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1、方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例,長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,序言,方劑實(shí)驗(yàn)課,可提高學(xué)生的現(xiàn)代化意識(shí)、創(chuàng)新意識(shí),并可培養(yǎng)其科研能力與動(dòng)手能力,是適應(yīng)時(shí)代發(fā)展而培養(yǎng)現(xiàn)代型中醫(yī)人才的需要。為了配合方劑實(shí)驗(yàn)課,使學(xué)生初步了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程,我們
2、拍攝了部分方劑實(shí)驗(yàn)觀察的視聽(tīng)教材,以供使用。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 麻黃湯、桂枝湯均為發(fā)汗解表劑,麻黃湯主要用于外感風(fēng)寒引起的太陽(yáng)表實(shí)證,桂枝湯主要用于外感風(fēng)
3、寒引起的太陽(yáng)表虛證。兩者皆能發(fā)汗,但有強(qiáng)弱之分,通過(guò)麻黃湯、桂枝湯在發(fā)汗作用方面的比較,認(rèn)識(shí)麻黃湯為發(fā)汗之峻劑,從而在臨床上能更好地選擇應(yīng)用二方。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較,[實(shí)驗(yàn)器材]
4、 ①藥物:麻黃湯:麻黃50g、桂枝30g、杏仁30g、炙甘草30g;桂枝湯:桂枝50g、芍藥50g、生姜45g、炙甘草30g、大棗70g;制劑制備:洗凈藥材,煎煮三次,合并煎液,然后濾紙過(guò)濾。制劑濃縮為50%的煎液,pH值為6—7;生理鹽水適量;②動(dòng)物:小白鼠;③實(shí)驗(yàn)用品:注射器(1ml)、針頭(5號(hào))、臺(tái)式天平、鼠籠。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
5、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較,[實(shí)驗(yàn)方法] 取小白鼠30只,隨機(jī)分為麻黃湯組、桂枝湯組、生理鹽水組,每組10只。分別給小白鼠腹腔注射0.25ml/10g的藥液或生理鹽水。 給藥后20分鐘,觀察三組小白鼠出汗情況。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
6、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
7、長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,小青龍湯平喘作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 小青龍湯為辛溫解表之劑,又為平喘之良方,本實(shí)驗(yàn)主要觀察該方的平喘作用。用組織胺噴霧致敏,引起豚鼠哮喘,觀察小青龍湯的平喘作用。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,小
8、青龍湯平喘作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)器材] 200g左右的豚鼠若干只、噴霧玻璃鐘罩(直徑約20-25cm,高20cm)、噴霧器(也可用空氣壓縮機(jī)代用、但要加測(cè)壓器以檢測(cè)進(jìn)氣的壓力)、秒表,0.4%磷酸組織胺溶液(即40mg磷酸組織胺加水10ml)、注射器(10ml、5ml)、生理鹽水、玻璃噴霧頭一只;小青龍湯制劑:每ml含1g生藥:麻黃10g、芍藥10g、五味子10g、半夏10g、干姜10g、炙甘草10g、細(xì)辛10g、
9、桂枝10g;先加水600ml煎至120ml左右,去渣,加70%酒精100ml,沉淀24小時(shí),次日把沉淀后藥汁經(jīng)抽濾瓶抽濾后放在60℃恒溫水浴鍋中蒸發(fā)濃縮至80ml。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,小青龍湯平喘作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)方法]
10、 ①實(shí)驗(yàn)前l(fā)天,先作初步篩選,將豚鼠逐一放在玻璃鐘罩內(nèi),在恒溫下噴入0.4%磷酸組織胺液,持續(xù)噴60秒,然后密切觀察豚鼠反應(yīng),若在2.5分鐘內(nèi)抽搐跌倒,表明該豚鼠對(duì)磷酸組織胺敏感,可以選用;反之。若超過(guò)2.5分鐘不跌倒則為不敏感,不予選用;②每次實(shí)驗(yàn)都用豚鼠2只,分別涂上不同顏色作標(biāo)記,然后分別腹腔注射小青龍湯1.5ml和生理鹽水1.5ml,半小時(shí)后放入鐘罩內(nèi)并噴入組織胺1分鐘,觀察二組豚鼠引喘反應(yīng)。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
