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文檔簡介
1、<p><b> 本科畢業(yè)論文系列</b></p><p><b> 開題報告</b></p><p><b> 食品質(zhì)量與安全</b></p><p> 茶樹油在對蝦冷藏保鮮中的應(yīng)用</p><p> 一、選題的背景與意義</p><p
2、> 茶樹油(tea tree oil,TTO)是一種香精油,為一種無色或淺黃色液體,萃取自一類桃金娘科白干層屬植物——茶樹(tea tree,Melaleuca alternifolia),即由新鮮枝葉經(jīng)水蒸氣蒸餾得到。按植物學(xué)上的正確定義,茶樹油它應(yīng)該被稱為互葉白干層油。澳大利亞土著人歷史上就有使用白千層芳香油的習(xí)慣,其具有穩(wěn)定的清爽、肉豆蔻芳香氣味,常用作消炎、防蟲驅(qū)蚊等藥物。18世紀(jì)末茶樹油開始得以初步開發(fā)利用,第二次世界
3、大戰(zhàn)期間,大量的茶樹油作為防腐劑、消毒劑在戰(zhàn)場上使用,開發(fā)了用于治療皮膚病、灼傷、燒傷、槍傷、刀傷和蚊叮蟲咬等藥物,以及日用品和工業(yè)用油等產(chǎn)品。茶樹油是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強有力的天然抗菌劑,也是極具價值和發(fā)展?jié)摿Φ募兲烊恢参锞椭弧?lt;/p><p> 我國水產(chǎn)品總量自1989年以來,已連續(xù)l8年居世界首位。作為世界主要漁業(yè)國中唯一養(yǎng)殖產(chǎn)量超過捕撈產(chǎn)量的國家,我國養(yǎng)殖產(chǎn)量已占到全球養(yǎng)殖產(chǎn)量的70% 。而對蝦生產(chǎn)在
4、此期問也一直穩(wěn)步增長,2008年全球?qū)ξr達(dá)到690萬t以上,其中對蝦養(yǎng)殖量達(dá)到340多萬t。而我國2008年對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量為126萬t,約占全球37% ,居世界首位。我國雖然已成為名副其實的對蝦生產(chǎn)大國,然而卻遠(yuǎn)不是對蝦物流強國。由于我國物流保鮮技術(shù)落后,大部分對蝦以鮮銷的方式進入市場,并且在對蝦保鮮中,主要通過冷凍方式來保藏對蝦,冷凍保藏造成蛋白質(zhì)變性和質(zhì)構(gòu)的破壞,嚴(yán)重影響了對蝦的風(fēng)味,同時在貯運、交易、配送等環(huán)節(jié)中對蝦鮮度下降快、損耗
5、率高等關(guān)鍵技術(shù)還未得到有效解決。這些都與人們對蝦類鮮活及鮮度的需求不相適應(yīng),因此,開發(fā)安全、成本低、貨架壽命長、食品品質(zhì)佳的蝦類保鮮新技術(shù)非常必要。</p><p> 茶樹油殺菌具有高效性,抑制微生物的有效濃度低,故若應(yīng)用茶樹油作為保鮮劑可以降低成本,且天然無害,對食品的安全、健康保藏發(fā)展方向提供正面的力量。目前,茶樹油在水產(chǎn)品中的應(yīng)用未見報道。</p><p> 二、研究的基本內(nèi)容與
6、擬解決的主要問題</p><p><b> 基本內(nèi)容:</b></p><p> 1. 分析茶樹油中的成分組成。</p><p> 2. 研究明確茶樹油對對對蝦優(yōu)勢腐敗菌(假單胞菌、氣單胞菌等)的抑菌效果。</p><p> 3. 分析茶樹油等植物精油的體外抗氧化能力。</p><p>
7、 4. 茶樹油對冷藏對蝦的保鮮作用效果。</p><p> 5. 結(jié)合茶樹油的體外抑菌試驗和抗氧化試驗,闡明茶樹精油在水產(chǎn)品保鮮中的作用機理。</p><p><b> 擬解決的問題:</b></p><p> 1. 茶樹油的體外抑菌能力和抗氧化能力;</p><p> 2. 將茶樹油在水產(chǎn)品保鮮中加以應(yīng)用,并評
8、價其對作用效果。</p><p> 三、研究的方法與技術(shù)路線</p><p><b> 研究方法:</b></p><p> 茶樹精油成分的組成:采用GC-MS分析。 </p><p> 2.研究明確茶樹油對對蝦優(yōu)勢腐敗菌的抑菌效果;</p><p> 體外試驗的方法研究茶樹油對對蝦優(yōu)勢
9、腐敗菌(假單胞菌、氣單胞菌等)的抑制效果,測定其最低抑菌濃度(MIC),分析其抑制中濃度(EC50)。</p><p> 3. 茶樹油的體外抗氧化能力:</p><p> 從總抗氧化力、抗脂質(zhì)過氧化能力及對·OH、DPPH·和SOD·自由基的清除能力方面,綜合考察茶樹精油的體外抗氧化活性。</p><p> 4.茶樹油對冷藏和凍藏
10、水產(chǎn)品的保鮮作用效果:</p><p> 配置不同濃度的茶樹油乳化液,將對蝦等水產(chǎn)品進行浸泡處理,處理后的水產(chǎn)品在0-4℃冷藏,研究其感官品質(zhì)、細(xì)菌總數(shù)、脂質(zhì)氧化、總揮發(fā)性鹽基氮、pH值等的變化。</p><p><b> 技術(shù)路線:</b></p><p> 四、的總體安排與進度:</p><p> 2010年
11、11月 查找資料,撰寫綜述和開題報告。開題答辯。</p><p> 2010年12月 翻譯外文文獻</p><p> 2011年1月 確定實驗方案,準(zhǔn)備材料和實驗儀器</p><p> 2011年2至3月 開展實驗。</p><p> 2011年4月 處理數(shù)據(jù)</p><
12、p> 2011年5月 撰寫畢業(yè)論文,準(zhǔn)備論文答辯</p><p><b> 五、主要參考文獻</b></p><p> 【1】呂 永,何庭玉,陳 珊等.互葉白千層植物精油的研究進展[J].廣東化工,2005,3:38-39.</p><p> 【2】李 娟,李小瑞.茶樹油的性質(zhì)及其應(yīng)用[J].日用化學(xué)工業(yè),2003,33
