浙江樹人大學(xué)生物與環(huán)境工程學(xué)院應(yīng)用化學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文

1、<p>　　畢 業(yè) 論 文</p><p>　　題 目 鹽酸普萘洛爾含量的HPLC測(cè)定研究 </p><p>　　專 業(yè) 應(yīng)用化學(xué)　 </p><p>　　班 級(jí) </p>&

2、lt;p>　　姓 名 </p><p>　　指導(dǎo)教師 (教授) 　</p><p>　　所在學(xué)院 生物與環(huán)境工程學(xué)院　 </p><p>　　完成時(shí)間：20XX年 6月</p><p>

3、;　　鹽酸普萘洛爾含量的HPLC測(cè)定研究</p><p>　　生物與環(huán)境工程學(xué)院應(yīng)用化學(xué)專業(yè) </p><p>　　摘 要 ：本文采用高校液相測(cè)定了鹽酸普萘洛爾片中鹽酸普萘洛爾的含量，固定相為：安捷倫c18(4．6 mill X 250 mm，5urn)，甲醇一醋酸鈉緩沖溶液pH=5.51(70：30)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為290nm；結(jié)果鹽酸普萘洛爾在25～125ug/ml范圍內(nèi)呈現(xiàn)良

4、好的線性關(guān)系，r=0.9998鹽酸普萘洛爾的平均回收率為94.05％，RSD為0.14％(n=9)；此方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于鹽酸普萘洛爾片中鹽酸普萘 洛爾的含量測(cè)定。 </p><p>　　關(guān)鍵詞 高效液相色譜法；鹽酸普萘洛爾；含量</p><p>　　Determination of</p><p>　　Propranolol Hydrochloride

5、 Tablets by HPLC</p><p>　　Abstract: To establish a HPLC method for determination the content of propranolol hydrochloride tablets .Method :Diamonsil C18 column (4.6mm ×150mm ,5 um), was used,the methano

6、l-Sodium acetate solution pH=5.51(70:30) as mobile phase, the flow rate was 1.0 ml· min-1 , the detection wave length was 290 nm. Result :The method showed a good linear relationship within the range of 25~125ug/mL,

7、r=0.9998,the average recovery was 94.05%with RSD0.14％(ｎ=9).Conclusion :the method is simple ,rapid ,reliable </p><p>　　Key words: HPLC ; Propranolol hydrochloride ;Determination </p><p><b>

8、;　　目 錄</b></p><p><b>　　1 引 言5</b></p><p>　　1.1 本課題研究的背景5</p><p>　　2 研究?jī)?nèi)容錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.1 儀器和藥品錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)

9、程錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.2.1 流動(dòng)相的選擇試驗(yàn)錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.2.2 色譜條件錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.2.3 溶液配制錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.2.1 流動(dòng)相的選擇試驗(yàn)錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.

10、3 方法與結(jié)論錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.3.2 精密度和重復(fù)性試驗(yàn)錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.3.4 加樣回收率試驗(yàn)錯(cuò)誤!未定義書簽。</p>&l

11、t;p>　　2.3.5 樣品含量測(cè)定錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.3.6 有關(guān)物質(zhì)的檢查方法錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　2.3.7 分離專屬性錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p>　　3 試驗(yàn)結(jié)果與討論</p><p>　　3.1 試驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p&

12、gt;　　3.2 討論錯(cuò)誤!未定義書簽。</p><p><b>　　致謝15</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn)16</b></p><p><b>　　1 引 言</b></p><p>　　1.1 本課題研究的背景</p><p

13、>　　一項(xiàng)有關(guān)亞洲心血管疾病治療的研究結(jié)果顯示，亞洲一半以上的心血管疾病患者，因不能按時(shí)定量服藥而未實(shí)現(xiàn)療效。2009年亞太心血管峰會(huì)19日在北京召開，會(huì)上首次公布了泛亞高膽固醇血癥治療情況研究（CEPHEUS）的研究結(jié)果。CEPHEUS是由亞洲頂級(jí)心血管專家進(jìn)行的一項(xiàng)科學(xué)研究，旨在調(diào)查高膽固醇血癥（血液膽固醇含量高）的治療情況。而血液膽固醇含量升高是導(dǎo)致心血管疾病的主要危險(xiǎn)因素。研究人員對(duì)逾7千名心血管疾病患者和醫(yī)生進(jìn)行調(diào)查，結(jié)