11、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,小青龍湯平喘作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
12、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 大承氣湯是峻下熱結(jié)的主方,適用于以“痞、滿、燥、實(shí)”等癥狀為主的陽(yáng)明腑實(shí)證。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定10%炭末的大承氣湯在胃腸道內(nèi)的移動(dòng)速度,觀察此方對(duì)胃腸道蠕動(dòng)功能的影響。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
13、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)器材] ①藥物:大承氣湯:大黃30g、芒硝l0g、枳實(shí)20g、厚樸20g;制劑制備:將大承氣湯水煎液配制成10%炭末的大承氣湯藥液,10%炭末生理鹽水混懸液適量;②動(dòng)物:小白鼠;③實(shí)驗(yàn)用品:灌胃器、尺子、解剖器械、天平。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
14、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)方法] ①取空腹24小時(shí)的小白鼠10只(18—22g)分為二組,稱重、編號(hào);②灌胃:大承氣湯藥液和生理鹽水混懸液用量均為0.2ml/10g,每灌1只,記錄下時(shí)間;③20分鐘后,處死小白鼠,打開(kāi)腹腔,取出腸管,分離
15、腸系膜,將腸管拉成直線,以幽門(mén)為起點(diǎn),量出炭末移動(dòng)距離和小腸的總長(zhǎng)度;④計(jì)算每只小白鼠炭末在腸內(nèi)移動(dòng)的距離占小腸全長(zhǎng)的百分率為: 碳末移動(dòng)的距離 ×100% 小腸的總長(zhǎng)度,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
16、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
17、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 十棗湯具有攻逐水飲的作用,通過(guò)觀察十棗湯對(duì)腸管蠕動(dòng)的影響,以探討其瀉下攻逐的作用。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
18、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響,[實(shí)驗(yàn)器材] ①動(dòng)物:家兔1只;②藥物:芫花、甘遂、大戟、大棗制成100%濃度十棗湯煎液;③實(shí)驗(yàn)用品:麥?zhǔn)显〔?、恒溫水浴箱、二?dǎo)生理記錄儀、萬(wàn)能杠桿、溫度計(jì)、滴管、燒杯、臺(tái)氏液。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
19、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響,[實(shí)驗(yàn)方法] ①先裝好一套麥?zhǔn)显〔?,浴槽?nèi)盛38℃臺(tái)氏液,將充滿空氣的球胎經(jīng)由橡皮管連至麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤苌?,調(diào)節(jié)橡皮管上的螺絲皮管夾,使氣泡一個(gè)一個(gè)地不斷地通至浴槽,以供氧氣;②用木錘猛擊兔頭部,使其昏迷后,剖開(kāi)腹腔,在靠十
20、二指腸附近,取出一段3-4cm長(zhǎng)的小腸,迅速將該段小腸一端的一結(jié)扎線結(jié)于乙型通氣管彎頭上,小腸另一端的結(jié)扎線系于杠桿上;,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響,[實(shí)驗(yàn)方法] ③將浴槽放在盛水的恒溫水
21、浴箱內(nèi),使臺(tái)氏液溫度保持在38-40℃之間;④記錄腸段在38-40℃臺(tái)氏液中的運(yùn)動(dòng)曲線;⑤待臺(tái)氏液穩(wěn)定,描記一段腸段正常運(yùn)動(dòng)曲線后滴加100%十棗煎液l0ml于浴槽中,觀察腸活動(dòng)的改變并做好標(biāo)記。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,十棗
22、湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果] 實(shí)驗(yàn)完畢后,將結(jié)果剪貼在實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙上并分析之。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 發(fā)熱是外感熱病過(guò)程中十分
