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文檔簡介
1、1鴨生長抑素鴨生長抑素(SS)(SS)酶聯(lián)免疫分析(酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定鴨血清,血漿及相關(guān)液體樣本中生長抑素(SS)含量。實驗原理:實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中鴨生長抑素(SS)水平。用純化的鴨生長抑素(SS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入生長抑素(SS),再與HRP標(biāo)記的生長抑素(SS)抗體結(jié)合,形成抗體抗原酶標(biāo)抗體
2、復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的生長抑素(SS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中鴨生長抑素(SS)濃度。試劑盒組成試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板14819628℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:90ngL0.5ml1瓶0.5ml1瓶
3、28℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固1020分鐘,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細(xì)收集上
4、清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合1020分鐘后,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)
5、分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.27.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心203計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(n5)。5封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6底物請避光保存。7嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為
6、準(zhǔn)。計算:計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:檢測范圍:2ngL80ngL
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