降解秸稈微生物菌種的篩選及高效菌群的構(gòu)建.pdf

1、為了獲得高效降解纖維素的混合菌群，以解決秸稈類固廢污染和秸稈資源有效利用的問題，本試驗進(jìn)行了纖維素降解菌的篩選及其降解效果研究。
　　高效纖維素降解菌群的篩選：采用剛果紅纖維素瓊脂平板培養(yǎng)基，從土壤樣品中初步篩選纖維素降解菌，對降解作用較好的菌株，再以內(nèi)切酶(CMC)、纖維素全酶(FPA)、外切酶(C1)和β-葡萄糖苷酶(β-Gase)4種酶活性指標(biāo)進(jìn)行復(fù)篩。對復(fù)篩獲得的高效菌株進(jìn)行混合培養(yǎng)，分別測定比較組合菌群的CMC、FPA、

2、C1和β-Gase4種酶活性，篩選出高效纖維素降解菌群。
　　產(chǎn)酶影響因素研究：將構(gòu)建菌群ye-9/er-72/se-93接種于液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，連續(xù)培養(yǎng)7 d，測定不同時間、溫度、pH、碳源和氮源條件下其酶活性。
　　菌群的纖維素降解能力測定：采用失重法和掃描電鏡分析對菌群降解玉米秸稈的能力進(jìn)行試驗研究。
　　菌種鑒定：對ye-9，er-72和se-933株菌進(jìn)行形態(tài)鑒定以及分子鑒定。
　　通過上述實驗得到以下

3、結(jié)果：
　　高效纖維素降解菌群的篩選：篩選獲得了y3、yi-71、ye-9、er-72和se-93等5株活性較高的纖維素降解菌。對5株纖維素降解菌進(jìn)行組合培養(yǎng)，得到1個最好組合ye-9/er-72/se-93，其CMC、FPA、C1和β-Gase4種酶活分別為3.18，1.67，1.08和1.12U/mL，均比單菌株時有一定程度提高。
　　產(chǎn)酶影響因素研究：結(jié)果顯示，該菌群最適產(chǎn)酶時間是第4 d，最適產(chǎn)酶溫度是40℃，最適產(chǎn)

4、酶pH值是7.5，最適產(chǎn)酶碳源為玉米秸稈，最適產(chǎn)酶氮源為NaNO3。
　　高效降解菌群的纖維素降解能力測定：到第8 d培養(yǎng)結(jié)束時纖維素降低了24.07％，半纖維素降低了28.31％，木質(zhì)素降低了18.39％。通過比較電鏡掃描圖片可以看出菌群ve-9/er-72/se-93對玉米秸稈的降解能力強于單菌株。
　　菌種鑒定：ye-9為鏈霉菌屬的鯉鏈霉菌(Streptomyces carpaticus)，er-72為灰略紅鏈霉菌(S