23、重要的癥狀和體征,通過(guò)運(yùn)用銀翹散、白虎湯、大承氣湯對(duì)發(fā)熱動(dòng)物模型的解熱實(shí)驗(yàn),分析比較各種方劑的不同解熱作用,增強(qiáng)對(duì)銀翹散、白虎湯、大承氣湯的感性認(rèn)識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作能力,從而加深對(duì)“汗”、“清”、“下”三法的理解,了解其對(duì)臨床和科研的指導(dǎo)意義。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
24、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察,[實(shí)驗(yàn)器材] ①藥物:銀翹散:銀花,連翹,桔梗,薄荷,竹葉,生甘草,荊芥,淡豆豉,牛蒡子,蘆根。白虎湯:石膏,知母,甘草,粳米。大承氣湯:大黃,芒硝,枳實(shí),厚樸。傷寒或副傷寒菌苗及生理鹽水。②動(dòng)物:家兔(每只要求1.5kg以上)。③實(shí)驗(yàn)用品:肛表,嬰兒秤,兔固定架,注射器(1ml、20ml),酒精棉球,胃管,灌胃開(kāi)口器,量杯,石蠟油。,方劑學(xué)
25、實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察,[實(shí)驗(yàn)方法] ①給家兔逐一測(cè)體溫。每次取家兔1只,待安靜后將兔臀部抬高,右手拿肛表,將水銀柱甩到35°C以下,末端涂石蠟油少許,插入兔肛門(mén),
26、深度5cm,3分鐘后取出讀取體溫度數(shù);,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察,[實(shí)驗(yàn)方法] ②用上法選取肛溫在38.3-39.6℃的家兔4只,編號(hào),稱體重,觀察其正常表現(xiàn),分別給家兔靜脈
27、注射傷寒副傷寒菌苗lml/kg,使之發(fā)熱,待肛溫升高超過(guò)1℃后(約需經(jīng)0.5-1小時(shí))再分別灌胃給藥,甲兔用100%銀翹散煎液20ml/kg,乙兔用100%白虎湯煎液20ml/kg,丙兔用100%大承氣湯20ml/kg,丁兔用等量生理鹽水。給藥后30、60、120分鐘各測(cè)肛溫一次,比較各兔給藥前后肛溫的變化。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
28、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察,[注意事項(xiàng)]測(cè)溫時(shí)操作盡量柔和,勿使家兔掙扎,以免引起體溫波動(dòng)同一兔用同一肛表,測(cè)肛溫時(shí)將肛溫表水銀柱甩在35℃以下測(cè)量條件要一致家兔擇健康、體重在1.5kg以上,體溫在38.3—39.6℃為宜3小時(shí)后,凡肛溫上升0.8℃以上的家兔應(yīng)予剔除,然后按編號(hào)分組,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
29、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
30、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 四逆加人參湯具有回陽(yáng)救逆作用,適用于陽(yáng)氣暴脫之厥證,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)離體蛙心縮的影響觀察,了解其強(qiáng)心作用。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
31、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響,[實(shí)驗(yàn)器材] ①動(dòng)物:蟾蜍;②藥品:四逆加人參湯:制附子10g、人參10g、干姜10g、炙甘草6g,任氏液適量;③實(shí)驗(yàn)用品:二導(dǎo)生理記錄儀、蛙心夾杠桿、蛙心插管、試管夾、線、雙凹夾、鐵支架、蛙手術(shù)器械、滴管。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
32、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響,[實(shí)驗(yàn)方法] ①離體蟾蜍蛙心臟的制備: 取蟾蜍1只,破壞腦和脊髓,暴露心臟,在左側(cè)主動(dòng)脈下穿兩根絲線,結(jié)扎右側(cè)和左側(cè)主動(dòng)脈上端的絲線,將左側(cè)下端絲線打一松結(jié)。在左側(cè)主動(dòng)脈結(jié)扎線下端,用小剪刀輕輕將主動(dòng)脈剪一小斜口,將盛有少量任氏液的蛙心插管由此斜口插入動(dòng)脈,然后將插管稍向后退再轉(zhuǎn)向心室中央的方向,插
33、入心室腔內(nèi),插管是否插入心室,可看插管中的任氏溶液面是否隨心搏而上、下移動(dòng)。如已進(jìn)入心室,則將松結(jié)的絲線扎緊,固定于蛙心插管的小突起上。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響,[實(shí)驗(yàn)方法]最后將蛙心與插管