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23、,劉成梅等.自然條件下乳化茶樹油在香蕉保鮮中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報, 2009,25(06):280-285.</p><p> 【19】朱德明,丁 麗,匡 鈺等. 茶樹油對芭蕉炭疽菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制活性[J].食品研究與開發(fā),2008,29(6):134-137.</p><p> 【20】王 亮,曾名湧.對蝦保鮮技術(shù)研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2009,3
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26、;/p><p><b> 畢業(yè)論文文獻綜述</b></p><p><b> 食品質(zhì)量與安全</b></p><p> 茶樹油在食品保鮮中的應(yīng)用現(xiàn)狀及對蝦保鮮展望</p><p> 摘要 本文介紹了茶樹油及其組成成分,對茶樹油抗菌作用的機理,茶樹油的抗菌作用及其在食品保藏方面的相關(guān)研究進行了綜述
27、。并對蝦的保鮮現(xiàn)狀進行了簡要的分析。 </p><p> 關(guān)鍵詞 茶樹油;化學(xué)成分;抗菌作用;對蝦保鮮 </p><p> 茶樹油(tea tree oil,TTO)是一種香精油,為一種無色或淺黃色液體,萃取自一類桃金娘科白干層屬植物——茶樹(tea tree,Melaleuca alternifolia),即由新鮮枝葉經(jīng)水蒸氣蒸餾得到。按植物學(xué)上的正確定義,茶樹油它應(yīng)該被稱為互葉白干
28、層油。澳大利亞土著人歷史上就有使用白千層芳香油的習(xí)慣,其具有穩(wěn)定的清爽、肉豆蔻芳香氣味,常用作消炎、防蟲驅(qū)蚊等藥物。18世紀(jì)末茶樹油開始得以初步開發(fā)利用,第二次世界大戰(zhàn)期間,大量的茶樹油作為防腐劑、消毒劑在戰(zhàn)場上使用,開發(fā)了用于治療皮膚病、灼傷、燒傷、槍傷、刀傷和蚊叮蟲咬等藥物,以及日用品和工業(yè)用油等產(chǎn)品。茶樹油是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強有力的天然抗菌劑,也是極具價值和發(fā)展?jié)摿Φ募兲烊恢参锞椭弧?lt;/p><p>
29、 1.茶樹油的組成成分</p><p> 茶樹油含有近100種化學(xué)成分,基本上是由50%的單萜烴和50%的單萜烴含氧衍生物組成,另有少量的倍半萜。茶樹油化學(xué)成分的分析都是利用氣相色譜或氣相色譜2質(zhì)譜聯(lián)用法,定量方法一般采用不加校正因子的峰面積歸一法[1]。經(jīng)過現(xiàn)代儀器分析,茶樹油含有萜品油烯-4-醇(1-terpined-一4-0l)、γ-萜品烯(gamma-terpinence)、ρ-甲基異丙基苯(rho-c
30、ymence)、芳樟醇(1inalool)、α-萜品烯(alpha-terpinence)、α-萜品醇(alpha-terpineol)、桉樹腦(1,8-cineole)和萜品油烯(terpino1ene)等8種成分,其中萜品烯-4-醇和7-萜品烯占整個茶樹油比例的50%以上,這些都是茶樹油的物質(zhì)基礎(chǔ)[2]。由于植株的生長條件不同,組分具有不均一性,不同生產(chǎn)批次的精油組成可能存在較大的差異。組成不同必然影響茶樹油的性質(zhì),而且其它種茶樹,
31、如白干層(Cajuput,Melaleuca Cajuputi)、新西蘭纖精澳洲茶樹(Manuka,Leptospermum scoparium)、新西蘭Ti-Tree(Cordyline</p><p> 表一:茶樹油組成標(biāo)準(zhǔn) ISO 4730</p><p> 杜光等[4]采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對海南省引種種植的茶樹提取的茶樹油進行化學(xué)成分研究,分析指出,該茶樹油主要由環(huán)烯烴類和
32、烯醇類化合物組成,其中4-羥基萜烯占茶樹油化合物組成的34.66%。桉葉油素占10.77%。</p><p> 2. 茶樹油的抗菌作用及機理</p><p> 茶樹油的抗菌作用在上世紀(jì)90年代國外就有相關(guān)研究和報道,在1923年澳大利亞技術(shù)和應(yīng)用科學(xué)國家博物館館長,化學(xué)家A.R.Penfold博士就進行了對茶樹油的研究,發(fā)現(xiàn)其殺菌作用比石炭酸強30倍[5]。</p>&l
33、t;p> 2.1 茶樹油抗菌作用機理</p><p> 茶樹油殺菌作用機理的研究目前還處于起步階段,未有完備的方式和方法。茶樹油中含有的脂溶性單萜,如萜品-4-醇、α-萜品醇、芳樟醇、α-蒎烯、1,8-桉葉素等是最有活性的抗菌成分[6]。脂質(zhì)體研究表明[7],萜烯具有破壞和穿透脂結(jié)構(gòu)的能力。芳香烴、萜烯聚集在細(xì)胞膜的脂雙層,影響膜的結(jié)構(gòu)和功能,使膜失去完整性,對質(zhì)子和離子的滲透性增加,造成質(zhì)子動勢消散,
