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文檔簡介
1、本文以原生動物為靶生物的毒性實(shí)驗(yàn)顯示:雌二醇(E2)對生物群落12h急性毒性最大無致死和最小全致死濃度范圍是1-150mg/L;半致死濃度為67.4mg/L;長時間暴露在低劑量E2時會使原生動物群落變得單一。
本文從南京污水處理廠的活性污泥中分離到l株E2高效降解菌株。通過形態(tài)及生理生化鑒定,確定該菌株為肺炎克雷伯菌(K.pneum.pneumoniae)。菌株生長和降解特性分析表明,在1mg/L E2的液體培養(yǎng)基中,反應(yīng)
2、72h后,E2的降解率達(dá)到89.8%;菌株生長和降解的最適溫度、pH和濃度分別為30℃、7.0和1-2mg/L。金屬離子Fe3+、Na+、Ca2+對菌株生長以及降解能力的影響不大;Zn2+、Mn2+、Cu2+、Ag+的影響較大;葡萄糖、乳糖有助于菌體的生長和E2的降解,淀粉沒有影響;蛋白胨、酵母有助于E2的降解,降解率分別達(dá)到了83%、85%;硫酸銨并沒有顯著影響。
對降解酶的定位顯示:胞內(nèi)酶對E2具有較好的降解作用,為誘
3、導(dǎo)性酶。酶促反應(yīng)最適條件:溫度30℃、pH7.0(蛋白含量266.67μg/mL,反應(yīng)時間30min)。過酸過堿的環(huán)境會導(dǎo)致酶提取液不穩(wěn)定。該酶蛋白在30.35℃時熱穩(wěn)定性良好,但溫度高于35℃,酶活性降低,熱不穩(wěn)定;溫度低于15℃,酶逐漸失活。
酶提取液降解動力學(xué)分析得到,酶促反應(yīng)的Vmax為0.265mmol/h,Km為3.68×4mol/L,Km值較小,說明該酶提取液對E2的親和力較強(qiáng),經(jīng)不斷培養(yǎng)和馴化后,可快速有效
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