植物維生素eve酶聯(lián)免疫分析elisa_第1頁(yè)
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1、植物維生素植物維生素E(VE)E(VE)酶聯(lián)免疫分析酶聯(lián)免疫分析(ELISA)(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)上海一基實(shí)業(yè)有限公司多年專業(yè)提供:ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品|對(duì)照品、生物試劑,抗體|抗原,培養(yǎng)基,血清、醫(yī)藥中間體、添加劑等科研試劑,質(zhì)量保證,價(jià)格優(yōu)惠,國(guó)內(nèi)生物試劑權(quán)威的供應(yīng)商之一,專業(yè)經(jīng)銷生物科學(xué)領(lǐng)域的知名品牌,擁有齊全的生產(chǎn)和檢測(cè)設(shè)備,實(shí)施嚴(yán)格的管理制度和完善的質(zhì)量保證體系,為廣大客戶提供全面的技術(shù)支持和完善

2、的售后服務(wù)。歡迎來(lái)電咨詢!本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定植物血清,血漿及相關(guān)液體樣本中腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAILR1)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物維生素E(VE)水平。用純化的植物維生素E(VE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAILR1),再與HRP標(biāo)記的腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAILR1)抗體結(jié)合,

3、形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAILR1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物維生素E(VE)濃度。試劑盒組成試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1481962

4、8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:2700ngL0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標(biāo)試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ngL,1200ngL,600ngL,300ngL,150ngL)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試

5、劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔

6、加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):注意事項(xiàng):1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡1530分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封

7、后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(n5)。5封板膜只限一次

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