14、果顯示患者當(dāng)中44．1%偶有忘記吃藥的情況，四分之一的患者認(rèn)為忘記吃藥并不會(huì)影響治療。而參與研究的醫(yī)學(xué)教授則表示，治療心血管疾病最好的方法就是遵醫(yī)囑服藥，而患者沒(méi)有認(rèn)識(shí)到這一點(diǎn)。研究還指出，改變生活方式也是降低膽固醇，治療心血管疾病行之有效的方法。醫(yī)學(xué)專家認(rèn)為，亞太地區(qū)生活方式最嚴(yán)重的問(wèn)題是吸煙，中國(guó)尤其如此。中國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布的《2007年中國(guó)控制吸煙報(bào)告》指出，中國(guó)約有3．5億吸煙者，每年死于吸煙相關(guān)疾病的人數(shù)近100萬(wàn)。世界衛(wèi)生組織2

15、004年全球疾病負(fù)擔(dān)報(bào)告指出，心血管疾病是全球頭號(hào)殺手，2004年全球有17000萬(wàn)人死于心血管疾病，</p><p>　　到2030年之前，死亡人數(shù)預(yù)計(jì)超過(guò)兩千三百萬(wàn)。</p><p>　　普酸普萘洛爾是B-受體阻斷藥，應(yīng)用于心絞痛、高血壓、心律失常等的治療。鹽酸普萘洛爾片含量測(cè)定方法有紫外分光光度法、二階導(dǎo)數(shù)分光光度法、高效液相色譜法，本文采用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸普萘洛爾片的含量，方

16、法簡(jiǎn)單、快速，結(jié)果可靠。</p><p>　　鹽酸普蔡洛爾，其化學(xué)名稱為異丙氨基萘氧基丙醇鹽酸鹽。分子式：C16H21NO2·HCl ，分子量：295.81。鹽酸普萘洛爾的主要藥理作用：1 用于治療心絞痛；2 用于治療高血壓；3 競(jìng)爭(zhēng)性拮抗異丙腎上腺素和去甲腎上腺素的作用，阻斷β2受體，降低血漿腎素活性。抑制胰島素分泌，使血糖升高，掩蓋低血糖癥狀，延遲低血糖的恢復(fù)。4 有明顯的抗血小板聚集作用，這主要與

17、藥物的膜穩(wěn)定作用及抑制血小板膜Ca2+ 轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。</p><p><b>　　2 研究?jī)?nèi)容</b></p><p>　　2.1 儀器和藥品</p><p>　　高效液相色譜系統(tǒng)：Varian9012三元泵、9050紫外可見(jiàn)檢測(cè)器、Star5.31數(shù)據(jù)處理工作站、Varian Cary100 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、鹽酸普萘洛爾對(duì)照品由食品藥品

18、監(jiān)督局提供（含量為99.9%）；鹽酸普萘洛爾片為市售藥品；甲醇為色譜純；醋酸鈉為分析純。</p><p><b>　　2.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程</b></p><p>　　2.2.1 流動(dòng)相的選擇試驗(yàn)</p><p>　　運(yùn)用不同比例的流動(dòng)相：(1)、甲醇-水；(2)、乙腈-水；(3)、丙酮-水；(4)、甲醇-0.05 mol/L醋酸鈉溶液用醋酸調(diào)

19、pH為4.0；(5)、甲醇-0.05 mol/L醋酸鈉溶液用醋酸調(diào)pH為6.0；(6)、甲醇-0.05 mol/L醋酸鈉溶液用醋酸調(diào)pH為7.0；(7)、甲醇-0.02 mol/L醋酸鈉溶液用醋酸調(diào)pH為6.01；(8)、甲醇-0.02 mol/L醋酸鈉溶液用醋酸調(diào)pH為6.48；(9)、甲醇-0.02 mol/L醋酸鈉溶液用醋酸調(diào)pH為5.51；進(jìn)行峰型、保留時(shí)間、理論塔板數(shù)、拖尾因子等因數(shù)的比較，結(jié)果表明，甲醇-0.02 mol/L

