紅景天苷對新生大鼠海馬區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞分化的影響.pdf

1、目的：觀察紅景天苷(SDS)藥物血清對新生大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞分化的影響，旨在進(jìn)一步推動利用中藥研究神經(jīng)干細(xì)胞的發(fā)展。 方法：采用神經(jīng)球連續(xù)形成法從新生24h內(nèi)的Wistar大鼠海馬組織分離、培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，通過連續(xù)傳代培養(yǎng)觀察其自我更新能力。采用神經(jīng)干細(xì)胞Nestin免疫細(xì)胞化學(xué)染色，鑒定所分離的細(xì)胞是否為神經(jīng)干細(xì)胞。將BrdU加入細(xì)胞懸液中，驗證神經(jīng)干細(xì)胞的分裂增殖能力。將第3代培養(yǎng)的神經(jīng)球接種在2塊24孔培養(yǎng)板中，每塊板分成

2、4組，分別是正常血清對照組，紅景天苷高、中、低劑量藥物血清組。培養(yǎng)7d、14天后，分別行NSE(神經(jīng)元特異烯醇化酶)、GFAP(膠質(zhì)纖維酸性蛋白)免疫細(xì)胞化學(xué)染色，計數(shù)陽性細(xì)胞；并對各組NSE陽性細(xì)胞的面積、周長進(jìn)行圖像分析；對組間差異進(jìn)行統(tǒng)汁學(xué)檢測。 結(jié)果：新生大鼠海馬分離的單個細(xì)胞通過培養(yǎng)，可形成神經(jīng)球，經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)檢測為Nestin陽性細(xì)胞。BrdU孵育后，新形成的神經(jīng)球BrdU免疫標(biāo)記陽性。同一時間內(nèi)，各藥物實驗組誘導(dǎo)

3、神經(jīng)干細(xì)胞分化為NSE陽性細(xì)胞的個數(shù)明顯高于對照組(P＜0.01)，分化為GFAP陽性細(xì)胞的個數(shù)明顯低于對照組(P＜0.01)；且呈量效依賴關(guān)系；分化為NSE陽性細(xì)胞的面積與周長明顯大于對照組(P＜0.01)。 結(jié)論：自新生大鼠海馬能夠分離、培養(yǎng)出神經(jīng)干細(xì)胞，應(yīng)用機械法消化細(xì)胞、控制細(xì)胞接種的密度，可獲得增殖效果理想的神經(jīng)干細(xì)胞。紅景天苷血清可促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化，在一定范圍內(nèi)存在量效依賴關(guān)系，并對所分化的神經(jīng)元樣細(xì)胞