甬江中下游兩種自由生纖毛蟲形態(tài)學研究【開題報告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報告</b></p><p><b>　　生物技術(shù)</b></p><p>　　甬江中下游兩種自由生纖毛蟲形態(tài)學研究</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><p>　　甬江水系為浙江省八大水系之一，發(fā)源于奉化、新昌和嵊州交界的烏山。上游稱剡江，中

2、游稱奉化江，在寧波市區(qū)以下始稱甬江，在鎮(zhèn)?？谕庥紊阶⑷霒|海, 是寧波的母親河，干流總長106km，流域面積5400km2。</p><p>　　原生動物在動物界中屬于最原始、最低等的單細胞動物，它們身體通常較微小，一般長度在100～300um之間。原生動物的種類繁多，如今記載的種類已逾65000種， 其中至少有半數(shù)為現(xiàn)存種。原生動物結(jié)構(gòu)簡單，生命周期短，對污染反應迅速，水體環(huán)境的突然變化能及時從原生動物群落的變化

3、上反映出來。原生動物除了可以在自然水域中廣泛分布外，還可以在處理廢水和污水時建立起來的人工體系中棲居。在污水處理的人工體系中， 原生動物的種類及數(shù)量與生物處理的效果有著密切的關(guān)系，因此，原生動物又可以用來作為污水處理的指示生物。原生動物與細菌之間存在相互依存的功能關(guān)系，直接觀察原生動物的種類組成和生長，不僅能反映出細菌的生長情況，也能間接地監(jiān)測出水質(zhì)，起著指示的作用。利用化學綜合污染指數(shù)這一普遍接受的水質(zhì)化學評價方法，將原生動物對污染的

4、反映屬性直接建立在化學參數(shù)的基礎之上，從而更客觀地反映出水質(zhì)的狀況。</p><p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題：</p><p><b>　　研究的基本內(nèi)容；</b></p><p>　　1、定期對甬江中下游水體中的纖毛蟲進行采集；</p><p>　　2、光學顯微鏡觀察目標生物的活體形態(tài)；</p&

5、gt;<p>　　3、對纖毛蟲原生動物的活體形態(tài)與染色后得到的結(jié)構(gòu)進行種類確定；</p><p>　　4、了解纖毛蟲對甬江水體的影響；</p><p><b>　　擬解決的主要問題：</b></p><p>　　纖毛蟲的分離與培養(yǎng)；</p><p><b>　　蛋白銀法染色技術(shù)；</b>

6、;</p><p>　　三、研究的方法與技術(shù)路線：</p><p><b>　　研究方法：</b></p><p><b>　　1、采集工具準備：</b></p><p>　　準備500和1000ml廣口瓶各一, 用于盛放載玻片的染色缸(數(shù)量視采集點設置而定), 裝PFU (海綿塊約7x7x7 cm

7、)的密閉塑料袋或具蓋水桶等, 拖浮網(wǎng)，同時還應準備若干個由培養(yǎng)皿改制成的潮濕房以備用(分離培養(yǎng)用)。</p><p><b>　　2、標本采集：</b></p><p>　　在淺的水體(如水塘、河溝、淺灘或潮間帶的積水處), 可先用木桿將水攪動, 至底層沉積物泛起后以大廣口瓶采水, 并應撈取若干地點之植物莖葉或漂浮物(枯葉、敗絮等)。</p><p

8、><b>　　3、分離與培養(yǎng)：</b></p><p>　　分離：根據(jù)蟲體的大小而選用不同口徑的微吸管將所需蟲體挑選至已備好的培養(yǎng)皿或多孔凹玻片內(nèi)(對于蟲體數(shù)量不多時推薦后者)。當用多孔凹玻片分離蟲體時, 為防止干涸，分離后的玻片即應置于潮濕房內(nèi)?？梢暻闆r選擇不同的培養(yǎng)方式如不能立刻分離時, 則建議加培養(yǎng)水(或清潔水)至樣品內(nèi)(至少等量)以稀釋并暫于低于原水環(huán)境5-10℃的培養(yǎng)箱內(nèi)保