20、醋酸鈉溶液pH為5.51（70:30）為佳，分離度好，分析時(shí)間不長(zhǎng)，出峰時(shí)間約為8 min。但在其他的流動(dòng)相比例時(shí)：有的峰型出現(xiàn)拖尾的現(xiàn)象比較嚴(yán)重，有的出峰時(shí)間太早的情況，使得甲醇-0.02mol/L醋酸鈉比例在（70:30）最為合適。</p><p>　　2.2.2 色譜條件</p><p>　　色譜柱：C18（250mm×4.6mm）；流動(dòng)相：甲醇-0.02 mol/L醋酸

21、鈉溶液用醋酸調(diào)pH為5.51（70:30）；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm；進(jìn)樣量：20ul。鹽酸普萘洛爾峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求。</p><p><b>　　A對(duì)照品</b></p><p><b>　　B樣品</b></p><p><b>　　圖1HPLC色譜圖</b>&

22、lt;/p><p>　　2.2.3 溶液配制</p><p>　　對(duì)照品溶液的配制：取鹽酸普萘洛爾片對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml中約含鹽酸普萘洛爾100ug的溶液，溶液經(jīng)0.45um濾膜濾過(guò)。</p><p>　　供試品溶液的配制：精密量取樣品適量，加甲醇稀釋制成每1ml中約含鹽酸普萘洛爾100ug的溶液，溶液經(jīng)0.45um濾膜濾過(guò)。</p>

23、<p>　　2.3 方法與結(jié)論</p><p>　　2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備</p><p>　　取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品10mg，精密稱定置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.25ml,0.5ml,0.75ml,1.0ml,1.25ml置10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um濾膜濾過(guò)，進(jìn)樣。結(jié)果表明，鹽

24、酸普萘洛爾在25～125ug/ml濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=24.994x+25.412 ，R2=09996，結(jié)果見(jiàn)圖1。</p><p>　　圖2鹽酸普萘洛爾標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　2.3.2 精密度和重復(fù)性試驗(yàn)</p><p>　　取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品儲(chǔ)備液1ml置10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，用0.45um濾膜濾過(guò)連續(xù)

25、進(jìn)樣3次，測(cè)得峰面積，計(jì)算RSD為0.03%。取鹽酸普萘洛爾供試品100ug/ml的溶液，連續(xù)進(jìn)樣3次按外標(biāo)法計(jì)算，其平均含量為93.44%，RSD為1.33%。</p><p>　　2.3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)</p><p>　　取鹽酸普萘洛爾片1片（約相當(dāng)于鹽酸普萘洛爾10mg），置于50ml燒杯中，加甲醇溶解完全后轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶中，淋洗燒杯3次，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45u

26、m濾膜濾過(guò)。分別在1,4,8,12,24小時(shí)測(cè)定，記錄峰面積，RSD為0.53%。</p><p>　　組分名 保留時(shí)間(min) 峰高(mV) 峰面積(mV.sec) 濃 度 樣品含量(%) </p><p>　　Unknown 7.73000 84.19 2722.04 0.0000 0.0000 </p>

27、;<p><b>　　圖3-1小時(shí)后</b></p><p>　　組分名 保留時(shí)間(min) 峰高(mV) 峰面積(mV.sec) 濃 度 樣品含量(%) </p><p>　　Unknown 7.79667 84.61 2722.27 0.0000 0.0000 </p>

28、<p><b>　　圖4-4小時(shí)后</b></p><p>　　組分名 保留時(shí)間(min) 峰高(mV) 峰面積(mV.sec) 濃 度 樣品含量(%) </p><p>　　Unknown 7.79750 85.26 2720.27 0.0000 100.0000 </p>

