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文檔簡介
1、本研究從蘆葦(Phragmites australias)根內(nèi)分離到一株鉛、鎘耐受性較強的彎孢屬真菌C12,利用形態(tài)觀察和分子生物學相結(jié)合的方法將其鑒定;進而采用固體和液體兩種培養(yǎng)方法研究了不同鉛(Pb2+)(0~1200 mg/L)和鎘(Cd2+)(0~320 mg/L)質(zhì)量濃度下該菌生長的變化,并比較了該菌培養(yǎng)液中pH值和有機酸含量、以及菌絲內(nèi)谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)等含量的變化,以評估該菌株對重金屬鉛、鎘的耐受能力,初
2、步分析和探討其鉛、鎘耐受性的相關(guān)機制。該研究表明真菌在重金屬污染修復中有著巨大的應用潛力,可為揭示真菌的重金屬抗性機制及在重金屬污染治理中的應用提供理論依據(jù)。
主要研究結(jié)論如下:
1.分離到一株鉛、鎘耐受性較強的彎孢屬真菌C12并將其鑒定為津田彎孢(Curvularia tsudae);
2.津田彎孢C12具有較高的鎘耐受性,在Cd2+質(zhì)量濃度高達320 mg/L時仍有菌絲生長,且液體培養(yǎng)條件下菌絲生長和鎘
3、耐受性都明顯優(yōu)于固體培養(yǎng)。固體培養(yǎng)條件下,不產(chǎn)生菌絲圈,菌絲干質(zhì)量隨Cd2+脅迫的增加呈現(xiàn)先增加后又逐漸降低的趨勢,并在20 mg/L Cd2+脅迫下達到最大(P<0.05);液體培養(yǎng)時菌絲球米白色,表面光滑不形成刺突,菌絲干重卻隨Cd2+脅迫的增加呈現(xiàn)逐漸降低(P<0.05)的趨勢;
3.Cd2+脅迫下,津田彎孢C12培養(yǎng)液中共檢測到檸檬酸、蘋果酸、乙酸和琥珀酸四種有機酸,未檢測到草酸和酒石酸;其中,檸檬酸和蘋果酸的含量較高
4、,琥珀酸僅在Cd2十濃度為80~320 mg/L時才產(chǎn)生。隨Cd2+濃度的增加,這四種有機酸的含量以及菌絲內(nèi)的GSH含量均有先增加后降低的趨勢,且有機酸總量在160 mg/L Cd2+脅迫下增至最大(P<0.05),但培養(yǎng)液的pH值并無顯著變化(P>0.05),都顯著低于不加鎘的對照(P<0.05)。菌絲內(nèi)的MDA含量則隨Cd2+濃度的增加先增加再降低后又升高,但差異并不顯著(P>0.05)。因此,GSH和有機酸(檸檬酸、蘋果酸和琥珀酸
5、)的大量積累可能是該菌減少鎘毒害,提高鎘耐受性的潛在機制之一;
4.津田彎孢C12對重金屬鉛也有較高的耐受性,在Pb2+質(zhì)量濃度為1200 mg/L時仍生長良好。固體培養(yǎng)時,鉛脅迫下產(chǎn)生菌絲圈,菌絲干質(zhì)量隨Pb2+質(zhì)量濃度的增加而先增加后降低,在400 mg/L Pb2+脅迫時達到最大(P<0.05);而液體培養(yǎng)時菌絲球黑色且形成刺突,0~800 mg/L Pb2+脅迫時菌絲球干質(zhì)量沒有顯著變化(P>0.05),在1200mg
6、/L時比400 mg/L的菌絲干質(zhì)量下降了37%(P<0.05),比對照下降了24%(P>0.05);
5.Pb2+脅迫下,津田彎孢C12培養(yǎng)液除草酸外未檢測到其他有機酸,且草酸含量隨Pb2+濃度的增加呈顯著上升的趨勢(P<0.05),并在1200 mg/L Pb2+質(zhì)量濃度下達到最大(21.2 mg/mL),但培養(yǎng)液的pH值并無顯著變化(P>0.05),都顯著低于不加鉛的對照(P<0.05)。菌絲內(nèi)的GSH含量隨Pb2+質(zhì)量
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