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1、實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn),Genokon Medical Technology,2018.06.28,,,,一、實(shí)驗(yàn)室生物危害二、實(shí)驗(yàn)室生物安全法律法規(guī)三、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù),一、實(shí)驗(yàn)室生物危害,實(shí)驗(yàn)室生物危害包括:1.病毒、細(xì)菌、真菌、毒素和寄生蟲等2.來(lái)自感染實(shí)驗(yàn)室制備、環(huán)境樣本、人和動(dòng)物的血液、體液和各種組織等。,實(shí)驗(yàn)室感染特征,1979-2004;世界范圍內(nèi)確認(rèn)1141例實(shí)驗(yàn)室感染,其中24例死亡,事故特征為:1、確認(rèn)感染的
2、大多數(shù)致病病原體包括: 結(jié)核桿菌 乙肝病毒埃博拉病毒 沙門氏菌布魯氏菌 漢坦病毒2、許多是無(wú)癥狀感染(與化學(xué)相比)3、許多新發(fā)病原體例如:SARS-COV4、大多數(shù)事故中無(wú)特殊暴露事故,實(shí)驗(yàn)室感染原因,發(fā)生感染的原因:80%是不明原因的感染(氣溶膠)20%感染的原因是明確的(割傷,刺傷)80%是由工作人員操作失誤引起(時(shí)間長(zhǎng),工作量大)20%是由設(shè)
3、配故障引起的導(dǎo)致感染的最多的4種實(shí)驗(yàn)室事故實(shí)驗(yàn)操作或溢出產(chǎn)生氣溶膠的吸入經(jīng)皮接觸粘膜污染,實(shí)驗(yàn)室感染必然性和可控性,? 必然性: 客觀存在,無(wú)法避免? 可控性: 只要重視,認(rèn)真對(duì)待是可以控制的.可控制性條件:– 領(lǐng)導(dǎo)重視– 科學(xué)管理– 可靠的硬件– 高素質(zhì)的科技人才隊(duì)伍– 不斷完善的技術(shù)和SOP,氣溶膠的特點(diǎn),生物氣溶膠無(wú)色無(wú)味、無(wú)孔不入,不易發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)人員在自然呼吸中不知不覺吸入而造成感染。若治療控制不及時(shí)會(huì)造成
4、嚴(yán)重后果。與其疾病自然感染相比,有些微生物氣溶膠感染的癥狀不典型(與普通感冒相似),病程復(fù)雜,難以及時(shí)診治,影響預(yù)后。,,,,感染性氣溶膠(infectious aerosol):微粒中含有致病微生物。氣溶膠粒徑(PM2.5)>10μm,一般被阻留在鼻腔內(nèi);<5μm,可進(jìn)入細(xì)支氣管和肺泡。氣溶膠粒子越小,進(jìn)入的部位就越深:<1μm的在肺泡內(nèi)沉積率最高;,中國(guó)實(shí)驗(yàn)室生物安全案例,1.中國(guó)CDC實(shí)驗(yàn)人員感染非典
5、病毒事故:2004年4月,中國(guó)CDC病毒所兩名研究生在做病毒實(shí)驗(yàn)時(shí)感染SARS 病毒。(后患者又引發(fā)同事、家人以及醫(yī)護(hù)人員感染)。1)原因:該所實(shí)驗(yàn)人員多次違規(guī)將未完全滅活的SARS病毒從P3實(shí)驗(yàn)室?guī)С鲋疗胀▽?shí)驗(yàn)室操作而引起。2)事件處理:中國(guó)疾控中心主任李立明引咎辭職,其它有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)人員亦受相應(yīng)處理。,,,經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn):實(shí)驗(yàn)室生物安全無(wú)小事!病原微生物實(shí)驗(yàn)室、特別是高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作的任何疏忽、失誤都可能造成難以彌補(bǔ)的損
6、失。,二、實(shí)驗(yàn)室生物安全法律法規(guī),,國(guó)務(wù)院424號(hào)令生物安全管理?xiàng)l例《條例》共7章,72條。 目的:加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理,保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人 員和公眾的健康。核心思想:對(duì)病原微生物的分類管理,對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分級(jí)管理,,《條例》規(guī)定:國(guó)家對(duì)病原微生物實(shí)行分類管理。根據(jù)其傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或群體的危害程度,將病原微生物分為一~四類,其中一、二類統(tǒng)稱為高致病病原微生物?!稐l例》規(guī)定對(duì)實(shí)驗(yàn)室實(shí)施分級(jí)管理,按防護(hù)
