氨及其與藻毒素對(duì)鯽魚幼魚的生態(tài)毒理效應(yīng).pdf

1、隨著環(huán)境污染的加劇,世界各地的藍(lán)藻水華頻繁暴發(fā),藍(lán)藻產(chǎn)生的藻毒素和及其衍生物-氨氮等嚴(yán)重影響了環(huán)境和生態(tài)系統(tǒng)。微囊藻毒素可影響魚類的胚胎發(fā)育、行為和生長(zhǎng),也可引起肝臟、腎臟等內(nèi)部器官的病理變化和魚體生理生化指標(biāo)的變化。氨可使魚類運(yùn)動(dòng)遲緩、食欲下降,還可直接影響與水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物抗病力相關(guān)的代謝酶的活性,降低水產(chǎn)動(dòng)物抗病力而發(fā)揮毒性作用。本實(shí)驗(yàn)以太湖常見種鯽魚為受試動(dòng)物,研究了氨及其與藻毒素(MC-LR)對(duì)鯽魚幼魚組織和血液生理生化指標(biāo)的影響

2、,其結(jié)果如下:
　　 1.通過急性毒性實(shí)驗(yàn)得出鯽魚幼魚對(duì)非離子氨在24 h、48 h和96 h的半致死濃度(LC50)分別為0.697±0.036,0.581±0.023,and0.511±0.007 mg L-1；安全濃度為0.123±0.027 mg L-1,半致死濃度隨氨氮暴露時(shí)間延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)。肝臟中過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)三者隨著時(shí)間和氨濃度的增加有相似的波動(dòng)趨勢(shì),96 h在非

3、離子氨濃度為0.282 mg L-1條件下顯著上升,之后隨氨濃度升高有所降低,說明高濃度的氨對(duì)機(jī)體肝臟造成一定的損傷。
　　 2.在氨慢性毒性實(shí)驗(yàn)中,把鯽魚幼魚隨機(jī)分成四個(gè)氨氮濃度組(0.107、0.214、0.321、0.428 mgL-1)和一個(gè)對(duì)照組。分別在氨暴露處理的第15 d、30 d、45 d及60 d(置于曝氣自來水恢復(fù)15 d)取樣,進(jìn)行血液的取樣和指標(biāo)(紅細(xì)胞數(shù)RBC、血紅蛋白Hb、超氧化物歧化酶SOD和丙二醛

4、MDA)等的測(cè)定及部分內(nèi)臟器官(鰓和肝臟)的取樣和指標(biāo)(過氧化氫酶CAT、超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽GSH、谷丙轉(zhuǎn)氨酶GPT、谷草轉(zhuǎn)氨酶GOT、丙二醛MDA及ATP酶)的測(cè)定；并檢測(cè)其染毒期間生理指標(biāo)(特定生產(chǎn)率SGR、蛋白轉(zhuǎn)化率PER、攝食率FR、飼料系數(shù)FCR)的變化。利用統(tǒng)計(jì)軟件SigmaPlot11.0及Excel2003對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析作圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
　　 (1)在氨慢性染毒實(shí)驗(yàn)中,鯽魚的SGR、PER、FR隨

5、氨濃度的升高而顯著降低,而FCR相反則隨著非離子氨濃度的升高而升高,它們的半效應(yīng)濃度(EC50)分別是:0.1997、0.2115、0.2881、0.3049 mgL-1。當(dāng)非離子氨濃度達(dá)到0.321 mgL-1時(shí)對(duì)它們的影響最明顯,說明將魚長(zhǎng)時(shí)間暴露在低濃度的氨溶液中會(huì)抑制其食物的轉(zhuǎn)化率從而影響它們的正常生長(zhǎng)。
　　 (2)氨慢性染毒對(duì)鯽魚肝損傷:經(jīng)過45 d的氨處理鯽魚肝臟中的CAT、SOD、GSH、GPT、GOT、MDA等