34、由于胞內(nèi)PH改變,造成胞內(nèi)損傷,親脂化合物對嵌入細(xì)胞膜中的膜蛋白脂質(zhì)部分發(fā)生作用,對膜蛋白的作用可能導(dǎo)致脂環(huán)境很大程度的改變、外膜脂多糖的改變、細(xì)胞壁組成的改變[8]。</p><p> Gustafson等[2]研究表明,茶樹油可以刺激大腸埃希菌指數(shù)期和靜止期細(xì)胞自溶。指數(shù)期和靜止期細(xì)胞分別用無菌試管分成兩份,作為測試管和對照管。向兩個測試管中分別加入終濃度為最小殺菌濃度(MBC)(0.25% ,v/v)的茶
35、樹油,試管在37℃振蕩培養(yǎng),4h后測定A600。測試組指數(shù)期細(xì)胞吸光度百分比(與初始值比較)降低63%,對照組僅降低了13.9%。靜止期細(xì)胞吸光度百分比降低了23% ,對照組僅下降10%。測試組細(xì)胞吸光度百分比明顯低于對照組,表明茶樹油的加入增加了細(xì)胞的自溶。茶樹油刺激指數(shù)期細(xì)胞自溶的程度高于靜止期細(xì)胞,而在未加入茶樹油的對照組中靜止期細(xì)胞和指數(shù)期細(xì)胞的自溶速率幾乎沒有差別。Jakub Kwiecinski等[9]連續(xù)24小時觀察,不同
36、濃度的茶樹油(TTO)對金黃色葡萄球菌8325-4生物膜的形成的影響,得出茶樹油對金黃色葡萄球菌菌懸液有殺菌作用和生物膜都有滅活作用。</p><p> 茶樹油及其組分作用于微生物細(xì)胞膜上形成穿孔,使細(xì)胞內(nèi)容物特別是鉀離子大量滲出,擾亂細(xì)胞膜雙層結(jié)構(gòu)脂分子的正常分布,誘導(dǎo)降解細(xì)胞壁的水解酶刺激細(xì)胞自溶,作用于正常細(xì)胞膜去極化導(dǎo)致細(xì)胞死亡,導(dǎo)致細(xì)胞對氯化鈉敏感性增加,抑制呼吸,電鏡觀察到細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,265nm
37、吸收物質(zhì)損失,形成間體、細(xì)胞質(zhì)損失等,表明用茶樹油處理后,細(xì)胞膜被破壞。根據(jù)這些數(shù)據(jù),可以認(rèn)為茶樹油殺死微生物是以一種類似膜活性消毒劑的方式。茶樹油作為一種膜活性消毒劑可以殺死多種不同的微生物[10]。由于茶樹油含有100多種組分,各種組分的含量不同(從小于1%到接近40%),溶解度和分子量的大小不同,因而物理、化學(xué)性質(zhì)各異,滲透通過細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的速率也不同。且茶樹油的抗菌活性可能存在除膜以外的作用位點或茶樹油中的未知組分,故不排
38、除其它的殺菌機理輔助作用。</p><p> 2.2 茶樹油抗菌效果的研究</p><p> 茶樹油對真菌生長的抑制作用在上世紀(jì)九十年代就有相關(guān)研究,茶樹油對不同菌類的抗菌活性有差異,一般認(rèn)為對真菌的活性最強,其次為真菌樣酵母菌,對酵母菌的抗菌能力相對較弱。鄭罡等[11]采用紙片擴散法和生化指標(biāo)檢測方法研究茶樹油對白假絲酵母菌的抑菌效果及其抗真菌作用機理,結(jié)果顯示,茶樹油處理的白假絲酵
39、母菌的菌體蛋白質(zhì)含量明顯減少,菌體膽固醇及甘油三脂含量也明顯低于正常對照菌株。茶樹油在較低濃度條件下具有明顯抑制和殺滅作用,干擾菌體蛋白質(zhì)、膽固醇及甘油三脂的合成作用從而產(chǎn)生抗菌作用。 </p><p> 從研究者的結(jié)論上看,茶樹油對微生物生長的抑制作用是肯定的。茶樹油對[12]枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌、黑曲霉素等有顯著的抗菌作用。</p><p>
40、Hammer等[13]研究得出,茶樹油對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和白色念珠菌等具有較強抗菌作用,是一種天然的抗菌劑。杜光等[4]對茶樹油抗菌作用研究結(jié)果表示,茶樹油0.5%含量對大腸艾希菌、表皮葡萄球菌、白色假絲酵母菌有抑制作用,茶樹油0.25%含量對光滑假絲酵母菌有抑菌作用,茶樹油0.125%對金黃色葡萄球菌有抑菌作用。金路[5]等用金黃色葡萄球菌ATCC6538(第4代)、白色鏈珠菌ATCC1023 1(第9
41、代)、大腸埃希菌8099(第4代)用重慶產(chǎn)茶樹油作三次重復(fù)定量殺菌試驗。結(jié)果顯示,茶樹油對以上三種微生物10分鐘殺滅作用達(dá)分別為:92.46% 、76.49% 、99.99%。黃曉敏等[14]采用Brown平板改良法體外復(fù)制金黃色葡萄球菌生物膜模型,掃描電鏡確認(rèn)后應(yīng)用載體定量殺菌實驗,研究金黃色葡萄球菌生物膜對茶樹精油的抵抗力,實驗顯示,培養(yǎng)3d的金黃色葡萄球菌生物膜對體積分?jǐn)?shù)2.0%的茶樹油耐受時間最短,作用20 min完全被殺滅;培
42、養(yǎng)7d的金黃色葡萄球菌生物膜對體積分?jǐn)?shù)0.75%茶樹油耐受時間最長,作用120 min才被完全清除,用金黃色葡萄球菌浮游</p><p> 以上的研究證實茶樹油對試驗中的細(xì)菌、真菌等有很強的抗菌活性。對于真菌及芽胞的抗菌作用這里就不做多介紹,已經(jīng)有大量研究表明茶樹油在此方面的作用。目前對茶樹油各方面活性也已進行了大量的研究,而對其作用機制的研究剛剛起步,這將會成為今后茶樹油研究的發(fā)展方向。</p>