29、<p><b>　　圖5-8小時(shí)后</b></p><p>　　組分名 保留時(shí)間(min) 峰高(mV) 峰面積(mV.sec) 濃 度 樣品含量(%) </p><p>　　Unknown 7.70000 88.41 2721.63 0.0000 0.0000</p><

30、p><b>　　圖6-12小時(shí)后</b></p><p>　　組分名 保留時(shí)間(min) 峰高(mV) 峰面積(mV.sec) 濃 度 樣品含量(%) </p><p>　　Unknown 7.70083 88.36 2721.74 0.0000 0.0000圖7-24小時(shí)后<

31、/p><p>　　2.3.4 加樣回收率試驗(yàn)</p><p>　　取鹽酸普萘洛爾供試品儲(chǔ)備液0.5ml至10ml容量瓶中，分別加入0.2ml，0.4ml，0.6ml鹽酸普萘洛爾對(duì)照品儲(chǔ)備液，再加入甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.45um濾膜濾過(guò)，再進(jìn)樣。用外標(biāo)法測(cè)定計(jì)算平均回收率為94.05%，RSD為0.14%。結(jié)果見(jiàn)表一。</p><p><b>　　表一回

32、收率測(cè)定結(jié)果</b></p><p>　　2.3.5 樣品含量測(cè)定</p><p>　　精密量取樣品適量，加流動(dòng)相甲醇稀釋制成每1ml中約含鹽酸普萘洛爾100ug的溶液，溶液經(jīng)0.45um濾膜濾過(guò)，濾液作樣品溶液。另取鹽酸普萘洛爾對(duì)照品，加流動(dòng)相甲醇制成100ug/ml的溶液作對(duì)照溶液，按上述色譜條件，分別進(jìn)樣20uL。結(jié)果見(jiàn)表二。</p><p>&

33、lt;b>　　表二樣品含量測(cè)定</b></p><p>　　2.3.6 有關(guān)物質(zhì)的檢查方法</p><p>　　分別精密量取對(duì)照品和供試品的儲(chǔ)備液適量，加流動(dòng)相制成每1mL約相當(dāng)于鹽酸普萘洛爾100ug的溶液。溶液經(jīng)0.45um濾膜濾過(guò)，再取供試品溶液和對(duì)照溶液各20uL,分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的2倍。供試品溶液如顯雜質(zhì)峰，則各雜質(zhì)峰面積之和不得大

34、于對(duì)照溶液主峰面積。</p><p><b>　　圖8-對(duì)照品</b></p><p><b>　　圖9-供試品</b></p><p>　　2.3.7 分離專屬性</p><p>　　精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液適量，加流動(dòng)相制成100ug/mL的溶液，共3份，分別經(jīng)0.1mol/L的酸、堿和1%（體積

35、分?jǐn)?shù)）的過(guò)氧化氫溶液經(jīng)過(guò)60℃恒溫處理2小時(shí)。再取樣測(cè)定，記錄色譜圖。</p><p><b>　　圖10-酸破壞</b></p><p><b>　　圖11-堿破壞</b></p><p>　　圖12-過(guò)氧化氫破壞</p><p>　　2.3.8 最低檢測(cè)限和定量限</p><

36、;p>　　最低檢測(cè)限和定量限分別是基線噪音的3倍峰高和10倍峰高。通過(guò)電腦軟件計(jì)算出基線噪聲為86.21uv，再經(jīng)過(guò)一遍一遍的降低鹽酸普萘洛爾的濃度，進(jìn)樣，獲得色譜峰，計(jì)算，最后得出最低檢測(cè)限為0.1ug/mL濃度的鹽酸普萘洛爾溶液而最低定量限位0.3ug/mL濃度的鹽酸普萘洛爾溶液。</p><p>　　3 試驗(yàn)結(jié)果與討論</p><p><b>　　3.1 試驗(yàn)結(jié)果