6、指標(biāo)有時(shí)間-劑量效應(yīng),經(jīng)過15 d的恢復(fù),某些指標(biāo)(CAT、SOD、GSH)出現(xiàn)代謝補(bǔ)償作用,另外GPT、GOT、MDA等指標(biāo)基本恢復(fù)到正常水平。長(zhǎng)時(shí)間氨中毒對(duì)機(jī)體自身保護(hù)機(jī)能有抑制作用,影響機(jī)體的正常生理代謝。
　　 (3)氨慢性染毒對(duì)鯽魚血液生理生化指標(biāo)的影響:過45 d的氨處理鯽魚血液中RBC、Hb含量隨著氨濃度的升高和暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而出現(xiàn)不同程度的下降,當(dāng)濃度≥0.214 mgL-1時(shí)顯著下降；研究表明,氨對(duì)血清中SOD

7、活性的影響不大,但MDA含量則隨著藥物濃度和時(shí)間的延長(zhǎng)而升高,到45 d時(shí)達(dá)到最高值。經(jīng)過15 d的恢復(fù),RBC、Hb、MDA各濃度組基本恢復(fù)到正常,高濃度組恢復(fù)的較慢。
　　 (4)氨慢性染毒對(duì)鯽魚鰓絲的損傷:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明長(zhǎng)時(shí)間氨對(duì)鯽魚的脅迫作用,可使鰓絲中Na+/K+ATPase、CAT的活性有抑制作用,可使MDA含量降低,氨對(duì)SOD活性影響不大；15 d的恢復(fù)后,Na+/K+ATPase、CAT、MDA基本恢復(fù)到正常水平,

8、而SOD出現(xiàn)代償現(xiàn)象。
　　 3.氨及其與MC對(duì)鯽魚的急性損傷:本實(shí)驗(yàn)選取50、300μg kg-1兩個(gè)劑量MC注射組和0.107、0.428 mg L-1的氨濃度暴露組及它們的復(fù)合對(duì)鯽魚為期168 h的染毒,主要從鯽魚的臨床、解剖癥狀,肝臟、鰓絲及血液的生理生化指標(biāo)來檢測(cè)污染物對(duì)魚類機(jī)體的損傷。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)藻毒素注射組可使其腹部、肛門等處出血,解剖高劑量染毒魚類時(shí)可見明顯的血性腹水,肝臟表面出現(xiàn)明顯

9、的出血點(diǎn)；且MC與氨單一及復(fù)合低濃度組使魚的呼吸頻率有先升高后降低的趨勢(shì),高濃度組會(huì)抑制其呼吸,復(fù)合組較單一組作用更強(qiáng)。
　　 (2)MC注射組短時(shí)間內(nèi)會(huì)使肝臟中CAT活性升高,使SOD活性、GSH含量降低,且有劑量效應(yīng)；單一氨染毒對(duì)其影響較MC的??；氨與MC復(fù)合染毒有交互影響作用會(huì)加重上述現(xiàn)象；實(shí)驗(yàn)中MC注射及氨染毒對(duì)鯽魚鰓絲Na+/K+ATPase活性影響不大。
　　 (3)檢測(cè)動(dòng)物血清中肝臟損傷有關(guān)的酶學(xué)指標(biāo),包括

10、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(AKP)和乳酸脫氧酶(LDH)血清酶活性變化迅速,顯著增加,48 h后升到最高值,且MC對(duì)它們的影響最大,氨對(duì)其無顯著影響。MC和氨單一染毒均可使血液中Hb含量降低,且有時(shí)間-劑量效應(yīng),氨和MC復(fù)合染毒對(duì)其降低有加強(qiáng)作用。MC注射可激活鯽魚血液中SOD活性、升高M(jìn)DA的含量且有顯著差異性,單一氨其影響相對(duì)較小,氨和MC復(fù)合染毒組中MDA含量較單一組的高。
　　 (4)鯽魚肝