43、<p> 2.3 茶樹油的抗氧化性</p><p> 茶樹油對二苯代苦味胼基自由基(DPPH自由基)有很好的清除能力,其所含的α-萜品烯、 γ-萜品烯等成分是天然的抗氧化劑[16]。</p><p> 2.4 茶樹油在食品保鮮方面的應(yīng)用</p><p> 目前國內(nèi)外對茶樹油的應(yīng)用方面的研究主要集中在護膚品、醫(yī)藥等方面,茶樹油用于護膚品,具有天然防
44、腐殺菌的功效,在痤瘡的調(diào)理方面有特殊效果;用于日用化學(xué)品,具有滲透力強、溫和不刺激等特性,在口腔護理方面療效顯著[17]。</p><p> 而由于茶樹油對真菌的抑制作用研究較多,現(xiàn)階段對茶樹油在果蔬保鮮方面的應(yīng)用日漸增多。鐘業(yè)俊等[18]試驗由“Span80+ Tween80”乳化劑制備得到乳化茶樹油,通過檢測分析病情指數(shù)、可溶性固形物含量、硬度、呼吸強度等指標(biāo), 探討了自然條件下乳化茶樹油在香蕉保鮮中的應(yīng)
45、用效果,并與常用的香蕉保鮮復(fù)合農(nóng)藥進行比較。結(jié)果表明:乳化茶樹油可在不同程度上對香蕉起到保鮮作用,且濃度越大效果越好,但高于1000mg/L時隨著濃度增大,保鮮效果增加不顯著。朱德明等[19]研究了不同濃度的茶樹油對芭蕉炭疽茵茵絲生長和孢子萌發(fā)的抑制效果,通過菌絲生長速度觀測,不同濃度的茶樹油對芭蕉炭疽菌菌絲生長速度都有一定的影響,最小影響濃度為0.025%。茶樹油濃度為0.05%(體積分?jǐn)?shù))時對芭蕉炭疽菌菌絲生長速度受到顯著抑制,此時
46、分生孢子內(nèi)部構(gòu)造也發(fā)生了改變。</p><p><b> 3.對蝦保鮮現(xiàn)狀</b></p><p> 我國2008年對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量為126萬t,約占全球37% ,居世界首位。我國雖然已成為名副其實的對蝦生產(chǎn)大國,然而卻遠(yuǎn)不是對蝦物流強國。由于我國物流保鮮技術(shù)落后,大部分對蝦以鮮銷的方式進入市場,并且在對蝦保鮮中,主要通過冷凍方式來保藏對蝦,冷凍保藏造成蛋白質(zhì)變性和質(zhì)
47、構(gòu)的破壞,嚴(yán)重影響了對蝦的風(fēng)味,同時在貯運、交易、配送等環(huán)節(jié)中對蝦鮮度下降快、損耗率高等關(guān)鍵技術(shù)還未得到有效解決。這些都與人們對蝦類鮮活及鮮度的需求不相適應(yīng),因此,開發(fā)安全、成本低、貨架壽命長、食品品質(zhì)佳的蝦類保鮮新技術(shù)非常必要[20]。</p><p> 3.1 對蝦腐敗機理</p><p> 關(guān)于蝦的腐敗機理研究比較透徹,主要是由于蝦類本身特有的生物、化學(xué)特性,含水量高,肌肉組織柔
48、軟,極容易腐敗變質(zhì);對蝦體內(nèi)含有大量的酶類和酪氨酸,易受氧化而產(chǎn)生黑色素,使蝦變黑。</p><p> 蝦捕獲后,在良好的冰藏條件下細(xì)菌繁殖緩慢,1~2d 內(nèi)仍能保持良好的鮮度, 即色澤、氣味正常,外殼有光澤,半透明, 蝦體肉質(zhì)堅密,有彈性,甲殼緊密附著蝦體[21]。隨后由于細(xì)菌及酶促反應(yīng)的作用,促進蛋白質(zhì)的快速分解,蝦體從僵硬狀態(tài)開始進入白落階段,其感官特征是:蝦體外殼失去光澤,出現(xiàn)黑箍、黑斑等,其變壞順序為
49、:頭胸部- 軀部- 外殼下部- 腮部,內(nèi)臟有輕度腥味,彈性降低。若繼續(xù)冷藏,由于細(xì)菌的大量迅速繁殖,就會出現(xiàn)各種腐敗現(xiàn)象,即蝦肉組織松軟、有氨臭味、內(nèi)臟彌散、甲殼與蝦體分離。這些現(xiàn)象的出現(xiàn),表明蝦已明顯變質(zhì)變壞。影響對蝦變黑、變質(zhì)的主要因素已有相關(guān)的研究報道。主要有:細(xì)菌等微生物的影響; 酶及酶促反應(yīng)的影響; 溫度變化的影響; 空氣中氧的影響。</p><p> 3.2 傳統(tǒng)對蝦的保鮮方法</p>
50、<p> 一般對蝦的保鮮方法有:低溫或冷凍保鮮;氣調(diào)保鮮;調(diào)節(jié)PH值;添加保鮮劑;輻照等。傳統(tǒng)的低溫保鮮方法是采用層冰層蝦的保鮮方法,這種方法不僅自身的保鮮效果不是很好,而且由于漁船一次出海作業(yè)時間較長,冰得不到及時的供應(yīng),最后導(dǎo)致蝦保鮮達(dá)不到理想的效果。關(guān)于對蝦保鮮劑的選擇,許多學(xué)者進行了不少研究,但尚未找到一種既保鮮效果好,價格又便宜,且使用過后其殘留對人體無害的保鮮劑。目前,海捕蝦中所用的保鮮劑大多為焦亞硫酸鈉,主要
51、原因為其價格比較便宜,每千克海捕蝦保鮮劑的成本只需幾分錢,且保鮮效果也不錯。但漁民在用焦亞硫酸鈉保鮮海捕蝦時,大多采用直接撒粉法,這種方法雖然操作較方便,但保鮮劑要撒均勻很難,所以往往過量使用,導(dǎo)致海捕蝦二氧化硫殘留嚴(yán)重超標(biāo)[22]。</p><p> 3.3 新型保鮮劑研究現(xiàn)狀</p><p> 現(xiàn)階段也有眾多研究者研究改進保鮮方法。李衛(wèi)東等[23]以南美白對蝦(Penaeus va
52、nnamei)為研究對象,在-3℃的微凍條件下對其進行保藏試驗。根據(jù)對南美白對蝦的細(xì)菌總數(shù)及其相關(guān)的TVBN測定和感官評分的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)微凍保藏期限為26天時,其細(xì)菌總數(shù)、TVBN值和感官評分仍未超過腐敗臨界值;而保藏至26~30d時,雖然細(xì)菌總數(shù)和TVBN值尚未超標(biāo),但感官上已失去食用價值。實驗表明,南美白對蝦在微凍保藏條件下的保質(zhì)期約為26d。王 亮等[24]采用超聲波、微波復(fù)合浸提的方法預(yù)處理海帶,制備具有抗菌活性的海帶多酚。實驗表
