也出現(xiàn)了反彈現(xiàn)象，但反彈差異性不顯著。饑餓后期，其他酶的活性也出現(xiàn)一些不顯著的反彈，總體屬于下降趨勢(shì)。這是魚(yú)體對(duì)長(zhǎng)時(shí)間的饑餓的特殊反應(yīng)

108、。專(zhuān)家有如下解釋?zhuān)呼~(yú)類(lèi)在饑餓時(shí)，代謝發(fā)生適應(yīng)性變化，通過(guò)提高身體各種酶的活性，以達(dá)到積極利用體內(nèi)的儲(chǔ)存物質(zhì)以維持生命的目的，是對(duì)饑餓的應(yīng)激適應(yīng)。</p><p>　　因此，在萍鄉(xiāng)肉紅鯽養(yǎng)殖過(guò)程中，應(yīng)盡量的減少饑餓的發(fā)生，進(jìn)行科學(xué)投喂，以保證萍鄉(xiāng)肉紅鯽的正常攝食、消化和生長(zhǎng)，提高萍鄉(xiāng)肉紅鯽對(duì)飼料的利用率，提高萍鄉(xiāng)肉紅鯽養(yǎng)殖效益。</p><p>　　4.3 饑餓對(duì)萍鄉(xiāng)肉紅鯽肥滿度和比肝重的影

109、響</p><p>　　肝臟是魚(yú)類(lèi)中間代謝的主要器官，在糖類(lèi)、脂類(lèi)、蛋白質(zhì)和維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝中發(fā)揮著重要的作用同時(shí)還是魚(yú)類(lèi)重要的營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)存器官，在營(yíng)養(yǎng)變動(dòng)(如營(yíng)養(yǎng)不良或營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩)時(shí)，肝臟重量會(huì)發(fā)生顯著的變化[29]。在饑餓條件下，作為營(yíng)養(yǎng)貯藏所的肝臟重量有明顯下降，功能也受到明顯的影響，因而可以配合比肝重作為魚(yú)類(lèi)饑餓的判斷標(biāo)準(zhǔn)，來(lái)很好地了解魚(yú)體的營(yíng)養(yǎng)狀況。所以說(shuō)魚(yú)類(lèi)的比肝重是對(duì)長(zhǎng)期和短期營(yíng)養(yǎng)方式都很敏感的指標(biāo)

110、[30]。樓寶等[31]研究饑餓對(duì)日本黃姑魚(yú)代謝率和消化器官組織學(xué)影響的時(shí)候發(fā)現(xiàn)，肝胰臟會(huì)隨著饑餓時(shí)間的延長(zhǎng)出現(xiàn)不同程度的損傷。</p><p>　　本研究發(fā)現(xiàn)，萍鄉(xiāng)肉紅鯽的比肝重在饑餓狀態(tài)下逐步下降，饑餓強(qiáng)度對(duì)比肝重具有極顯著影響（P<0.01）。這與養(yǎng)殖鱸的研究結(jié)果相似，在饑餓0～9d時(shí)比肝重顯著下降，以后變化不顯著[1]。</p><p>　　關(guān)于魚(yú)類(lèi)饑餓過(guò)程中肥滿度和比肝重變

111、化的報(bào)道甚少。張為民等[32]研究了饑餓狀態(tài)下草魚(yú)肥滿度系數(shù)的變化，發(fā)現(xiàn)草魚(yú)饑餓降低了草魚(yú)種的肥滿度系數(shù)，在饑餓15d后，其肥滿度系數(shù)顯著低于一直投喂的對(duì)照組草魚(yú)種；該結(jié)果與虹鱒的情況類(lèi)似，饑餓也降低其體重，但肥滿度系數(shù)下降才是其饑餓最明顯的指標(biāo)。這可能是因?yàn)榉蕽M度系數(shù)變化同時(shí)涉及到體長(zhǎng)和體重兩個(gè)因素，因而它能更好地反映魚(yú)類(lèi)的饑餓狀態(tài)。</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)中，萍鄉(xiāng)肉紅鯽的肥滿度系數(shù)整體呈下降趨勢(shì)，饑餓結(jié)束