37、</b></p><p>　　在有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)中，對(duì)比供試品的色譜峰和對(duì)照品的色譜峰可以發(fā)現(xiàn)兩者的峰型較好，沒(méi)有明顯的雜質(zhì)峰，說(shuō)明了供試品鹽酸普萘洛爾片內(nèi)的雜質(zhì)較少。</p><p>　　在分離專屬性的過(guò)程中，在酸破壞、堿破壞和過(guò)氧化氫破壞的環(huán)境下，鹽酸普萘洛爾的峰型依舊沒(méi)有改變。通過(guò)這一測(cè)試，說(shuō)明鹽酸普萘洛爾的化學(xué)成分很穩(wěn)定。</p><p><

38、b>　　3.2 討論</b></p><p>　　在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，走過(guò)不少的彎路。最初，鹽酸普萘洛爾溶液的配制選擇的溶劑是水，由于在文獻(xiàn)上看到學(xué)者在配制鹽酸普萘洛爾溶液時(shí)有人選擇水做溶劑，也有人選擇流動(dòng)相作為溶劑。經(jīng)過(guò)考慮，在最開始的時(shí)候選擇了水溶解鹽酸普萘洛爾片，但是，發(fā)現(xiàn)峰型非常不好，后來(lái)經(jīng)過(guò)老師的提醒，用流動(dòng)相配制鹽酸普萘洛爾溶液，最終得到較好的峰型。在流動(dòng)相的選擇上，用了不同比例的甲醇

39、-醋酸鈉溶液，以及不同pH值的醋酸鈉溶液，比較了各自的保留時(shí)間和理論塔板數(shù)等因數(shù)，最終選擇甲醇-0.02 mol/L醋酸鈉溶液pH為5.51（70:30）作流動(dòng)相。</p><p><b>　　致謝</b></p><p>　　在本次論文的撰寫中，我得到了李XX教授的精心指導(dǎo)，不管是從開始定方向還是在查資料準(zhǔn)備的過(guò)程中，一直都耐心地給予我指導(dǎo)和意見(jiàn)，使我在總結(jié)學(xué)業(yè)及撰

40、寫論文方面都有了較大提高；同時(shí)也顯示了老師高度的敬業(yè)精神和責(zé)任感。在此，我對(duì)李XX教授表示誠(chéng)摯的感謝以及真心的祝福。 四年大學(xué)生活即將結(jié)束，回顧幾年的歷程，老師們給了我們很多指導(dǎo)和幫助。他們嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)，優(yōu)良的作風(fēng)和敬業(yè)的態(tài)度，為我們樹立了為人師表的典范。在此，我對(duì)所有的生環(huán)學(xué)院的老師表示感謝，祝你們身體健康，工作順利！</p><p>　　最后，對(duì)即將參加論文評(píng)議、評(píng)閱和對(duì)本論文提出寶貴意見(jiàn)的所有專家和老

41、師表示誠(chéng)摯的感謝。</p><p><b>　　2012年5月</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　[1] 沈耀良，王寶貞．廢水生物處理新技術(shù)理論與應(yīng)用[M]．北京：中國(guó)環(huán)境科學(xué)出版社，1999，(04)：33-37．</p><p>　　[2] 李科林．啤酒工

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46、36．</p><p>　　專著、論文集、學(xué)位論文、報(bào)告：</p><p>　?。坌蛱?hào)］ 主要責(zé)任者．文獻(xiàn)題名［文獻(xiàn)類型標(biāo)識(shí)］．出版地：出版者，出版年．起止頁(yè)碼．</p><p><b>　　期刊文章：</b></p><p>　　［序號(hào)］ 主要責(zé)任者．文獻(xiàn)題名［J］．刊名，年，卷(期)： 起止頁(yè)碼．</p>

47、<p><b>　　報(bào)紙文章：</b></p><p>　?。坌蛱?hào)］ 主要責(zé)任者． 文獻(xiàn)題名［N］． 報(bào)紙名，出版日期 (版次)．</p><p><b>　　電子文獻(xiàn)</b></p><p>　?。坌蛱?hào)］ 主要責(zé)任者.電子文獻(xiàn)題名［電子文獻(xiàn)及載體類型標(biāo)識(shí)］.電子文獻(xiàn)的出處或可獲得地址，發(fā)表或更新日期/引用日