7、水平和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定,將實(shí)驗(yàn)室分為一至四級(jí)。對(duì)一級(jí)、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室需要備案。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室需要國(guó)家強(qiáng)制認(rèn)可《條例》規(guī)定實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人為實(shí)驗(yàn)室生物安全的第一責(zé)任人。,,,危險(xiǎn)度等級(jí),,防護(hù)水平,三、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù),1.生物安全實(shí)驗(yàn)室防護(hù)原則2.生物安全實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)裝備3.實(shí)驗(yàn)室突發(fā)事件應(yīng)急處理,生物安全實(shí)驗(yàn)室防護(hù)原則,實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)三原則:1.安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝備(一級(jí)防護(hù))2.實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和設(shè)施建設(shè)(二級(jí)防護(hù))3
8、.標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和管理制度保證實(shí)驗(yàn)室工作人員不受操作因子感染保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境和外環(huán)境不受操作因子污染,,一級(jí)防護(hù)屏障(直接保護(hù)人員)是指在涉及病原微生物的活動(dòng)中,為消除或減少人員直接暴露于感染性材料,在人員與感染性材料之間設(shè)置物理隔離。一級(jí)防護(hù)包括生物安全柜(關(guān)鍵設(shè)備需要年檢)各種密閉容器包括個(gè)人保護(hù)項(xiàng)目,例如手套,鞋套,口罩,護(hù)目鏡等,,二級(jí)防護(hù)屏障(直接保護(hù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外環(huán)境)是指涉及病原微生物活動(dòng)的設(shè)施為了防止設(shè)
9、施內(nèi)病原微生物、活動(dòng)產(chǎn)生的感染性“三廢(固廢、液廢、氣廢)”等泄露到外環(huán)境而特殊設(shè)計(jì)的物理隔離技術(shù)和方法。BSL-1和BSL-2的二級(jí)屏障包括:實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)和公共通道分開,消毒設(shè)備(如高壓滅菌器)和洗手裝置的使用,,生物安全實(shí)驗(yàn)室主要防護(hù)裝備1.生物安全柜2.高壓滅菌器3.個(gè)人防護(hù)裝備,個(gè)人防護(hù)裝備,個(gè)人防護(hù)裝備選擇原則在危害評(píng)估的基礎(chǔ)上,實(shí)驗(yàn)室工作人員根據(jù)不同級(jí)別的防護(hù)要求選擇適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備工作人員關(guān)注的要點(diǎn):必須
10、十分了解和掌握自己工作性質(zhì)和特點(diǎn)正確的使用方法,1、眼睛的防護(hù),1、安全眼鏡和護(hù)目鏡A)在所有易發(fā)生潛在眼睛損傷(物理、化學(xué)和生物因素引起)的生物安全實(shí)驗(yàn)室中工作時(shí)必須采取眼睛防護(hù)措施B)所選用的眼睛防護(hù)裝備的類型取決于外界危害因子對(duì)眼睛危害程度。建議:工作人員在生物安全實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)不配戴隱形眼鏡 不得戴眼鏡防護(hù)裝備離開實(shí)驗(yàn)室區(qū)域 !,,a 、安全鏡 大多數(shù)情況,佩戴側(cè)面帶有護(hù)罩的安全眼鏡能夠保護(hù)工作人
11、員避免受到大部分實(shí)驗(yàn)室操作所帶來(lái)的損害。,在進(jìn)行有可能發(fā)生化學(xué)和生物污染物質(zhì)濺出的實(shí)驗(yàn)時(shí),必須佩戴護(hù)目鏡。,2、洗眼裝置,規(guī)定:BSL-2和BSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備緊急洗眼裝置 如發(fā)生腐蝕性液體或生物危害液體噴濺至工作人員的眼睛時(shí),應(yīng)該(或在同事的幫助下)在就近的洗眼臺(tái)(洗眼裝置)用大量緩流清水沖洗眼睛表面至少15到30分鐘。,3、淋浴裝置和應(yīng)急消毒噴淋裝置,1) 規(guī)定:--BSL-2實(shí)驗(yàn)室在必要時(shí)應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置 2)要
12、求:保持管道的通暢、必須告知工作人員應(yīng)急消毒噴淋 裝置的擺放位置、培訓(xùn)其操作方法。,4、頭面部防護(hù)裝備,口罩 普通口罩可以保護(hù)部分面部免受生物危害物質(zhì)如血液、體液、分泌液以及排泄物等噴濺物的污染 適用于BSL-1或BSL-2實(shí)驗(yàn)室中使用防護(hù)帽在生物安全實(shí)驗(yàn)室中佩戴簡(jiǎn)易防護(hù)帽可以保護(hù)工作人員避免化學(xué)和生物危害物質(zhì)飛濺至頭部(頭發(fā))所造成的污染要求:工作人員在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)佩帶防護(hù)帽,5、手部防護(hù)裝備 ——手套,