53、明:海帶多酚可有效地延緩南美白對蝦pH的升高,抑制其細(xì)菌總數(shù)和TVB-N值的增加,保持較好的感官質(zhì)量。徐麗敏等[25]采用水溶性殼聚糖對南美白對蝦進行保鮮處理,觀察保鮮劑處理組和對照組的貯藏過程中品質(zhì)指標(biāo)的變化,實驗同時表明,水溶性殼聚糖的處理對南美白對蝦體內(nèi)微生物的生長活動有不同程度的影響,并改變了南美白對蝦貨架期終點的腐敗菌菌相組成;抑菌實驗表明,該水溶性殼聚糖確實對于南美白對蝦中的腐敗菌有不同程度的抑菌作用。Mehmet等[26]
54、(土耳其)用高靜水壓(HHP)分</p><p> 3.4茶樹油在對蝦保鮮中的應(yīng)用前景</p><p> 茶樹油殺菌具有高效性,抑制真菌的有效濃度低,故使用茶樹油作為殺菌劑可以降低生產(chǎn)成本。綜上所述對于茶樹油的研究皆證明茶樹油對微生物的抑制作用明顯,雖然現(xiàn)今沒有茶樹油對水產(chǎn)品保鮮應(yīng)用的研究,但可以預(yù)見其抑菌作用,且茶樹油的抗氧化作用也可以提高對蝦等水產(chǎn)品的保鮮作用。</p>
55、<p><b> 4. 總結(jié)與展望</b></p><p> 天然健康的食品添加劑一直是今年來,食品添加劑行業(yè)研究的方向,而無害,安全健康的保鮮劑更是未來保鮮劑發(fā)展的方向。茶樹油明顯的抑菌作用和尚待深入研究的抗氧化作用等,都表明了茶樹油的開發(fā)前景,茶樹油在醫(yī)藥、化妝品行業(yè)開發(fā)和研究得較多,但隨著其在果蔬食品方面保鮮作用的研究,相信在以后的更多的食品保鮮作用中,都會發(fā)揮其作用
56、。</p><p><b> 參考文獻</b></p><p> 【1】呂 永,何庭玉,陳 珊等.互葉白千層植物精油的研究進展[J].廣東化工,2005,3:38-39.</p><p> 【2】李 娟,李小瑞.茶樹油的性質(zhì)及其應(yīng)用[J].日用化學(xué)工業(yè),2003,33(5):323-325.</p><p> 【
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67、條件下乳化茶樹油在香蕉保鮮中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報, 2009,25(06):280-285.</p><p> 【19】朱德明,丁 麗,匡 鈺等. 茶樹油對芭蕉炭疽菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制活性[J].食品研究與開發(fā),2008,29(6):134-137.</p><p> 【20】王 亮,曾名湧.對蝦保鮮技術(shù)研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2009,35(9):111
68、-115.</p><p> 【21】李升福,王喜波,聞海波. 殼聚糖在對蝦保鮮中作用的初步研究[J].河北漁業(yè),2007,3:14-15.</p><p> 【22】孫一初,戴志遠(yuǎn),王宏海. 蝦保鮮技術(shù)研究進展[J].現(xiàn)代漁業(yè)信息,2009,24(12):26-28.</p><p> 【23】李衛(wèi)東,陶 妍,袁 騏.南美白對蝦在微凍保藏期間的鮮度變化[J]
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70、<p> 【26】Mehmet Bu ¨ yu ¨ kcan, Faruk Bozoglu, Hami Alpas. Preservation and shelf-life extension of shrimps and clamsby high hydrostatic pressure[J]. International Journal of Food Science and Technology,
71、 2009,44:1495–1502.</p><p><b> 本科畢業(yè)設(shè)計</b></p><p><b> ?。?0_ _屆)</b></p><p> 茶樹油在鮮蝦冷藏保鮮中的應(yīng)用</p><p><b> 目錄</b></p><p>&
72、lt;b> 摘 要2</b></p><p> Abstract2</p><p><b> 1前言1</b></p><p> 1.1茶樹油在食品保鮮方面的應(yīng)用1</p><p> 1.2.鮮蝦保鮮現(xiàn)狀1</p><p> 1.2.1茶樹油在鮮蝦保鮮中的應(yīng)
73、用前景2</p><p><b> 2材料與方法2</b></p><p> 2.1 試驗材料2</p><p> 2.1.1 材料與試劑2</p><p> 2.1.2 儀器2</p><p> 2.2 試驗方法2</p><p> 2.2.1
74、樣品采集和樣品前處理2</p><p> 2.2.2樣品的感官評定3</p><p> 2.2.3 樣品的pH值測定3</p><p> 2.2.4 樣品的揮發(fā)性鹽基總氮(TVB-N)的測定3</p><p> 2.2.5 細(xì)菌總數(shù)的測定3</p><p> 2.2.6 電子鼻分析3</p&
75、gt;<p><b> 3結(jié)果與討論4</b></p><p> 3.1 茶樹油浸泡對江白蝦感官評定結(jié)果的影響4</p><p> 3.2 茶樹油浸泡對江白蝦蝦肉pH值的影響5</p><p> 3.3 茶樹油浸泡對江白蝦的揮發(fā)性鹽基總氮(TVB-N)的影響5</p><p> 3.4 茶