34、一同提起,剪斷周?chē)浗M織后,在靜脈竇部位穿一絲線,并結(jié)扎,在結(jié)扎線以下剪斷軟組織,摘出心臟。吸出蛙心及插管內(nèi)血液,并用任氏液灌洗數(shù)次,以防血液凝固,堵塞插管。在蛙心尖部用蛙心夾夾住蛙心尖,夾蛙時(shí)注意在舒張期夾。將蛙心夾的線連于二導(dǎo)的換能器,作好描記曲線的準(zhǔn)備。 ②觀察:?jiǎn)㈤_(kāi)二導(dǎo)記錄裝置,描記正常蛙心收縮曲線,觀察心跳頻率和強(qiáng)度。將準(zhǔn)備好的四逆加人參湯溶液用滴管吸出后加兩滴于插管的任氏液中,觀察蛙心心跳變化,并做好記錄。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
35、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果] 將描記的曲線貼上。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
36、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 獨(dú)參湯大補(bǔ)元?dú)?,本?shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)小白鼠注射人參藥液和注射生理鹽水作一對(duì)照,以觀察在缺氧環(huán)境下抗御能力的差異。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
37、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)器材] ①藥物:1:1生曬人參水提液、生理鹽水適量;②動(dòng)物:18~20g小白鼠10只;③實(shí)驗(yàn)用品:250ml廣口瓶及橡皮塞各10只、注射器、針頭(6號(hào))、秒表、紗布、天平。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
38、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)方法] ①將生曬參以1:1濃度水煎至所需量,冷卻待用;②取小白鼠10只,分成二組。一組為實(shí)驗(yàn)組,一組為對(duì)照組并稱好體重,作好標(biāo)記;③將實(shí)驗(yàn)組小白鼠腹腔注射生曬人參藥液,以0.25ml/l0g的劑量;對(duì)照組注射等量的生理鹽水;④待用藥半小時(shí)后,將小白鼠放到廣口瓶?jī)?nèi),迅速用橡皮塞塞緊瓶口,同時(shí)按
39、下秒表;⑤仔細(xì)觀察小白鼠窒息致死的時(shí)間,并做好記錄。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
40、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 機(jī)體通過(guò)酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基,后者能攻擊生物膜中的多種不飽和脂肪酸,引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用,并因此形成脂質(zhì)過(guò)氧化物。脂質(zhì)過(guò)氧化作用不僅把活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑,通過(guò)鏈?zhǔn)交蛘哝準(zhǔn)街ф湻磻?yīng),放大活性氧的作用,因此初始的一個(gè)活性氧能導(dǎo)致
41、很多脂類分解產(chǎn)物的形成,這些分解產(chǎn)物中一些是無(wú)害的,另一些則能引起細(xì)胞代謝功能障礙,甚至死亡。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察四君子湯對(duì)小鼠肝組織勻漿MDA的作用以驗(yàn)證其功效。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響
42、,[實(shí)驗(yàn)器材] 1.動(dòng)物 小鼠,雌雄不限。 2.藥物 (1)四君子湯水煎液,1g生藥/ml。 (2)1號(hào)為10ml溶液,室溫保存,天冷時(shí)會(huì)凝固每次測(cè)試前適當(dāng)加溫以加 速溶解,直到透明方可應(yīng)用。 (3)2號(hào)試劑為10ml溶液,用時(shí)加290ml雙蒸水稀釋。 (4)3號(hào)為粉劑,用時(shí)加100ml雙蒸水,適當(dāng)加溫溶解。 (5)4號(hào)為標(biāo)準(zhǔn)品,為10nm
43、ol/ml的四氧基丙烷10ml。 3.實(shí)驗(yàn)用品 天平、試管、濾紙、可見(jiàn)光分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、勻漿器等。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響,[實(shí)驗(yàn)方法] 1.
