大鼠rat免疫球蛋白eigeelisa檢測試劑盒

1、大鼠（大鼠（RatRat）免疫球蛋白）免疫球蛋白E（IgEIgE）ELISAELISA檢測試劑盒檢測試劑盒本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被免疫蛋白E（IgE）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品

2、中的免疫球蛋白E（IgE）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法。1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10

3、分鐘取上清。5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于20℃，避反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標(biāo)儀（450nm）2.高精度加樣器及槍頭：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒溫箱操作注意事項(xiàng)1.試劑盒保存在28℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋

4、中，密封（低溫干燥）保存。3.濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白；按照說明。小鼠細(xì)胞間粘附分子小鼠細(xì)胞間粘附分子1試劑盒實(shí)驗(yàn)原理試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠細(xì)胞間粘附分子1（ICAM1）水平。用純化的小鼠細(xì)胞間粘附分子1（ICAM1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞間粘附分子1（ICAM1），再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞間粘附分子1（ICAM1）抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物

5、，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞間粘附分子1（ICAM1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠細(xì)胞間粘附分子1（ICAM1）濃度。小鼠細(xì)胞間粘附分子小鼠細(xì)胞間粘附分子1試劑盒試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml1瓶7終止液3ml1瓶2酶標(biāo)試劑3ml1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（320ngL）0.5ml1瓶3酶標(biāo)包

6、被板12孔4條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶4樣品稀釋液3ml1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml1瓶12密封袋1個小鼠細(xì)胞間粘附分子小鼠細(xì)胞間粘附分子1試劑盒試劑盒操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。160ngL5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液80ngL4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40ngL3號

7、標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ngL2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ngL1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