13、1、在接觸感染性物質(zhì) (血液、體液、分泌液、滲出液、以及接觸粘膜和非完整皮膚時(shí)),必須使用合適的手套以保護(hù)工作人員避免受到污染物濺出或生物污染的事故所造成的損害。 2、手套應(yīng)按所從事操作的性質(zhì)符合舒適、靈活、耐磨、耐扎和耐撕的要求,并應(yīng)對(duì)所涉及的危險(xiǎn)提供足夠的防護(hù)。 3、對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行手套選擇、使用前及使用后的配戴及摘除等培訓(xùn)。,,規(guī)范使用手套的幾個(gè)要點(diǎn):手套的選擇:生物安全實(shí)驗(yàn)室一般使用乳膠橡膠或聚腈類或聚氯乙烯手套用
14、于對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑和生物危害物質(zhì)的防護(hù) 手套的檢查:在使用手套前應(yīng)該檢查手套是否退色、穿孔(漏損)或有裂縫。,乳膠手套,聚腈手套,聚氯乙烯手套,,3、手套的使用: a)一般情況下,佩戴一副手套即可(BSL-1和BSL-2實(shí)驗(yàn)室) b)若在生物安全柜中操作感染性物質(zhì)時(shí)(BSL-3實(shí)驗(yàn)室)應(yīng)佩戴兩副手套。 c)在操作過(guò)程中,外層手套被污染,立即用消毒劑噴灑手套并脫下后丟棄在生物安全柜中的高壓滅菌袋中并立即戴
15、上新手套繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。 d)戴好手套后應(yīng)完全遮住手及腕部,如必要可覆蓋實(shí)驗(yàn)服衣袖。,,4、手套的清洗和更換:a)使用一次性手套,不可重復(fù)使用。用后立即進(jìn)行高壓滅菌消毒然后丟棄。b)不得戴著手套離開實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。C) 工作人員在完成感染性物質(zhì)實(shí)驗(yàn),離開生物安全柜之前,應(yīng)該脫去外層手套丟入生物安全柜內(nèi)的高壓滅菌袋中。然后用消毒液噴洗內(nèi)層手套,以避免污染門把手、電燈開關(guān)、電話等(BSL-2和BSL-3實(shí)驗(yàn)室)。,,5、避免手套“觸摸污染”
16、 a)戴手套的手避免觸摸鼻子、面部和避免觸摸或調(diào)整其他個(gè)人防護(hù)裝備(如眼鏡等)b)避免觸摸不必要的物體表面如燈開關(guān)、門把手等c) 注意盡量不去觸摸工作臺(tái)面和其他物品,,戴手套注意要點(diǎn):1)在實(shí)驗(yàn)室工作中要一直保持戴手套狀態(tài)并選擇正確類型和尺寸的手套;2)將手插入手套后將手套口遮蓋實(shí)驗(yàn)服袖;戴手套的手要遠(yuǎn)離面部。,,脫手套過(guò)程及注意要點(diǎn):用一手捏起另一近手腕部處的手套外緣,將手套從手上脫下并將手套外表面翻轉(zhuǎn)入內(nèi);用戴著手套的手
17、拿住該手套;用脫去手套的手指插入另一手套腕部處內(nèi)面;脫下該手套使其內(nèi)面向外并形成一個(gè)由兩個(gè)手套組成的袋狀;丟棄在高溫消毒袋中并進(jìn)行消毒處理。,6、體表防護(hù),防護(hù)服(實(shí)驗(yàn)服、隔離衣、連體衣、圍裙以及正壓防護(hù)服)1、在實(shí)驗(yàn)室中工作人員應(yīng)該一直或持續(xù)穿上防護(hù)服2、清潔的防護(hù)服應(yīng)放置在專用存放處3、污染的防護(hù)服應(yīng)放置在有標(biāo)志的防漏消毒袋中4、每隔適當(dāng)?shù)臅r(shí)間應(yīng)更換防護(hù)服以確保清潔 5、當(dāng)防護(hù)服已被危險(xiǎn)材料污染后應(yīng)立即更換6、離開實(shí)
18、驗(yàn)室區(qū)域之前應(yīng)脫去防護(hù)服。,7、足部防護(hù)裝置,當(dāng)實(shí)驗(yàn)室中存在物理、化學(xué)和生物危險(xiǎn)因子的情況下,穿合適的鞋子和鞋套或靴套??梢苑乐箤?shí)驗(yàn)人員足部(鞋襪)避免受到損傷。BSL-2和BSL-3實(shí)驗(yàn)室要堅(jiān)持穿鞋套或靴套。禁止在生物安全實(shí)驗(yàn)室中穿涼鞋、拖鞋和露趾的鞋。,,實(shí)驗(yàn)室事故應(yīng)急處理,1、樣本溢出處理: ①做好個(gè)人的防護(hù)。②用沾有消毒劑布或紙巾從污染區(qū)的四周向中心覆蓋并吸收溢出物。③向紙巾上傾倒適當(dāng)量的消毒劑。④使用消毒劑時(shí),從
19、溢出區(qū)域的外周開始,向中心進(jìn)行處理。⑤作用適當(dāng)時(shí)間后(30 min),將所處理物質(zhì)清理掉。如果含有碎玻璃或其他銳器,則要使用硬的厚紙板或鑷子來(lái)收集處理過(guò)的物品,并將它們置于可防刺透的容器中以待處理。⑥對(duì)溢出區(qū)域再次進(jìn)行清潔并消毒(如有必要,重復(fù)第2-5步)。⑦將污染材料置于防漏、防穿透的棄物處理容器中。,,2、人員受傷應(yīng)急處理皮膚針刺傷或割傷:立即用大量流水沖洗,盡可能擠出血液,3%碘酒及75%酒精消毒傷口皮膚污染:用水或肥皂
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