9、存(但此步不應超過24小時)。對土壤樣本則可取土樣數(shù)克入10-12cm之培養(yǎng)皿內(nèi), 加入培養(yǎng)水, 24小時后解剖鏡下觀察, 或?qū)⑺约啿紴V出后觀察, 并挑取蟲體進行分離。</p><p>　　一經(jīng)分離后即刻應對分離標本進行編號，以備查。</p><p>　　培養(yǎng)：根據(jù)培養(yǎng)蟲體的單一程度可至少將培養(yǎng)類型分為三種, 即粗培養(yǎng), 純培養(yǎng)和克隆培養(yǎng), 使用者可根據(jù)所需選取其適用的方式。一般說來，

10、對于做分類區(qū)系或生態(tài)學研究中的種類鑒定時, 可優(yōu)先考慮選用前兩者，而從事分子生物學、細胞發(fā)生、種下關(guān)系的研究或存疑種的鑒定時則可主要采用后兩種方法。</p><p><b>　　活體觀察：</b></p><p>　　用毛細吸管吸一小滴蟲體(液量盡可能少! 以將蓋玻片壓至極限而水不至于自四邊溢出為度)于載玻片上, 加蓋玻片(四周涂以少許凡士林以避免直接壓在蟲體上)；觀

11、察與標本原始數(shù)據(jù)的記錄（采集地、日期、編號），在低倍鏡下測量 (應至少選取大、中、小三個不同個體以得到蟲體變幅的信息), 觀察并記錄蟲體的大小、外形(尤其應注意個體間的外形差異, 同一個體之外形變化以及同一蟲體之具體不同部位的變化特征)、運動特征(主要包括蟲體運動特征，纖毛器的運動特征，游泳的體位變化);中倍鏡下觀察(輕壓蓋玻片以減緩蟲體運動): 纖毛及纖毛器(長度,分布和排列特征等), 伸縮泡(位置/數(shù)目以及形成過程，排空間歇時間，有

12、無收集管等)、內(nèi)質(zhì)情況(有無特殊的油球、空泡、結(jié)晶體、食物泡數(shù)目/分布特征等)、色素體的有無及體色。油鏡下觀察(輕壓蓋玻片至蟲體無法運動為止), 此時應特別注意細胞的表膜結(jié)構(gòu)、纖毛特征、射出體的有無/分布/形態(tài)、伸縮泡的形成及變化過程、食物泡和內(nèi)質(zhì)/表膜下顆粒分布特點等分類學特征。</p><p>　　觀察所用光學顯微鏡以微分干涉顯微鏡為最好, 如以相差顯微鏡, 推薦正低相差為佳(PL positive low

13、), 若僅有明視野觀察則可通過改變數(shù)值光欄以詳細觀察表膜結(jié)構(gòu)。</p><p><b>　　記錄：</b></p><p>　　在記錄用紙上對所觀察標本予以編號 （如1999-12-5-01）（同時盡可能給出一日后可辨別的名稱）</p><p>　　采集人，地點，日期，生境特征（鹽度、水溫、pH等）</p><p>&l

14、t;b>　　技術(shù)路線</b></p><p>　　四、研究的總體安排與進度：</p><p>　　2010年10月—2010年12月：</p><p>　　1.實驗前的準備工作：查找資料，對實驗內(nèi)容做初步的了解；</p><p>　　2.實驗儀器和藥品的準備；</p><p><b>　　3

15、.取樣；</b></p><p>　　4.完成開題報告及任務書。</p><p>　　2011年11月—2011年2月：</p><p>　　撰寫文獻綜述及翻譯英文文獻</p><p>　　2011年2月—2010年3月：</p><p><b>　　撰寫初稿。</b></p&g

16、t;<p>　　2010年4月—2010年5月：</p><p>　　1.初稿經(jīng)指導老師指正后進行修改和完善；</p><p>　　2.畢業(yè)論文定稿，準備答辯。</p><p><b>　　五、主要參考文獻：</b></p><p>　　[1]張毅強.近代獸醫(yī)原生動物學的分類概況[J].廣西畜牧獸醫(yī)2005

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