殺蟲(chóng)劑啶蟲(chóng)脒的高效降解微生物篩選及代謝研究.pdf

1、啶蟲(chóng)脒（acetamiprid）是日本曹達(dá)公司發(fā)現(xiàn)并開(kāi)發(fā)的一種氯代煙堿類殺蟲(chóng)劑。該殺蟲(chóng)劑殺蟲(chóng)譜廣，活性高、用量少、持效長(zhǎng)而且速效。它對(duì)害蟲(chóng)具有觸殺和胃毒作用，并具有卓越的內(nèi)吸活性。由于啶蟲(chóng)脒的作用機(jī)理與目前常用殺蟲(chóng)劑不同，所以對(duì)有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類及合成擬除蟲(chóng)菊酯類具有嚴(yán)重抗性的害蟲(chóng)有特效，是世界范圍內(nèi)廣泛使用的有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑的理想替代品。隨著對(duì)該殺蟲(chóng)劑研究的不斷展開(kāi)，該殺蟲(chóng)劑的毒性日益顯現(xiàn)。啶蟲(chóng)脒低濃度下會(huì)影響蜜蜂對(duì)刺激的靈敏度以及損

2、傷蜜蜂的長(zhǎng)期記憶；體外實(shí)驗(yàn)中啶蟲(chóng)脒顯示出對(duì)人體外周血淋巴細(xì)胞的基因毒性以及細(xì)胞毒性。因而有必要掌握啶蟲(chóng)脒在環(huán)境中殘留的處理方法，減少其對(duì)環(huán)境的潛在危害?，F(xiàn)階段對(duì)于啶蟲(chóng)脒的代謝研究，報(bào)道較多的是動(dòng)植物體內(nèi)及環(huán)境中，關(guān)于微生物代謝啶蟲(chóng)脒的報(bào)道還很少。本課題研究目的是篩選高效降解啶蟲(chóng)脒的微生物，以期將啶蟲(chóng)脒降解為對(duì)環(huán)境無(wú)毒害作用的物質(zhì)，同時(shí)，對(duì)啶蟲(chóng)脒代謝產(chǎn)物進(jìn)行研究，探究啶蟲(chóng)脒的微生物代謝途徑。
　　本研究建立了一種篩選高效降解啶蟲(chóng)脒微

3、生物的實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)篩選出的高效降解菌株進(jìn)行了鑒定，對(duì)該菌的降解活力進(jìn)行了研究。確定了啶蟲(chóng)脒降解產(chǎn)物的分子式及分子結(jié)構(gòu)，對(duì)該菌株降解啶蟲(chóng)脒的條件進(jìn)行了優(yōu)化。
　　實(shí)驗(yàn)建立了使用薄層層析（TLC）定性檢測(cè)及高效液相色譜（HPLC）定量檢測(cè)啶蟲(chóng)脒的檢測(cè)方法，使用TLC對(duì)啶蟲(chóng)脒進(jìn)行定性檢測(cè)，可用于篩菌實(shí)驗(yàn)初期對(duì)培養(yǎng)基中啶蟲(chóng)脒濃度變化做出快速檢測(cè)；而使用HPLC的定量檢測(cè)方法，可用于對(duì)已篩選出微生物的降解能力進(jìn)行衡量。
　　對(duì)于菌株的

4、鑒定，實(shí)驗(yàn)從培養(yǎng)基中菌落形態(tài)、顯微鏡下微觀形態(tài)、16S rDNA基因序列分析、全細(xì)胞脂肪酸分析幾方面綜合進(jìn)行。最終確定該菌為一株革蘭氏陰性菌，具有極生鞭毛，菌體為短桿狀，長(zhǎng)約1μm，寬約0.5μm，為寡養(yǎng)單胞菌屬的一種。
　　使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）檢測(cè)儀，對(duì)啶蟲(chóng)脒降解產(chǎn)物進(jìn)行了研究，結(jié)合核磁共振檢測(cè)結(jié)果，最終確定了降解產(chǎn)物分子量為156 Da，分子式為Cl-C5H3N-CH2-NH-CH3。該物質(zhì)與已有報(bào)道的啶蟲(chóng)脒在