納米tio2對斑馬魚肝損傷基因表達的影響【開題報告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報告</b></p><p><b>　　生物技術</b></p><p>　　納米TiO2對斑馬魚肝損傷基因表達的影響</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><p>　　納米技術是當今高科技發(fā)展中最快的領域之一，大約超過200種的納米材料被用于

2、個人、商業(yè)、醫(yī)藥和軍事等領域。隨著納米材料所帶來的利益的同時，對納米材料釋放到環(huán)境中并對環(huán)境及生物所造成的潛在毒性也受到越來越多學者的關注。有研究表明，當宏觀物質(zhì)被粉碎成納米級超微顆粒后，其諸多方面的性質(zhì)均發(fā)生了根本性改變，納米顆粒特殊的理化性質(zhì)（如小尺寸效應、表面效應、量子尺寸效應和宏觀量子隧道效應等） 使其與宏觀材料在生物活性和生物動力學過程等方面產(chǎn)生了明顯差異，因此對機體產(chǎn)生的生物效應和作用強度也發(fā)生了本質(zhì)上的改變，一些原本無毒或

3、微毒的顆粒粒徑達到納米級時毒性明顯增強，一些原本無害的材料在達到納米級時可能會對人體產(chǎn)生各種潛在危害（汪冰等，2005；朱融融等，2007）. 常規(guī)二氧化鈦（TiO2） 是一種低毒粉塵，在許多粉塵的毒理學研究中往往被用作無毒的對照粉塵，然而當其達到納米級時（納米TiO2）其毒性明顯增強. 研究表明，納米TiO2 染毒后可在肝大量富集，肝是納米TiO2 在生物體內(nèi)的主要靶器官（王江雪等，2008）</p><p>

4、　　目前研究納米TiO2顆粒對生物的影響及生物效應的受試生物主要為小鼠和細胞,對水生生物的效應研究較少,更未見有研究納米TiO2對魚肝損傷及相關基因表達的報道.然而, 使用納米材料可能導致排放到水環(huán)境 ，并危及水生物與水生生態(tài)系統(tǒng).斑馬魚除了具有經(jīng)濟、觀賞價值外，還被廣泛應用于發(fā)育生物學、毒理學、分子生物學等研究，被喻為理想的分子生物學的脊椎動物模型，具有很高的科研價值, 是外界環(huán)境變化，如重金屬鹽類、農(nóng)藥、工業(yè)污水、放射性物質(zhì)等對人類

5、影響的良好研究材料。本項目希望通過納米TiO2對斑馬魚肝損傷及其相關基因表達的研究,為該領域的研究提供參考,積累數(shù)據(jù),更為深入了解納米TiO2 的毒性及其機制提供基礎依據(jù).</p><p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題：</p><p><b>　　研究的基本內(nèi)容：</b></p><p>　　從轉(zhuǎn)錄水平研究TiO2對魚的生物需效應

6、，包括RNA含量的測定；</p><p>　　從分子水平研究TiO2對魚的生物學效應，如測定相關基因的表達。</p><p><b>　　擬解決的主要問題：</b></p><p>　　如何提取出比較純的斑馬魚肝，并將其在液氮中完善的保存一段時間。</p><p>　　用液氮研磨法提取出比較純凈的RNA。</p&g

7、t;<p>　　以Actin作內(nèi)參配制等濃度的RNA量</p><p><b>　　引物的設計。</b></p><p>　　熟練運用RT-PCR技術及瓊脂糖凝膠電泳技術檢測待測基因的表達情況。</p><p>　　三、研究的方法與技術路線：</p><p>　　研究的方法：對斑馬魚進行納米材料TiO2的染

8、毒培養(yǎng)，提取出斑馬魚肝中的RNA，以Actin作內(nèi)參配制等濃度的RNA量，RT-PCR技術及瓊脂糖凝膠電泳技術檢測待測基因的表達情況。</p><p><b>　　技術路線：</b></p><p>　　四、研究的總體安排與進度：</p><p>　　2010年11月到2010年12月：查閱相關文獻，了解實驗原理與實驗過程。</p>

9、<p>　　2011年2月到2011年3月，RNA的提取，跑RT-PCR。</p><p>　　2011年3月到2011年4月，后期數(shù)據(jù)的處理。</p><p><b>　　五、主要參考文獻：</b></p><p>　　[1] 朱融融, 汪世龍, 孫曉宇, 等. β-CD 對納米TiO2 引發(fā)DNA 損傷的抑制效應及其機理[J]

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