76、樹油浸泡對江白蝦細(xì)菌菌落總數(shù)(TBC)的影響7</p><p> 3.5 電子鼻分析茶樹油浸泡對鮮蝦氣味的影響8</p><p> 3.5.1 電子鼻分析江白蝦貯藏期間的品質(zhì)變化8</p><p> 3.5.2電子鼻分析茶樹油浸泡處理后各組的氣味差異10</p><p> 3.5.3 電子鼻分析各組江白蝦在貯藏第5天后的氣味差
77、異11</p><p><b> 4結(jié)論13</b></p><p><b> 致謝13</b></p><p><b> 參考文獻14</b></p><p><b> 附錄16</b></p><p> 摘要
78、 用濃度分別為2mL/L、5 mL/L、15 mL/L、30 mL/L、50 mL/L的茶樹油稀釋液浸泡江白蝦15min后,取出晾干,在4℃下貯藏5天,分別測定感官指標(biāo)、pH值、TVB-N值和細(xì)菌總數(shù),并用電子鼻技術(shù)輔助判別其氣味差別。結(jié)果表明:經(jīng)茶樹油稀釋液處理的江白蝦樣品貯藏保鮮效果明顯優(yōu)于空白對照組,其中濃度為2mL/L、5 mL/L的茶樹油稀釋液處理的江白蝦,在第5天的感官評定總分,分別為8.1、8.5;pH值分別為7.45、7
79、.41;TVB-N分別為25.9、23.3;細(xì)菌總數(shù)分別為1.2×105、3.2×104個/g,各項指標(biāo)結(jié)果明顯優(yōu)于其他處理組。電子鼻輔助分析可以檢測到江白蝦樣品在貯藏期的品質(zhì)變化,并可以區(qū)分不同的茶樹油浸泡組以及對照組??梢园l(fā)現(xiàn)茶樹油對江白蝦具有一定的保鮮效果,其中茶樹油濃度為5 mL/L對江白蝦的保鮮效果最好。</p><p> 關(guān)鍵詞 茶樹油;浸泡;江白蝦;保鮮</p>
80、<p> Abstract: Shrimp (Jiang Bai shrimp) samples were treated with the diluted tea tree oil of different concentration respectively,the concentration is 2mL/L、5 mL/L、15 mL/L、30 mL/L、50 mL/L. Untreated samples
81、 were used as controls. All samples were stored at 4 ℃ for 5 days and then analysis the sensory index, pH value, TVB-N value , TBC and technical assistance with the electronic nose
82、 to detect the odor components. The results showed that tea tree oil diluted treatment maintained higher quality of S</p><p> Keywords: Tea tree oil;shrimp;preservation &l
83、t;/p><p><b> 1前言</b></p><p> 茶樹油(TTO)是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強有力的天然抗菌劑,也是極具價值和發(fā)展?jié)摿Φ募兲烊恢参锞椭弧2铇溆偷目咕饔迷谏鲜兰o(jì)90年代國外就有相關(guān)研究和報道,在1923年澳大利亞技術(shù)和應(yīng)用科學(xué)國家博物館館長,化學(xué)家A.R.Penfold博士就進行了對茶樹油的研究,發(fā)現(xiàn)其殺菌作用比石炭酸強30倍[1]。茶樹油殺菌
84、作用機理的研究目前還處于起步階段,未有完備的方式和方法。茶樹油中含有的脂溶性單萜,如萜品-4-醇、α-萜品醇、芳樟醇、α-蒎烯、1,8-桉葉素等是最有活性的抗菌成分[2]。從研究者的結(jié)論上看,茶樹油對微生物生長的抑制作用是肯定的。茶樹油對[3]枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌、黑曲霉素等有顯著的抗菌作用。杜光等[4]對茶樹油抗菌作用研究結(jié)果表示,茶樹油0.5%含量對大腸艾希菌、表皮葡萄球菌、白色假絲酵母菌有抑制作
85、用,茶樹油0.25%含量對光滑假絲酵母菌有抑菌作用,茶樹油0.125%對金黃色葡萄球菌有抑菌作用。金路[1]等用金黃色葡萄球菌ATCC6538(第4代)、白色鏈珠菌ATCC1023 1(第9代)、大腸埃希菌8099(第4代)用重慶產(chǎn)茶樹油作三次重復(fù)定量</p><p> 1.1茶樹油在食品保鮮方面的應(yīng)用</p><p> 目前國內(nèi)外對茶樹油的應(yīng)用方面的研究主要集中在護膚品、醫(yī)藥等方面,
86、茶樹油用于護膚品,具有天然防腐殺菌的功效,在痤瘡的調(diào)理方面有特殊效果;用于日用化學(xué)品,具有滲透力強、溫和不刺激等特性,在口腔護理方面療效顯著[5]。</p><p> 而由于茶樹油對真菌的抑制作用研究較多,現(xiàn)階段對茶樹油在果蔬保鮮方面的應(yīng)用日漸增多。鐘業(yè)俊等[6]試驗由“Span80+ Tween80”乳化劑制備得到乳化茶樹油,通過檢測分析病情指數(shù)、可溶性固形物含量、硬度、呼吸強度等指標(biāo),探討了自然條件下乳化
87、茶樹油在香蕉保鮮中的應(yīng)用效果,并與常用的香蕉保鮮復(fù)合農(nóng)藥進行比較。結(jié)果表明:乳化茶樹油可在不同程度上對香蕉起到保鮮作用,且濃度越大效果越好,但高于1000mg/L時隨著濃度增大,保鮮效果增加不顯著。朱德明等[7研究了不同濃度的茶樹油對芭蕉炭疽茵茵絲生長和孢子萌發(fā)的抑制效果,通過菌絲生長速度觀測,不同濃度的茶樹油對芭蕉炭疽菌菌絲生長速度都有一定的影響,最小影響濃度為0.025%。茶樹油濃度為0.05%(體積分?jǐn)?shù))時對芭蕉炭疽菌菌絲生長速度
