DDT降解菌的分離鑒定及其降解特性研究.pdf

1、本文以有機氯殺蟲劑DDT作為研究對象，通過對廣州某船場DDT污染場地的土樣進行微生物富集培養(yǎng)和分離篩選，得到8株能降解DDT的菌株，對其進行了形態(tài)學、生理生化特性及脂肪酸鑒定和16S rDNA分子生物學鑒定，并對8株菌的生長和降解特性的進行了初步研究，主要研究內容如下：
　　通過微生物富集培養(yǎng)和平板劃線分離法，從DDT污染土壤中分離出8株能以DDT為唯一碳源進行生長的DDT降解菌。通過形態(tài)結構、生理生化特性、脂肪酸分析及16S r

2、DNA分子生物學方法，分別對這8株菌進行了鑒定。結果菌株5＃、6＃屬于代爾夫特菌屬(Delftia sp.)，菌株20＃屬于Thauera sp.，菌株12-1＃屬于產堿桿菌屬(Alcaligenes sp.)，菌株23＃、24＃、12-2＃、12-3＃屬于假單胞菌屬(Pseudomonas sp.)。
　　利用高效液相色譜儀建立 DDT分析條件，確定分析溫度為25℃，流動相是99.9％的甲醇，流速為1 ml/min，探測在254

3、 nm處的峰值。根據外標法測定8株菌對DDT的最終降解率，在30℃，pH7.0，DDT濃度為20 mg/L的培養(yǎng)條件下，8株菌均對DDT有一定的降解效果，且最終降解率均達到10%以上，其中菌株12-3＃對DDT的最終降解率最高，培養(yǎng)8 d后達到51.6%。
　　利用比濁法對8株菌的生長狀況進行研究，繪制其生長曲線，結果表明8株菌都能利用DDT生長。菌株5＃、6＃、23＃、12-1＃生長速率較快，在12 h時達到最大吸光值，即菌體密

4、度達到最大值，隨后進入穩(wěn)定生長期；菌株20＃和24＃生長速率較慢，分別在22 h和28 h達到最大菌體密度；菌株12-2＃和12-3＃生長速率較最慢，在培養(yǎng)30 h時達到最大菌體密度。利用高效液相色譜法對8株菌的降解狀況進行研究，繪制其降解曲線，結果表明在30℃，DDT濃度為20 mg/L，150 r/min搖床振蕩培養(yǎng)8 d的條件下，8株菌均能在不同程度上降解DDT，其中12-3＃菌對DDT的最終降解率最高。
　　采用考馬斯亮藍