44、小鼠10只,分為對(duì)照組和四君子組,對(duì)照組1g生理鹽水0.2ml/10g,四君子組1g黃芪水煎液0.2ml/10g,每日一次,共三天。 2.小鼠斷頭處死,取出部分肝組織,用濾紙吸干表面血液,稱重,在冰浴條件下用冰冷的生理鹽水制成10%肝勻漿; 3.按照以下步驟在試管中依次加入試劑:,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
45、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響,[實(shí)驗(yàn)方法],甲液的配制方法:1號(hào):2號(hào):3號(hào)=0.1:3:1乙液的配制方法:1號(hào):2號(hào):雙蒸水=0.1:3:1,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
46、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響,[實(shí)驗(yàn)方法]4.以上用旋渦混勻器混勻,沸水浴40分鐘,4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,吸取上清液,蒸餾水調(diào)零,1cm的杯子532nm處比色。5.計(jì)算測(cè)定管吸光度-測(cè)定空白管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-標(biāo)準(zhǔn)空白管吸光度 ×10μmol/L=測(cè)定樣品中丙二醛含量,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
47、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果] 將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表中:,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
48、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 SOD對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用,此酶能清除超氧陰離子自由基,保護(hù)細(xì)胞免受損傷,因而SOD的活力與衰老、腫瘤、炎癥、自身免疫、血液、心、腦血管病、腎病、消化系統(tǒng)疾病、輻射等有密切聯(lián)系,對(duì)疾病的病因?qū)W探討、診斷、治療、術(shù)后觀察有著重要的意義??蓽y(cè)血清、血漿、腦脊液、胸腹水、尿液
49、、紅白細(xì)胞、各種培養(yǎng)液中的SOD,并可檢測(cè)藥物、食品、化妝品中的SOD的活力;借黃嘌呤以及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基,后者氧化羥胺成亞硝酸鹽,在顯色劑的作用下呈紫紅色,而SOD則抑制此反應(yīng),根據(jù)抑制率的高低算出SOD的含量。 四君子湯可補(bǔ)中益氣,具有抗衰老的作用,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)四君子湯對(duì)小鼠血清SOD的影響以驗(yàn)證其抗衰老作用。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
50、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響,[實(shí)驗(yàn)器材] 1.動(dòng)物 小鼠,雌雄不限。 2.藥物 (1)黃芪水煎液,1g生藥/ml。 (2)R1一瓶80ml用時(shí)對(duì)倍稀釋,R2一瓶、R3一瓶、R4一支、0.9ml,用R19.9ml稀釋,4℃
51、保存。 (3)測(cè)定試劑的配制:R1:R2:R3=1:0.1:0.1,視需要量配制。 (4)R5、R6各一支、為粉劑,用時(shí)加雙蒸水100ml溶解后備用,配制后的試劑要避光冷藏保存。 (5)顯色劑的配制:R5:R6:冰醋酸=3:3:2,4℃保存。 3.實(shí)驗(yàn)用品:試管、濾紙、可見(jiàn)光分光光度計(jì)、離心機(jī)、眼科鑷等。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
52、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響,[實(shí)驗(yàn)方法] 1.小鼠10只,分為對(duì)照組和黃四君子組,對(duì)照組1g生理鹽水0.2ml/10g,四君子組1g四君子水煎液0.2ml/10g,每日一次,共三天。 2.小鼠摘眼球取血,滴入小試管中,2000r/min離心5分鐘,得血清。
53、 3.按照以下步驟在測(cè)定管和對(duì)照管中加入試劑:,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響,[實(shí)驗(yàn)方法],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
54、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響,4、混勻10分鐘后,550nm,1cm的比色杯蒸餾水調(diào)零比色。5、計(jì)算對(duì)照管光密度-測(cè)定管光密度 3.93(總反應(yīng)量)對(duì)照管光密度 ÷50%× 0.03(取樣量)=SOD
55、Nu/ml,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果]將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表中:,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
56、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 酸棗仁湯具有養(yǎng)血安神、清熱除煩作用,適用于失眠之癥,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察酸棗仁湯對(duì)安定引起小鼠睡眠時(shí)間的影響,以驗(yàn)證其方的催眠作用。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
