hplc法測(cè)定紅景天苷的方法研究

1、<p>　　HPLC法測(cè)定紅景天苷的方法研究</p><p>　　摘要：利用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)紅景天中紅景天苷的含量。 </p><p>　　關(guān)鍵詞：高效液相色譜法 紅景天 紅景天苷。 </p><p><b>　　紅景天苷結(jié)構(gòu)式 </b></p><p>　　英文名稱：Salidroside &l

2、t;/p><p>　　分子式：C14H20O7 </p><p>　　CAS：10338-51-9 分子量 300.30 </p><p><b>　　1、材料與方法 </b></p><p>　　1.1 主要材料與試劑 </p><p>　　紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)品【GBW（E）100018.1.00mg/m

3、l】.國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心； </p><p>　　甲醇（色譜純），水（超純水），氨水（分析純）， </p><p>　　1.2 主要儀器與設(shè)備 </p><p>　　Agilent1100高效液相色譜系統(tǒng)：配有紫外檢測(cè)器，美國安捷倫公司。 </p><p><b>　　1.3 實(shí)驗(yàn)條件 </b></p>

4、<p>　　色譜柱：ZORBAX SB-C18（ 4.6×150mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇：水=15：85；流速1.0ml/min；柱溫25℃；進(jìn)樣量10μl；檢測(cè)器：275nm。 </p><p>　　1.4 測(cè)定項(xiàng)目：紅景天中紅景天苷的測(cè)定 </p><p>　　1.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線 </p><p>　　分別配置濃度為10mg/mL，20m

5、g/mL，40mg/mL，60mg/mL，80mg/mL的紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)工作液，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，供高效液相色譜測(cè)定，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用以定量。 </p><p><b>　　1.4.2檢出限 </b></p><p>　　用紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)品直接進(jìn)樣，分別按三倍噪音值計(jì)算檢測(cè)器的檢出限為：VWD檢測(cè)器的檢出限為0.04μg/kg。 </p><

6、;p>　　1.4.3樣品處理 </p><p>　　稱取5-10克樣品以甲醇超生溶解并定容至50ml容量瓶中經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾，供高效液相色譜測(cè)定。 </p><p><b>　　2、結(jié)果與分析 </b></p><p>　　2.1依據(jù)保留時(shí)間一致性進(jìn)行定性識(shí)別的方法，根據(jù)紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)樣品的保留時(shí)間，確定樣品中是否含有紅景天苷。（

7、圖3.圖4） </p><p>　　2.2以紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)品稀釋濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)試樣進(jìn)行定量，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和試樣溶液中紅景天苷的相應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)線性范圍內(nèi)。在上述色譜條件下，紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖參見（圖1。圖2）。 </p><p><b>　　3、空白實(shí)驗(yàn) </b></p><p>　　除不加

8、紅景天苷標(biāo)注物質(zhì)外，空白實(shí)驗(yàn)應(yīng)與加標(biāo)樣品測(cè)定平行進(jìn)行，并且用相同的分析步驟，取相同的所有試劑。 </p><p>　　圖1（VWD檢測(cè)器矯正曲線） </p><p>　　圖2（VWD檢測(cè)器紅景天苷標(biāo)樣譜圖） </p><p>　　圖3（VWD檢測(cè)器紅景天苷樣品譜圖） </p><p>　　圖3（空白樣品VWD譜圖） </p>&

9、lt;p><b>　　4、回收率 </b></p><p>　　取空白樣品，分別加入5份不同量的紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.5.1的樣品前處理方法進(jìn)行處理后進(jìn)樣，計(jì)算回收率。 </p><p><b>　　4.1回收率計(jì)算 </b></p><p>　　將5份不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品分別加入到空白樣品中，計(jì)算回收率，見表1和表2

10、. </p><p>　　表1VWD檢測(cè)器回收率實(shí)驗(yàn) </p><p>　　名稱 理論加入量（μg） 實(shí)際測(cè)的量（μg） 回收率 平均回收率 </p><p>　　紅景天苷 1.00 0.9995 99.50 </p><p><b>　　99.47 </b></p><p>　　紅景天苷 0.8

11、0 0.7998 99.97 </p><p>　　紅景天苷 0.60 0.6009 100.15 </p><p>　　紅景天苷 0.40 0.3989 99.73 </p><p>　　紅景天苷 0.20 0.1960 98.00 </p><p>　　可見，平均回收率很好。 </p><p><b>　

12、　5、結(jié)論 </b></p><p>　　采用紫外檢測(cè)器檢測(cè)紅景天中紅景天苷含量的方法是可行的，。 </p><p>　　此方法也適用于飲料中紅景天苷的檢測(cè)。 </p><p><b>　　參考文獻(xiàn)： </b></p><p>　　[1]云自厚 歐陽津 張曉丹 液相色譜檢測(cè)方法 第二版 化學(xué)工業(yè)出版社2005

13、 </p><p>　　[2]王正范 色譜定性與定量 第二版 化學(xué)工業(yè)出版社2007 </p><p>　　[3]張祥民 現(xiàn)代色譜分析 復(fù)旦大學(xué)出版社 2004-12-01 </p><p>　　[4]郝素娥 等 食品添加劑制備與應(yīng)用技術(shù) 化學(xué)工業(yè)出版社 2003 </p><p>　　[5]張彥明 無公害動(dòng)物源性食品檢驗(yàn)技術(shù) 中國農(nóng)業(yè)出版社