
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:線粒體是真核細(xì)胞的主要供能細(xì)胞器,是細(xì)胞發(fā)生呼吸作用的主要場(chǎng)所,通過(guò)電子傳遞呼吸鏈的氧化磷酸化反應(yīng)產(chǎn)生ATP,供細(xì)胞利用。線粒體呼吸功能下降會(huì)導(dǎo)致能量代謝障礙,影響正常生理功能。我們通過(guò)建立力竭大鼠模型,觀察力竭運(yùn)動(dòng)及紅景天苷對(duì)大鼠心肌線粒體結(jié)構(gòu)和線粒體呼吸功能的影響,研究紅景天苷對(duì)心肌的保護(hù)作用及機(jī)制。
方法:
1.40只健康成年雄性SD大鼠,隨機(jī)分為安靜對(duì)照組、低劑量紅景天苷組、高劑量紅景天苷組、力竭組(n
2、=10),分別給予安靜對(duì)照組與力竭組生理鹽水、其他兩組給予低劑量紅景天苷(100mg/kg)及高劑量紅景天苷(300mg/kg)灌胃2周。除安靜對(duì)照組外,其余各組建立一次性力竭游泳運(yùn)動(dòng)后心肌損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,于力竭運(yùn)動(dòng)后即刻取材,安靜對(duì)照組同期安靜狀態(tài)下取材。
2.應(yīng)用光鏡及電鏡觀察大鼠心肌顯微結(jié)構(gòu)及超微結(jié)構(gòu)。
3.采用ELISA試劑盒檢測(cè)血清中血清肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肌酸激酶(CK)、肌紅蛋白(MB)的含量。
3、> 4.應(yīng)用高分辨呼吸儀測(cè)定大鼠心肌線粒體以蘋(píng)果酸/谷氨酸為底物的復(fù)合物Ⅰ的態(tài)3與態(tài)4呼吸速率,以琥珀酸為底物的復(fù)合物Ⅱ的態(tài)3呼吸速率,以TMPD和抗壞血酸鹽為底物的復(fù)合物Ⅳ的態(tài)3呼吸速率,并比較其呼吸速率控制比(Respiratory Control Ratio,RCR)。
結(jié)果:
1.心肌組織光鏡及電鏡組織形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果:對(duì)照組大鼠心肌肌節(jié)排列整齊,密度均勻,細(xì)胞器無(wú)水腫,線粒體膜、嵴正常存在;力竭組大鼠心肌核
4、周基質(zhì)高度水腫,核周隙變寬,可見(jiàn)線粒體和糖原數(shù)量明顯減少,核周基質(zhì)內(nèi)線粒體部分嵴和少部分膜融合、模糊不清或缺失,少量心肌纖維壞死;低劑量紅景天苷組及高劑量紅景天苷組大鼠心肌細(xì)胞基質(zhì)水腫,線粒體部分嵴和少部分膜融合、模糊不清或缺失。
2.各組大鼠血清cTnⅠ含量的比較:與對(duì)照組(151.98±8.69ng/ml)相比,高劑量紅景天苷組SD大鼠血清cTnⅠ的含量(158.73±9.82 ng/ml)與低劑量紅景天苷組(160.29
5、±14.63 ng/ml)均沒(méi)有明顯差別(P>0.05),而力竭組大鼠血清cTnⅠ的含量(178.86±15.40ng/ml)則明顯升高,存在顯著性差異(P<0.05)。
3.各組大鼠血清CK含量的比較:與對(duì)照組(11.42±0.84ng/ml)相比,高劑量組(13.65±0.64 ng/ml)、低劑量組(15.09±0.50 ng/ml)、力竭組大鼠血清CK的含量(17.20±0.72 ng/ml)均升高,存在顯著性差異(P
6、<0.05)。
4.各組大鼠血清MB含量的比較:與對(duì)照組相(3.55±0.32ng/ml)比,高劑量紅景天苷組(3.90±0.43ng/ml)大鼠血清MB的含量沒(méi)有明顯差別,而低劑量紅景天苷組(4.47±0.19 ng/ml)、力竭組大鼠血清MB的含量(4.92±0.38ng/ml)均升高,存在顯著性差異(P<0.05)。
5.各組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅰ的態(tài)4呼吸速率:各組間心肌線粒體復(fù)合物Ⅰ的態(tài)4呼吸速率沒(méi)有顯著差
7、別(P>0.05)。
6.各組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅰ的態(tài)3呼吸速率:對(duì)照組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅰ的態(tài)3呼吸速率(110.08±9.65 pmol.s-1mg-1)明顯高于其余各組(P<0.05),而低劑量(70.98±7.06 pmol.s-1mg-1)、高劑量紅景天苷組線粒體復(fù)合物Ⅰ的態(tài)3呼吸速率(84.88±11.29 pmol.s-1mg-1)均明顯高于力竭組(P<0.05)。
7.各組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅰ的
8、RCR:對(duì)照組的RCR值(5.43±0.29)明顯高于其余各組(P<0.05),而低劑量(2.89±0.19)、高劑量紅景天苷組(3.75±0.23)均明顯高于力竭組(1.97±0.26)(P<0.05),其中高劑量組明顯高于低劑量組(P<0.05)。
8.各組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅱ的態(tài)3呼吸速率:對(duì)照組(163.80±18.59 pmol.s-1mg-1)、高劑量紅景天苷組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅱ的態(tài)3呼吸速率(170.08±
9、26.58 pmol.s-1mg-1)明顯高于低劑量紅景天苷組(117.66±15.21 pmol.s-1mg-1)及力竭組(111.18±40.82 pmol.s-1mg-1)(P<0.05)。低劑量紅景天苷組與力竭組之間沒(méi)有顯著性差別(P>0.05)。
9.各組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅳ的態(tài)3呼吸速率:對(duì)照組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅳ的態(tài)3呼吸速率(695.45±35.10 pmol.s-1mg-1)明顯高于其余各組(P<0.05
10、),高劑量紅景天苷組大鼠心肌線粒體復(fù)合物Ⅳ的態(tài)3呼吸速率(535.07±73.11 pmol.s-1mg-1)明顯高于低劑量組(423.04±36.78pmol.s-1mg-1)與力竭組(382.14±51.64 pmol.s-1mg-1)(P<0.05)。
結(jié)論:
1.力竭運(yùn)動(dòng)會(huì)破壞大鼠心肌線粒體的結(jié)構(gòu),造成心肌的損傷。其機(jī)制可能是通過(guò)減弱線粒體呼吸鏈復(fù)合物的活性,降低線粒體的呼吸功能。
2.紅景天苷對(duì)力
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