88、受到顯著抑制,此時分生孢子內(nèi)部構(gòu)造也發(fā)生了改變。</p><p> 1.2.鮮蝦保鮮現(xiàn)狀</p><p> 我國2008年鮮蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量為126萬t,約占全球37% ,居世界首位。我國雖然已成為名副其實的鮮蝦生產(chǎn)大國,然而卻遠(yuǎn)不是鮮蝦物流強國。由于我國物流保鮮技術(shù)落后,大部分鮮蝦以鮮銷的方式進入市場,并且在鮮蝦保鮮中,主要通過冷凍方式來保藏鮮蝦,冷凍保藏造成蛋白質(zhì)變性和質(zhì)構(gòu)的破壞,嚴(yán)重影
89、響了鮮蝦的風(fēng)味,同時在貯運、交易、配送等環(huán)節(jié)中鮮蝦鮮度下降快、損耗率高等關(guān)鍵技術(shù)還未得到有效解決。這些都與人們鮮蝦類鮮活及鮮度的需求不相適應(yīng),因此,開發(fā)安全、成本低、貨架壽命長、食品品質(zhì)佳的蝦類保鮮新技術(shù)非常必要[8]。</p><p> 一般鮮蝦的保鮮方法有:低溫或冷凍保鮮;氣調(diào)保鮮;調(diào)節(jié)PH值;添加保鮮劑;輻照等。傳統(tǒng)的低溫保鮮方法是采用層冰層蝦的保鮮方法,這種方法不僅自身的保鮮效果不是很好,而且由于漁船一
90、次出海作業(yè)時間較長,冰得不到及時的供應(yīng),最后導(dǎo)致蝦保鮮達(dá)不到理想的效果。關(guān)于鮮蝦保鮮劑的選擇,許多學(xué)者進行了不少研究,但尚未找到一種既保鮮效果好,價格又便宜,且使用過后其殘留對人體無害的保鮮劑。目前,海捕蝦中所用的保鮮劑大多為焦亞硫酸鈉,主要原因為其價格比較便宜,每千克海捕蝦保鮮劑的成本只需幾分錢,且保鮮效果也不錯。但保鮮劑往往過量使用,導(dǎo)致海捕蝦二氧化硫殘留嚴(yán)重超標(biāo)[9]。</p><p> 1.2.1茶樹油
91、在鮮蝦保鮮中的應(yīng)用前景</p><p> 茶樹油殺菌具有高效性,目前茶樹油在鮮蝦保鮮中的應(yīng)用尚未見報道。本文擬采用不同濃度的茶樹油稀釋液浸泡處理江白蝦,測定一定貯藏期后的感官指標(biāo)、pH值、TVB-N值和細(xì)菌總數(shù),并用電子鼻技術(shù)輔助判別其氣味差別。期望發(fā)現(xiàn)茶樹油在鮮蝦保鮮中應(yīng)用的可行性及其效果,從而為茶樹油在鮮蝦防腐保鮮中的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。</p><p><b> 2材料
92、與方法</b></p><p><b> 2.1 試驗材料</b></p><p> 2.1.1 材料與試劑</p><p> 茶樹油,由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所提供;江白蝦,購自寧波莊市菜市場;吐溫80;1%氯化鎂;酚酞;2%硼酸溶液;甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑;0.01mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液;濃硫酸;生理鹽水;牛
93、肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基;平板菌落計數(shù)培養(yǎng)基;以上均為國產(chǎn)試劑。</p><p><b> 2.1.2 儀器</b></p><p> 無菌操作臺(SW-CJ-2D型,蘇州凈化設(shè)備有限公司);電子鼻(PEN3型,德國);恒溫水浴箱(HH-4型,國華電器有限公司);電子天平(JY型,上海方瑞儀器有限公司);數(shù)字pH計(Docu-pH meter,sartorius,U
94、SA);智能生化培養(yǎng)箱(Spx-270型,寧波海曙賽福試驗儀器廠);高溫滅菌器(LDZX-50KBS型,上海申安醫(yī)療器械廠);恒溫培養(yǎng)箱(DNP-9162型,寧波江南儀器廠);純水機(PA-E型,前沿科技);微量凱氏定氮裝置。</p><p><b> 2.2 試驗方法</b></p><p> 2.2.1 樣品采集和樣品前處理</p><p&
95、gt; 新鮮活江白蝦,剔除破損和大小差異較大的個體,?;顜Щ卦囼炇摇A⒓从帽鶋K冰死,冰水清洗去污,,將試樣個體隨機分為處理組和對照組。</p><p> 處理組設(shè)置了5個濃度梯度的茶樹油稀釋液,濃度依次為:2mL/L、5 mL/L、15 mL/L、30 mL/L、50 mL/L。茶樹油稀釋液的試劑制備方法為,取一定量的茶樹油量加入1mL吐溫80,用蒸餾水稀釋至所需濃度。分別將處理組鮮蝦浸泡入茶樹油溶液中,15
96、分鐘后將其取出瀝干,放入無菌培養(yǎng)皿中,用保鮮膜密封,標(biāo)記后放入4℃冰箱保藏。同時,設(shè)置空白對照組,分別于第0天,第5天測定各處理組及對照組樣品的品質(zhì)指標(biāo)。</p><p> 2.2.2樣品的感官評定</p><p> 本試驗采用的感官評分標(biāo)準(zhǔn)如表1。</p><p> 表1 鮮蝦感官評定評分標(biāo)準(zhǔn)</p><p> Tab.1 Sens