57、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)器材] ①動(dòng)物:20g左右小白鼠6只,分為兩組;②藥物:酸棗仁湯:酸棗仁20g、甘草30g、知母3g、茯苓20g、川芎10g,配制成100%酸棗仁湯注射液。0.1%安定注射液、生理鹽水適量;③實(shí)驗(yàn)器械:2ml注射器2具、針頭、天平、鼠籠。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
58、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)方法] ①將二組小鼠均按0.2ml/l0g體重的劑量腹腔注入安定注射液,逐一記錄小鼠入睡時(shí)間(翻正作用消失);②注射安定10分鐘后給第l組小鼠腹腔注入0.5ml/l0g生理鹽水,給第
59、2組小鼠腹腔注射同等劑量的酸棗仁湯注射液;③記錄各鼠蘇醒開(kāi)始爬行的時(shí)間,算出各小鼠睡眠的時(shí)間。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果],方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
60、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 金鈴子散具有疏肝泄熱,行氣止痛的作用,適用于胸腹脅肋痛、痛經(jīng)等癥。本實(shí)驗(yàn)用熱板法或扭體法了解金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
61、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)器材] ①動(dòng)物:小白鼠(18-22g) 雌性18—30只;②藥物:金鈴子散:金鈴子50g、玄胡索30g,制成100%金鈴子散煎液;0.1%咖啡;0.6%冰乙酸;生理鹽水適量。③實(shí)驗(yàn)用品:注射器(1ml)、針頭(5號(hào))、熱板鎮(zhèn)痛裝置、鐘罩。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
62、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)方法] ①小鼠熱板法:取18-22g雌性小白鼠,先將動(dòng)物在溫度保持于55℃的熱板上進(jìn)行篩選,測(cè)定各小白鼠的正常痛覺(jué)反應(yīng)(踢后腿、跳躍后足)時(shí)間,共測(cè)二次,每次間隔5分鐘,求平均值(
63、以平均值不超過(guò)30秒為合格),然后將各鼠分別腹腔注射生理鹽水0.25ml/只、0.1%鹽酸嗎啡0.2ml/10g、金鈴子散水煎液0.2ml/10g,給藥后第10、20、30以及60分鐘測(cè)定痛覺(jué)反應(yīng)時(shí)間二次,求平均值。如小白鼠在60秒內(nèi)無(wú)痛反應(yīng),立即取出。按60秒計(jì)算,將所得的痛覺(jué)反應(yīng)時(shí)間,按下列公式計(jì)算,算出用藥后各不同時(shí)間的痛閾提高百分率。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
64、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察,以痛閾提高百分率作縱坐標(biāo),繪出各藥的鎮(zhèn)痛作用時(shí)程曲線,加以比較。 痛閾提高百分率=用藥后平均反應(yīng)時(shí)間—用藥前平均反應(yīng)時(shí)間 用藥前平均反應(yīng)時(shí)間 ×
65、;100% ②小鼠扭體法:選用18-22g小鼠,分二組,每組10只,分別注射同劑量的生理鹽水0.4ml/l0g、金鈴子散藥液0.4ml/l0g,注射后半小時(shí),分別腹腔注射0.6%冰乙酸0.1ml/l0g,引起扭體反應(yīng),5分鐘后開(kāi)始記錄20分鐘小鼠的扭體次數(shù)。 實(shí)驗(yàn)組無(wú)扭體反應(yīng)的百分?jǐn)?shù)-對(duì)照組無(wú)扭體反應(yīng)的百分?jǐn)?shù) 鎮(zhèn)痛百分率= 對(duì)照組扭體反應(yīng)的動(dòng)物百分?jǐn)?shù)
66、 ×100%,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果](1)熱板法鎮(zhèn)痛試驗(yàn),,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
67、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察,[實(shí)驗(yàn)結(jié)果] (2)扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn),方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例
68、 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)的影響,[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯 ①觀察木香檳榔丸對(duì)腸管平滑肌蠕動(dòng)的影響,以探討本方藥物瀉下、理氣的機(jī)理;②學(xué)習(xí)離體組織實(shí)驗(yàn)操作方法。,方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例 長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院,木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)
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