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文檔簡(jiǎn)介
1、銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa)是一類(lèi)常見(jiàn)的淡水區(qū)域藍(lán)藻,頻繁在夏季形成水華并產(chǎn)生一系列嚴(yán)重的水環(huán)境問(wèn)題。微囊藻具有較強(qiáng)的浮力調(diào)節(jié)能力是其在富營(yíng)養(yǎng)化湖泊中形成競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的主要因素之一。M.aeruginosa PCC7806胞外分泌蛋白MrpC具懸浮特性,被認(rèn)為是重要的潛在浮力影響因子。深入研究MrpC將有助于進(jìn)一步認(rèn)識(shí)藍(lán)藻,對(duì)水華的形成與防治具有重要意義。本研究的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
(1)實(shí)驗(yàn)室
2、培養(yǎng)條件下只觀(guān)察到M.aeruginosa PCC7806藻細(xì)胞呈單細(xì)胞狀態(tài),即使體外添加500μg/ml MrpC,推測(cè)MrpC缺乏細(xì)胞聚集能力。通過(guò)熒光顯微鏡觀(guān)察的MrpC-FITC與藻細(xì)胞結(jié)合分析,表明MrpC與藻細(xì)胞之間無(wú)明顯結(jié)合。MrpC除了能阻止細(xì)胞或微粒下沉外,對(duì)鈍頂螺旋藻細(xì)胞的上浮也具阻礙作用。隨著MrpC濃度增加,螺旋藻的上浮速率呈梯度減緩,當(dāng)MrpC濃度達(dá)到500μg/ml時(shí),螺旋藻的懸浮狀態(tài)可維持144h以上,說(shuō)明
3、MrpC有助于保持細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性。MrpC會(huì)降低M.aeruginosa PCC7806藻細(xì)胞絮凝反應(yīng)效率:與無(wú)MrpC的對(duì)照組相比,含MrpC的實(shí)驗(yàn)組生成絮凝體比較疏松,絮凝體生成速率以及沉降速率都較小。
(2)通過(guò)替代常規(guī)的保護(hù)劑,利用化學(xué)還原法合成納米銀顆粒實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)了MrpC也能保持納米銀顆粒良好的懸浮穩(wěn)定性和分散穩(wěn)定性。增大MrpC濃度有利于獲得粒徑較小的納米銀顆粒。當(dāng)銀離子濃度為0.1mM,MrpC濃度為100m
4、g/L時(shí),獲得納米銀顆粒平均直徑約10nm。
(3)圓二色光譜(CD)測(cè)定MrpC二級(jí)結(jié)構(gòu)為:α-螺旋結(jié)構(gòu)占87.7%,β-轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)占12.3%。透射電鏡顯示溶液中MrpC呈纖維狀聚集,單束直徑約13nm而長(zhǎng)度可達(dá)幾十甚至幾百微米。通過(guò)透射電鏡觀(guān)察到MrpC形成了明顯的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),并證實(shí)了形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)是其具懸浮穩(wěn)定性的主要原因。
(4)Western blotting檢測(cè)到夏季野外水華水樣中有微弱的MrpC信號(hào)。通過(guò)
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