97、ory Evaluation Standards</p><p> 2.2.3 樣品的pH值測定</p><p> 稱取各組別樣品5g,在燒杯中加入50mL蒸餾水,攪拌均勻(用搗碎機搗碎),放置30min(不斷振搖),然后過濾,取濾液,用pH計測定,直接讀取pH值[10]。 </p><p> 2.2.4 樣品的揮發(fā)性鹽基總氮(TVB-N)的測定&l
98、t;/p><p> 利用水蒸氣蒸餾法用微量凱式定氮裝置測定,將鮮蝦去頭、尾、殼后,剪碎研勻。稱取10g于小燒杯中,加入無氨蒸餾水100mL,振搖浸抽30min后干過濾,溶液待測。連接安裝好儀器后,吸取2%硼酸10mL于錐形瓶中,加入指示劑蒸餾,然后滴定,讀取結(jié)果,同時做平行試驗和空白對照試驗。</p><p> 2.2.5 細(xì)菌總數(shù)的測定</p><p> 根據(jù)G
99、B/T 4789.2-2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》,分別稱取25g江白蝦樣品,稱取25g樣品置盛有225mL生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi),8000 r/min~10000 r/min 均質(zhì) 1 min~2 min,制成 1:10 的樣品勻液,然后用無菌吸管分別稀釋成10倍系列梯度并及時將15 mL~20 mL冷卻至46 ℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿,并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。待瓊脂凝固后,將平板翻轉(zhuǎn),30±1℃培養(yǎng)
100、72h±3h。取出觀察計數(shù)并記錄數(shù)據(jù)進行處理分析。細(xì)菌總數(shù)(個/g)≤105為一級鮮度,細(xì)菌總數(shù)(個/g)≤5×105即為二級鮮度。</p><p> 2.2.6 電子鼻分析</p><p> 應(yīng)用電子鼻測定對照組的江白蝦在整個貯藏期間的氣味變化趨勢,以及處理組江白蝦在貯藏期開始和結(jié)束時的氣味特征,進行對比分析。</p><p> 測得的數(shù)
101、據(jù)采用主成分分析法( PCA) 和線性判別法(LDA) 分析蝦貯藏期間的芳香氣體組成與變化,建立蝦貯藏時間的判定模型;然后用Loadings 分析法對該判別模式下的傳感器進行研究,以確定PEN3 系統(tǒng)各傳感器在檢測中的相對重要性。</p><p><b> 3結(jié)果與討論</b></p><p> 3.1 茶樹油浸泡對江白蝦感官評定結(jié)果的影響</p>
102、<p> 蝦在捕獲后,良好的冰藏條件下細(xì)菌繁殖緩慢,1~2d 內(nèi)仍能保持良好的鮮度,即色澤、氣味正常,外殼有光澤,半透明,蝦體肉質(zhì)堅密,有彈性,甲殼緊密附著蝦體。隨后由于細(xì)菌及酶促反應(yīng)的作用,促進蛋白質(zhì)的快速分解,蝦體從僵硬狀態(tài)開始進入白落階段,其感官特征是:蝦體外殼失去光澤,出現(xiàn)黑箍、黑斑等,其變壞順序為:頭胸部—軀部—外殼下部—腮部,內(nèi)臟有輕度腥味,彈性降低。其在貯藏過程中,在微生物的作用下,體內(nèi)的蛋白質(zhì)、氨基酸及其他含
103、氮物質(zhì)被分解為氨、三甲胺、吲哚、硫化氫等低級產(chǎn)物,是蝦體產(chǎn)生具有腐敗特征的臭味,同時蝦體內(nèi)的酪氨酸等被多酚氧化酶氧化,產(chǎn)生黑色素,因此蝦氣味、肉質(zhì)組織、體表色澤都會隨時間發(fā)生變化,因此蝦的感官特征可以作為評價蝦鮮度的指標(biāo)[11],</p><p> 如圖1所示,試驗中,貯藏期前2天處理組和對照組在體表色澤、肉質(zhì)組織指標(biāo)上沒有出現(xiàn)明顯差異,但在氣味上,經(jīng)茶樹油浸泡處理過的江白蝦具有不同程度的茶樹油氣味殘留,尤其以
104、30mL/l、50mL/L濃度處理后較為明顯。第3天時對照組樣品質(zhì)明顯變差,蝦的頭部略微出現(xiàn)黑斑,體表色澤有出現(xiàn)變黃、略有異味。處理組中經(jīng)濃度為2mL/L、5mL/L茶樹油稀釋液處理的樣品品質(zhì)無明顯變化,體表略成玉白色。經(jīng)過濃度為15mL/L、30mL/L、50mL/L茶樹油稀釋液處理的樣品有黑斑出現(xiàn),江白蝦頭部變黑。貯藏第5天,空白對照組出現(xiàn)嚴(yán)重腐敗味,黑變嚴(yán)重,肌肉略有松弛,殼易剝離。而經(jīng)濃度為2mL/L、5mL/L茶樹油稀釋液處理
105、的蝦的顏色和氣味仍然沒有出現(xiàn)明顯變化,僅蝦殼略有少許變黃。而濃度為15mL/L、30mL/L、50mL/L的茶樹油處理組都出現(xiàn)不同程度的黑變,且有強烈的茶樹油刺激味夾雜腐敗變質(zhì)味。</p><p> 圖1. 茶樹油(TTO)浸泡對江白蝦貯藏期間感官指標(biāo)的影響</p><p> Fig.1 Effects of TTO on index of sensory of JiangB
106、ai shrimp during storage</p><p> 從感官評定的結(jié)果上來看,空白對照組的鮮蝦在第3天品質(zhì)明顯大幅下降,開始腐敗,而經(jīng)過茶樹油處理的鮮蝦品質(zhì)改變也開始明顯下降,但是感官指標(biāo)與空白組相比,仍保持較好水平。茶樹油濃度較大(v/v≥15mL/L)的處理組在嗅覺上呈現(xiàn)強烈的茶樹油揮發(fā)氣味,并從第3天開始帶有不同程度的氨味。而且濃度進一步增加時,蝦的感官品質(zhì)會隨濃度的增加而下降。感官評定的結(jié)
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